端粒酶TERT通过向线粒体转位抵抗胃癌细胞铁死亡的发生机制

作     者：刘思琪 郝名英 黄欣宇 耿鑫 LIU Siqi;HAO Mingying;HUANG Xinyu;GENG Xin

作者机构：天津医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系天津300070 

出 版 物：《天津医科大学学报》 (Journal of Tianjin Medical University)

年 卷 期：2024年第30卷第2期

页      面：110-115页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：天津市教委科研计划(2021ZD037) 

主　　题：端粒酶 胃癌 铁死亡 线粒体 

摘      要：目的:探究胃癌细胞铁死亡发生时,端粒酶TERT如何抵抗铁死亡的发生。方法:提取胃癌细胞BGC823的线粒体及细胞总蛋白,通过蛋白质印迹实验检测10μmol/L erastin处理细胞后,铁死亡相关蛋白SLC7A11、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)及端粒酶蛋白TERT表达量的变化以及线粒体中TERT含量变化;通过免疫荧光实验检测TERT是否定位于线粒体;使用5μmol/L bosutinib预处理细胞后再加入10μmol/L erastin处理细胞,通过免疫荧光实验检测TERT与线粒体定位情况;通过活性氧簇(ROS)检测试剂盒、丙二醛(MDA)检测试剂盒、Fe^(2+)检测试剂盒分别检测ROS、MDA、Fe^(2+)含量变化;通过CCK-8及划痕实验检测细胞生长、增殖及迁移能力。结果:蛋白质印迹实验结果显示,GPX4(t=15.30,P0.001)、SLC7A11(t=5.228,P0.01)、TERT(t=3.682,P0.05)水平明显降低,线粒体中TERT含量降低(t=6.736,P0.001)。免疫荧光实验结果显示,TERT定位于线粒体,联合用药组细胞免疫荧光实验结果显示TERT更多的定位在细胞核。联合用药组与单独用药组相比,铁死亡指标ROS(t=4.109,P0.05)、MDA(t=6.491,P0.01)、Fe^(2+)(F=9.703,P0.01)含量均升高,CCK-8(F=4.706,P0.05)及划痕实验(t=4.631,P0.05)结果显示细胞增殖、迁移能力进一步降低。结论:铁死亡发生时,TERT由细胞核向线粒体进行转位,使用bosutinib抑制TERT向线粒体转位后,铁死亡相关指标增强,抑制TERT转位可以增强铁死亡的发生,抑制胃癌细胞生长、增殖。