定点突变提高海洋氧化节杆菌KQ11右旋糖酐酶的催化活性

作     者：夏冰冰 马岱 叶子凡 杨静文 张洪斌 胡雪芹 

作者机构：合肥工业大学食品与生物工程学院 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 07[理学] 

基　　金：安徽省自然科学基金(2108085MC120) 

主　　题：右旋糖酐酶 定点突变 比活力 底物通道 

摘      要：右旋糖酐酶是一种专一性水解α-1，6糖苷键的酶。本文针对海洋氧化节杆菌(Arthrobacter oxidans) KQ11来源的右旋糖酐酶，采用定点突变方法对参与“隧道状结合位点的氨基酸进行改造，并在此基础上对507位进行了饱和突变，获得了酶活和催化效率提高的突变酶A356G、S357W、W507Y、W507F。与野生株(wild type， WT)相比，突变体W507Y的比活力提高了2倍，kcat提高了3.62倍，Km下降了54%，催化效率kcat/Km提高了8.98倍。三维结构分析表明，相比于WT突变体W507Y与“隧道状结合位点的另一侧氨基酸间的距离缩短，更易产生氢键作用力，因此加快了底物的水解和产物排出，使得酶活和催化效率大幅提高。