HSD17B12对兔卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响

作     者：韩旭东 任宇尧 刘燕 赵博昊 吴信生 陈阳 HAN Xudong;REN Yuyao;LIU Yan;ZHAO Bohao;WU Xinsheng;CHEN Yang

作者机构：扬州大学动物与科学学院江苏扬州225000 浙江省农科院畜牧兽医研究所浙江杭州310000 

出 版 物：《中国畜牧杂志》 (Chinese Journal of Animal Science)

年 卷 期：2024年第60卷第5期

页      面：206-212页

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

基　　金：财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系资助(CARS-43-A-1) 江苏现代农业产业技术体系建设专项(JA TS445) 浙江省农业新品种选育重大科技专项(2021C02068-7) 扬州大学青蓝工程项目 

主　　题：HSD17B12 兔 颗粒细胞 增殖 凋亡 

摘      要：本实验旨在研究羟基类固醇17-β脱氢酶12(17βHydroxysteroid Dehydrogenase Type 12,HSD17B12)对兔卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响。首先克隆了兔HSD17B12基因,进行生物信息学分析;分离原代兔颗粒细胞(Granulosa Cells,GCs),并利用FSHR免疫荧光法进行鉴定;构建HSD17B12基因过表达质粒及干扰RNA,转染GCs,利用qRT-PCR检测HSD17B12对增殖、凋亡相关基因的调控作用,并利用流式细胞、CCK8等方法检测HSD17B12对GCs增殖、凋亡的影响。结果显示:①利用FSHR免疫荧光染色,鉴定分离原代细胞是GCs,FSHR表达呈阳性。②克隆HSD17B12基因,发现其cDNA全长为938 bp,编码312个氨基酸。进化树显示兔与黑猩猩(Pan Troglodytes)、猕猴(Macaca Mulatta)等聚在一起,鸡(Gallus Gallus)为外支。③过表达HSD17B12可以提高增殖相关基因AKT1-1的表达(P0.01),降低凋亡相关基因Bad、Fas、FasL、P53(P0.01)以及Bcl-2(P0.05)的表达;干扰后,对基因的调控作用相反。④HSD17B12可促进GCs增殖,抑制GCs凋亡(P0.01)。因此,HSD17B12可能通过调控AKT1、Bad、Fas、FasL、P53等基因的表达,显著促进兔GCs增殖,抑制其凋亡,为其在母兔卵巢发育中的作用机制研究提供理论依据。