鼠尾草酸影响线粒体功能抑制破骨细胞分化

作     者：李海山 吴宇桁 梁梓炫 张诗茵 张朕 麦彬 邓威 李永贤 唐永超 张顺聪 袁凯 Li Haishan;Wu Yuheng;Liang Zixuan;Zhang Shiyin;Zhang Zhen;Mai Bin;Deng Wei;Li Yongxian;Tang Yongchao;Zhang Shuncong;Yuan Kai

作者机构：广州中医药大学第一附属医院广东省广州市510405 广东省中医临床研究院广东省广州市510405 广州中医药大学岭南医学研究中心广东省广州市510405 广州中医药大学第七临床医学院广东省深圳市518100 

出 版 物：《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2025年第29卷第2期

页      面：245-253页

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 1002[医学-临床医学] 08[工学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100215[医学-康复医学与理疗学] 0836[工学-生物工程] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：广州市科技计划项目(202201020295),项目负责人:袁凯 广东省基础与应用基础研究基金项目(2021A1515012168),项目负责人:张顺聪 广州市科技计划项目(202201020500),项目负责人:唐永超 广州市科技计划项目(202201020533),项目负责人:张顺聪 广州市科技计划项目(202102021040),项目负责人:李永贤 广州中医药大学第一附属医院中青年重点人才培养项目(2023.10),项目负责人:李永贤 中华中医药学会青年人才托举工程项目(2022-QNRC2-B11),项目负责人:李永贤 

主　　题：鼠尾草酸 活性氧 线粒体活性 RANKL 破骨细胞 

摘      要：背景:鼠尾草酸是在迷迭香中发现的一种生物活性化合物,已被证明可减少炎症和活性氧,但在破骨细胞分化进程中的作用机制尚不明确。目的:探讨鼠尾草酸对破骨细胞活化、活性氧产生及线粒体功能的影响。方法:体外提取培养小鼠来源的原代骨髓源巨噬细胞,使用CCK-8细胞活力实验检测不同浓度(0,10,15,20,25和30μmol/L)鼠尾草酸对骨髓源巨噬细胞的增殖和毒性作用,筛选出安全作用浓度。将骨髓源巨噬细胞按照浓度梯度分组培养,核因子κB受体活化因子配体诱导破骨细胞5-7 d后,分别进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色、F-actin染色、H2DCFDA探针和线粒体活性氧、Mito-Tracker荧光检测,观察鼠尾草酸对破骨细胞分化和功能的影响;通过Western Blot及RT-PCR实验检测鼠尾草酸对核因子κB受体活化因子配体诱导的丝裂原激活蛋白激酶信号通路上下游基因和蛋白的影响。结果与结论:①抗酒石酸酸性磷酸酶和F-actin染色显示:鼠尾草酸以浓度依赖性地抑制体外破骨细胞分化及细胞骨架肌动蛋白环形成,其中鼠尾草酸30μmol/L组的抑制作用最显著;与其他干预时期相比,鼠尾草酸在破骨分化的早期(第1-3天)抑制作用最显著;②H2DCFDA探针和线粒体活性氧、Mito-Tracker荧光显示:鼠尾草酸抑制细胞活性氧和线粒体内活性氧的产生,同时减少线粒体膜电位,影响线粒体的功能;③Western Blot及RT-PCR结果显示:鼠尾草酸可抑制与破骨分化相关的NFATc1、CTSK、MMP9、C-fos蛋白的表达,下调与破骨分化相关的NFATc1、Atp6vod2、ACP5、CTSK和C-fos基因的表达;鼠尾草酸还可以增强抗氧化酶蛋白的表达,减少破骨分化过程中活性氧的产生;④鼠尾草酸抑制P38/ERK/JNK蛋白的磷酸化修饰,通过激活MAPK信号通路抑制骨髓源巨噬细胞破骨细胞分化。