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过表达Krüppel样因子7对小鼠视神经钳夹后视网膜神经节细胞保护作用及机制研究

Protective effect and mechanism of Krüppel-like factor 7 overexpression on retinal ganglion cells in mice after optic nerve clamp

作     者:顾竞赛 陈震 徐奕爽 郑红梅 花蒂豪 Gu Jingsai;Chen Zhen;Xu Yishuang;Zheng Hongmei;Hua Dihao

作者机构:武汉大学人民医院眼科中心武汉430060 

出 版 物:《中华眼底病杂志》 (Chinese Journal of Ocular Fundus Diseases)

年 卷 期:2024年第40卷第4期

页      面:303-310页

学科分类:1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

基  金:中央高校基本科研业务费专项资金(青年教师资助项目)(2042022kf1095)。 

主  题:Krüppel样因子7 视神经钳夹 视网膜神经节细胞 神经生长因子 酪氨酸激酶 B淋巴细胞瘤-2 B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白 

摘      要:目的观察过表达Krüppel样因子7(KLF7)对视神经钳夹损伤(ONC)后小鼠视网膜神经节细胞(RGC)的保护作用和机制。方法10周龄C57BL/6J小鼠65只随机分为空白对照组(A组)、玻璃体腔注射(IVT)-KLF7组(B组)、IVT-磷酸盐缓冲液-ONC组(C组)、IVT-KLF7-ONC组(D组)、IVT-重组腺相关病毒2-重组绿色荧光蛋白-ONC组(E组),每组各13只小鼠。建立ONC模型后7 d,处死各组小鼠。全视网膜铺片免疫荧光染色计数RGC存活率;蛋白质免疫印迹法检测小鼠视网膜组织中KLF7、神经生长因子(NGF)、酪氨酸激酶A(TrkA)、磷酸化TrkA(pTrkA)、酪氨酸激酶B(TrkB)、磷酸化TrkB(pTrkB)、生长相关蛋白43(GAP43)、脑源性神经营养因子、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)蛋白相对表达水平。组间比较采用单因素方差分析或Kruskal-Wallis检验。结果ONC后7 d,A组、B组、C组、D组、E组视网膜中RGC密度分别为(3707.4±12.8)、(3582.4±13.3)、(1396.3±16.1)、(1658.3±22.2)、(1323.6±16.9)个/mm^(2);与C组、E组比较,D组RGC密度显著升高,差异有统计学意义(P=0.028、0.007)。与A组、B组、C组、E组比较,D组小鼠视网膜中NGF、pTrkA、pTrkB、GAP43、Bcl-2蛋白相对表达量升高,BAX、Caspase-3蛋白相对表达量降低,差异均有统计学意义(P0.01)。结论小鼠ONC模型中,过表达KLF7可相对提高RGC存活率,提高视网膜中NGF、pTrkA、pTrkB、GAP43、Bcl-2蛋白相对表达量,降低BAX、Caspase-3蛋白相对表达量。

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