胰岛素样生长因子2信使RNA结合蛋白3对弥漫型胃癌细胞增殖、迁移和M2巨噬细胞极化的影响

作     者：朱天宇 洪莲莲 凌志强 Zhu Tianyu;Hong Lianlian;Ling Zhiqiang

作者机构：温州医科大学第二临床医学院肿瘤科温州325027 浙江省肿瘤研究所浙江省肿瘤医院杭州310022 中国科学院杭州医学研究所杭州310018 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2024年第41卷第5期

页      面：969-973页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(32271238) 浙江省自然科学基金面上项目(LY20H160005) 浙江省卫生领军人才(浙卫办40号) 浙江省公益技术研究计划实验动物项目(LGD20H160003) 浙江省基础公益研究计划项目(LGF21H160010) 国家卫生健康委科学研究基金-浙江省卫生健康重大科技计划重点项目(WKJ-ZJ-2117) 

主　　题：胃癌 增殖 迁移 巨噬细胞 

摘      要：目的:探讨胰岛素样生长因子2信使RNA(mRNA)结合蛋白3(IGF2BP3)对弥漫型胃癌细胞增殖、迁移和替代活化巨噬细胞(M2)巨噬细胞极化的影响。方法:本研究使用的细胞来源于浙江美森细胞和上海中国科学院细胞库。使用短发夹RNA慢病毒和慢病毒包装质粒分别感染人弥漫型胃癌细胞系NUGC-4和SNU-668,构建IGF2BP3敲低和过表达细胞株以及相应的对照细胞株。应用逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分析各弥漫型胃癌细胞系的IGF2BP3表达水平和转染效率。通过细胞计数试剂盒-8(CCK-8)试验、集落形成试验和划痕试验,探究IGF2BP3对人弥漫型胃癌细胞的增殖和迁移能力的影响。使用佛波酯将人单核细胞THP-1诱导成巨噬细胞,收集对照组和实验组胃癌细胞的条件培养基(CM)处理巨噬细胞,通过RT-qPCR检测M2巨噬细胞标志物分化簇(CD)163、CD206、转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素10(IL-10)和过氧化物酶体增殖激活受体γ(PPARG)。两组间均值比较采用t检验。结果:CCK-8试验显示,对照组450 nm吸光度(A450)高于IGF2BP3敲低组(24 h:0.22±0.10比0.10±0.09,t=6.806,P0.05]。对照CM处理组M2巨噬细胞标志物mRNA相对表达量高于IGF2BP3敲低CM处理组(CD163:1.00±0.02比0.18±0.01,t=86.622,P0.05;CD206:1.00±0.07比0.60±0.08,t=6.303,P0.05;TGF-β1:1.00±0.01比0.81±0.05,t=7.007,P0.05;IL-10:1.00±0.01比0.83±0.03,t=9.798,P0.05;PPARG:1.00±0.02比0.39±0.01,t=41.025,P0.05);对照CM处理组M2巨噬细胞标志物mRNA相对表达量低于IGF2BP3过表达CM处理组(CD163:1.00±0.05比2.31±0.09,t=22.020,P0.05;CD206:1.00±0.01比2.07±0.12,t=15.553,P0.05;TGF-β1:1.00±0.02比1.25±0.03,t=11.128,P0.05;IL-10:1.00±0.05比1.30±0.13,t=3.623,P0.05;PPARG:1.00±0.01比1.50±0.02,t=30.753,P0.05)。结论:IGF2BP3能促进弥漫型胃癌细胞增殖和刺激巨噬细胞向M2型极化,但对弥漫型胃癌细胞迁移能力无影响。