基于ferritin纳米载体的抑制素α亚基的多克隆抗体的制备

作     者：韩璐 宋新辉 徐佳寅 张家宁 覃朝斌 羊玉凤 刘庆友 李志鹏 HAN Lu;SONG Xinhui;XU Jiayin;ZHANG Jianing;QIN Chaobin;YANG Yufeng;LIU Qingyou;LI Zhipeng

作者机构：广西大学动物科学技术学院亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室南宁530004 佛山科学技术学院生命科学与工程学院动物分子设计与精准育种广东省重点实验室佛山528225 

出 版 物：《基因组学与应用生物学》 (Genomics and Applied Biology)

年 卷 期：2024年第43卷第5期

页      面：877-889页

学科分类：08[工学] 0905[农学-畜牧学] 09[农学] 0836[工学-生物工程] 090501[农学-动物遗传育种与繁殖] 

基　　金：广西重点研发计划创新驱动项目(桂科AB18294046)资助 

主　　题：抑制素α 生物信息学 原核表达 多克隆抗体 

摘      要：为了制备高效价和多动物适用性的抑制素α(inhibinα,INH-α)多克隆抗体,通过生物信息学分析INH-α物种同源保守性,并以pET-32α为骨架,构建INH-α和INH-α-Ferritin表达载体,原核表达纯化后的重组蛋白用于免疫日本大耳兔,采用间接ELISA方法测定兔血清中抗体效价。结果表明,本研究成功构建了INH-α和INH-α-Ferritin原核表达载体,在0.4 mmol/L IPTG、37℃诱导6 h的条件下,分别获得了35 kDa和50 kDa包涵体形式的重组蛋白。通过免疫获得了高效价的兔抗多克隆抗体,INH-α-Ferritin抗血清效价达到1∶19531250。生物信息学分析结果显示INH-α在哺乳动物间的同源性高、保守性强。本研究成功构建INH-α和INH-α-Ferritin原核表达载体,并通过INH-α-Ferritin显著提高多克隆抗体的效价,为提高哺乳动物家畜繁殖力的研究奠定基础。