缺氧诱导因子-1调控血红素氧化酶-1在急性肾损伤的作用机制

作     者：李金岩 李柏均 胡伟民 邹凡 余伟民 程帆 Li Jinyan;Li Bojun;Hu Weimin;Zhou Fan;Yu Weimin;Cheng Fan

作者机构：武汉大学人民医院泌尿外科武汉430060 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2024年第41卷第1期

页      面：74-77页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主　　题：缺氧诱导因子-1 缺血再灌注 血红素氧化酶1 铁死亡 

摘      要：目的探究缺氧诱导因子-1(HIF-1)在肾缺血再灌注损伤中引起急性肾损伤(AKI)的作用及机制的研究。方法C57小鼠20只(6~8周龄,体重20~25 g),其中10只为野生型(WT)鼠,10只为纯合子肾小管上皮细胞特异敲低HIF-1(cKO)小鼠。按照简单随机法进行分组,将WT小鼠随机分为假手术(Sham)组和缺血再灌注(IR)组,每组各5只;cKO小鼠分随机为Sham组与IR组,每组各5只。用1%戊巴比妥钠注射小鼠尾静脉,手术组分离两侧肾动静脉结扎60 min后解除夹闭,24 h后切除肾脏,构建肾缺血再灌注模型。通过苏木精-伊红(HE)染色判断肾小管损伤情况;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肾脏组织中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和铁含量;蛋白质印迹法(Western blot)检测血红素氧化酶1(HO-1)及铁死亡相关指标的蛋白表达水平;免疫组织化学染色(IHC)检测HIF-1、HO-1、铁死亡相关组织的表达。两组间差异比较采用单样本t检验。结果HE染色结果显示,WT小鼠中IR组肾小管上皮细胞受损程度高于Sham组(9.78±1.07比2.43±0.93,t=5.438,P0.05);敲低HIF-1后cKO-IR组细胞损伤程度也高于WT-IR组(28.59±2.57比9.78±1.07,t=3.348,P0.05),差异均有统计学意义。Western blot结果显示在WT小鼠中IR组HIF-1的表达趋势高于Sham组(0.996±0.068比0.634±0.072,t=10.482,P0.05),IR组HO-1的表达趋势也高于Sham组(0.734±0.153比0.592±0.097,t=8.942,P0.05),差异均有统计学意义。免疫组织化学染色结果显示,WT小鼠与cKO小鼠在IR模型中比较,WT-IR组中HIF-1阳性表达面积高于cKO-IR组(8.52±0.21比4.35±0.16,t=5.769,P0.05),WT-IR组中HO-1阳性表达面积高于cKO-IR组(8.53±0.22比3.43±0.18,t=7.534,P0.05),差异均有统计学意义。结论肾缺血再灌注模型中HIF-1表达反应性增加,敲低HIF-1可加重肾损伤,HIF-1可能通过调控HO-1缓解铁死亡进而减轻肾损伤。