双硫仑治疗小鼠肥胖的安全性和有效性评价

作     者：武晓慧 马子怡 张钊华 张琳贻 党怡雄 廉婷 WU Xiao-hui;MA Zi-yi;ZHANG Zhao-hua;ZHANG Lin-yi;DANG Yi-xiong;LIAN Ting

作者机构：西安医学院临床医学院陕西西安710021 西安医学院药学院陕西西安710021 西安医学院公共卫生学院陕西西安710021 

出 版 物：《现代生物医学进展》 (Progress in Modern Biomedicine)

年 卷 期：2024年第24卷第2期

页      面：219-227页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：陕西省卫生健康科研基金项目(2022D018) 陕西省大学生创新创业训练计划项目(S202211840088) 西安医学院校级大学生创新创业训练计划项目(121522088) 陕西省自然科学基础研究计划——一般项目(面上项目)(2023-JC-YB-699) 西安医学院博士科研启动基金(2020DOC04) 陕西省科技厅-科技资源开放共享平台项目(2022PT-44) 

主　　题：双硫仑 肥胖 棕色脂肪细胞 肝细胞水肿 

摘      要：目的:观察双硫仑治疗小鼠肥胖的安全性和有效性。方法:取6周龄C57BL/6J雄性小鼠10只,高脂饲料诱导肥胖后,随机分为双硫仑组(双硫仑玉米油溶液,300 mg/(kg·d)和对照组(等量玉米油),每组5只小鼠。每日灌胃给药1次,连续2周,期间仍给与高脂饲料。监测小鼠食物消耗量和体重。给药结束后取小鼠血清、附睾白色脂肪垫、肩胛间区棕色脂肪和肝脏。白色、棕色脂肪和肝脏进行HE染色,观察细胞形态。电镜下观察棕色脂肪细胞内的脂滴和线粒体。Realtime-qPCR法检测棕色脂肪组织中Ucp1、Fabp4、Prdml6和Cidea的m RNA相对表达量,Western blot法检测Ucp1的蛋白表达量。检测血清中转氨酶ALT和AST含量。取8周龄C57BL/6J雄性小鼠10只,随机分为双硫仑组(双硫仑300 mg/(kg·d)和对照组(等量玉米油),每日灌胃1次,连续2周。给药结束后进行棕色脂肪和肝脏HE染色并检测血清中ALT和AST含量。取8周龄C57BL/6J雄性小鼠10只,随机分为双硫仑组(双硫仑300 mg/(kg·d)和对照组(等量玉米油),每日灌胃1次,连续4周,进行肝脏HE染色并检测血清中ALT和AST含量。取孕13.5天的C57BL/6J胚胎小鼠,进行成纤维细胞原代培养,分为双硫仑组(双硫仑5 mg/L)和对照组(等量DMSO)并诱导分化为棕色脂肪细胞。分化8天后进行油红O染色,观察脂滴形成情况,检测Ucp1、Fabp4、Prdml6和Cidea的m RNA相对表达量和Ucp1的蛋白表达量。结果:肥胖小鼠给药过程中,双硫仑组和对照组的进食量及体重变化并无明显差别(P0.05)。给药结束后,两组白色脂肪细胞大小无明显差别。双硫仑组小鼠棕色脂肪细胞直径和细胞内脂滴明显增大(P0.05)。双硫仑组小鼠棕色脂肪中Cidea和Prdm16的m RNA表达减少(P0.05)。正常体重小鼠双硫仑给药2周后棕色脂肪细胞脂滴也增大。细胞实验结果显示,双硫仑组脂滴形成明显减少,Ucp1、Cidea、Prdm16的m RNA表达明显减少(P0.05);Ucp1的蛋白表达明显减少(P0.05)。肥胖与正常小鼠双硫仑给药2周后均出现明显的肝细胞水肿,血清中ALT和AST升高(P0.05),正常小鼠给药4周后仍有明显肝细胞水肿,ALT和AST升高(P0.05)。结论:短期使用双硫仑对饮食诱导的肥胖小鼠无明显减肥作用;双硫仑在体内、外均可抑制小鼠棕色脂肪细胞的分化。短期使用双硫仑可引起肝损害。双硫仑用于减肥治疗的安全性及有效性尚不够理想。