CircFN1调节miR-375/CBX3轴对食管鳞状细胞癌细胞放射敏感性的影响

作     者：易琼 俞岑明 魏晟 邰国梅 YI Qiong;YU Cenming;WEI Sheng;TAI Guomei

作者机构：南通大学附属肿瘤医院(南通市肿瘤医院)放疗科江苏南通226361 

出 版 物：《中华肿瘤防治杂志》 (Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment)

年 卷 期：2024年第31卷第6期

页      面：345-353页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：江苏省卫生健康委面上项目(H2023081) 南通市科技面上项目(JC22022093)。 

主　　题：CircFN1 miR-375 CBX3 食管鳞状细胞癌 放射敏感性 增殖 凋亡 

摘      要：目的 探讨CircFN1调节miR-375/染色框同源物3(CBX3)轴对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞放射敏感性的影响。方法 将si-NC、si-CircFN1、si-CircFN1+inhibitor NC和si-CircFN1+miR-375 inhibitor分别转染至ESCC细胞(KYSE-150),分别作为si-NC组、si-CircFN1组、si-CircFN1+inhibitor NC组和si-CircFN1+miR-375 inhibitor组。细胞转染后用2、4、6和8 Gy 6 MV-X射线照射。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞CircFN1和miR-375表达;蛋白质印迹法检测细胞CBX3蛋白表达;克隆形成实验检测KYSE-150细胞受照后的克隆形成能力;CCK8检测KYSE-150细胞活力;Transwell和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力;双荧光素酶报告基因实验验证CircFN1与miR-375以及miR-375与CBX3的关系。数据以6次重复实验的X±S表示,单因素方差分析和SNK-q检验比较多组间差异。结果 2、4、6和8 Gy照射后,si-CircFN1组较si-NC组KYSE-150细胞克隆形成率降低,si-CircFN1+miR-375 inhibitor组较si-CircFN1组和si-CircFN1+inhibitor NC组克隆形成率升高(P0.05),si-CircFN1组、si-CircFN1+inhibitor NC组和si-CircFN1+miR-375 inhibitor组放射增敏比(SER)分别为为1.352、1.374和1.011。在0 Gy 6 MV-X射线照射下,si-CircFN1组较si-NC组相比,CircFN1与CBX3水平、迁移率和侵袭细胞数量均下降(P0.05),miR-375表达量增高(P0.05);D(450 nm)值(0.51±0.05 vs 0.97±0.11)降低,q=14.196,P0.001;凋亡率[(16.51±1.45)%vs(5.97±0.62)%]升高,q=22.412,P0.001。与si-CircFN1+inhibitor NC组相比,si-CircFN1+miR-375 inhibitor组CBX3水平、迁移率、侵袭细胞数量上升(P0.05),miR-375表达量下降(P0.05),D(450 nm)值(0.94±0.09 vs 0.53±0.05)升高(q=12.653,P0.001),凋亡率[(6.23±0.67)%vs(15.76±1.55)%]下降,q=20.207,P0.001。在4 Gy 6 MV-X射线照射下,si-CircFN1组与si-NC组相比,CircFN1与CBX3水平、迁移率和侵袭细胞数量均下降(P0.05),miR-375表达量升高(P0.05),D(450 nm)值(0.23±0.02 vs 0.77±0.08)下降(q=25.456,P0.001),凋亡率[(22.23±2.58)%vs(9.77±0.98)%]升高,q=15.263,P0.001;与si-CircFN1+inhibitor NC组相比,si-CircFN1+miR-375 inhibitor组CBX3水平、迁移率、侵袭细胞数量上升(P0.05),miR-375表达量均下降(P0.05),D(450 nm)值(0.73±0.06 vs 0.22±0.02)上升(q=24.042,P0.001),凋亡率[(10.34±1.23)%vs(23.67±2.62)%]下降,q=16.329,P0.001。且4 Gy照射后各组KYSE-150细胞CBX3水平、D(450 nm)、迁移率和侵袭细胞数量低于对应的0 Gy各组,miR-375表达量和凋亡率高于对应的0 Gy各组,均P0.05。结论 沉默CircFN1可能通过上调miR-375来抑制CBX3表达,进而增加ESCC细胞放射敏感性。