基于CA-TM融合蛋白的梅迪-维斯纳病毒胶体金免疫层析检测方法的建立与应用

作     者：陈思旭 包磊 李慧萍 张良 刘淑英 

作者机构：内蒙古农业大学兽医学院 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室 内蒙古自治区基础兽医学重点实验室 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2024年

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目（32072819，32360863） 内蒙古科技重大专项计划项目(2021ZD0010) 内蒙古草原英才创新团队项目（20151031） 内蒙古教育厅兽医基础与牛羊疫病防控技术研发创新团队项目（NMGIRT2412） 内蒙古自治区研究生科研创新项目（B20210174Z） 

主　　题：梅迪-维斯纳病毒 原核表达 融合蛋白 胶体金 免疫层析 

摘      要：旨在建立一种快速、准确的梅迪-维斯纳病毒（MVV）抗体的胶体金免疫层析检测方法。利用本实验室的重组CA-TM融合蛋白（rCA-TM）标记检测线，以鸡IgY抗体标记质控线，以重组链球菌蛋白（r-SPG）与鸡IgY用于胶体金标记。经各条件优化建立MVV胶体金免疫层析快速检测方法，并通过特异性、敏感性、稳定性以及临床应用对其检测效果进行评价。结果显示，成功表达、纯化并获得了rCA-TM；成功建立的胶体金免疫层析法特异性试验结果显示不能检测除MVV以外的如口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、绵羊肺炎支原体、布鲁菌等绵羊常见病原；敏感性试验结果显示最低可检出2400倍稀释的MVV阳性血清；稳定性试验结果显示在模拟6个月避光常温密封保存后的试纸条仍具有良好的检测性能。利用建立的MVV胶体金检测法和广泛应用于MVV检测的进口商品化MVV抗体ELISA检测试剂盒对40份疑似病例血清样品进行对比检测，结果显示：用胶体金检测方法检出MVV抗体阳性血清17份，阴性血清23份；用进口商品化MVV抗体ELISA检测试剂盒检出阳性血清16份，阴性血清24份，二者相比整体符合率为97.5%。综上，成功建立了MVV胶体金免疫层析快速检测方法，该方法研制的检测试纸条性能良好、便于储存、适合现场快速检测和批量检测，对MVV的监测、防控有重要意义，为内蒙古地区MVV的净化提供新的检测方案。