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眼镜蛇神经毒素分离纯化及其经大鼠直肠给药吸收的实验研究

The experimental studies on isolation and purification of cobra neurotoxin and its absorption via rectal administration in rats

作     者:张昊 廖明 张学荣 周怡 孔露平 胡少聪 肖曼琪 张子彦 罗小玲 ZHANG Hao;LIAO Ming;ZHANG Xue-rong;ZHOU Yi;KONG Lu-ping;HU Shao-cong;XIAO Man-qi;ZHANG Zi-yan;LUO Xiao-ling

作者机构:广西医科大学基础医学院广西南宁530021 广西医科大学生命科学研究院广西南宁530021 广西医科大学附属肿瘤医院实验研究部广西南宁530021 

出 版 物:《中国药理学通报》 (Chinese Pharmacological Bulletin)

年 卷 期:2024年第40卷第4期

页      面:687-694页

核心收录:

学科分类:100405[医学-卫生毒理学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 1010[医学-医学技术(可授医学、理学学位)] 100215[医学-康复医学与理疗学] 10[医学] 

基  金:国家自然科学基金资助项目(No 82260386) 

主  题:眼镜蛇 神经毒素 直肠给药 免疫组化 质谱 镇痛 

摘      要:目的利用色谱技术从眼镜蛇粗毒中分离纯化神经毒素,探索神经毒素经大鼠直肠途径给药后的吸收情况和镇痛活性。方法通过CM Sepharose Fast Flow阳离子交换色谱和Sephadex G-50凝胶过滤色谱两步法分离纯化神经毒素。采用免疫组织化学技术观察神经毒素在大鼠直肠组织中的分布。利用Shotgun质谱技术和数据库检测大鼠血浆神经毒素片段。利用HE染色观察神经毒素对大鼠直肠组织结构的影响。利用醋酸扭体法测定神经毒素直肠给药后镇痛活性。结果通过色谱分离纯化得到电泳纯的神经毒素。神经毒素直肠给药3 h后直肠黏膜组织内神经毒素分布明显,阳性面积比率、平均光密度值、H-SCORE值与对照组相比差异明显(P0.01)。质谱检测到大鼠血浆中神经毒素有关片段。HE染色表明神经毒素对大鼠直肠组织没有损伤,组织结构无明显病理变化。醋酸扭体法测定小鼠直肠给药神经毒素3 h后扭体抑制率达50%,提示具有镇痛活性。结论眼镜蛇神经毒素可以通过直肠吸收入血并且发挥镇痛作用,为后续研究眼镜蛇神经毒素直肠给药制剂提供实验依据。

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