miRNA-423-5p和干扰素调节因子1对肺腺癌细胞影响的研究

作     者：崔逸爽 赵阅 吴亚男 郑璇 洪紫谦 潘可心 孙国贵 CUI Yishuang;ZHAO Yue;WU Ya'nan;ZHENG Xuan;HONG Ziqian;PAN Kexin;SUN Guogui

作者机构：华北理工大学公共卫生学院河北唐山063210 中国科学院基础医学与癌症研究所浙江杭州310000 河北省医工融合精准医疗重点实验室河北唐山063000 

出 版 物：《中华肿瘤防治杂志》 (Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment)

年 卷 期：2024年第31卷第1期

页      面：1-10页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(82172658) 唐山市小细胞肺癌医工融合精准诊疗基础创新团队(21130203D) 华北理工大学公共卫生学院高水平科研创新团队建设计划(KYTD202309) 

主　　题：miRNA-423-5p 干扰素调节因子1 肺腺癌 增殖凋亡 侵袭迁移 

摘      要：目的探讨miRNA-423-5p与干扰素调节因子1(IRF1)在肺腺癌中的作用及机制。方法体外培养肺腺癌细胞A549、H1299和H1975。实验分组:(1)在过表达miRNA-423-5p实验中,mimics NC作为对照组,miRNA-423-5p作为过表达组;(2)在敲降miRNA-423-5p实验中,ASO-NC作为对照组,ASO-miRNA-423-5p作为敲降组;(3)过表达IRF1实验中,pcDNA3.1作为对照组,pcDNA3.1-IRF1作为过表达组;(4)同时过表达miRNA-423-5p和IRF1实验中,mimics NC+pcDNA3.1作为对照组,miRNA-423-5p+pcDNA3.1作为只过表达miRNA-423-5p组,miRNA-423-5p+pcDNA3.1-IRF1作为同时过表达miRNA-423-5p和IRF1组。采用CCK-8、克隆形成、5-乙炔基-2′-脱氧尿嘧啶核苷(EDU)、蛋白质印迹法、Transwell和划痕实验分别检测各组细胞增殖凋亡、侵袭和迁移能力的影响。通过Star Base数据库预测miRNA-423-5p与IRF1的结合位点,双荧光素酶实验验证miRNA-423-5p与IRF1之间的结合作用。裸鼠皮下成瘤实验检测稳定敲降miRNA-423-5p和稳定过表达IRF1细胞对移植瘤生长的影响。多组比较采用单因素方差分析,两组间比较采用独立样本t检验。结果CCK-8、克隆形成、EDU、蛋白质印迹法、划痕和Transwell实验结果示,过表达miRNA-423-5p会促进H1299细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抑制H1299细胞的凋亡能力,均P0.001。敲低miRNA-423-5p会抑制H1299细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进H1299细胞的凋亡能力,均P0.001。过表达IRF1会抑制H1299细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进H1299细胞的凋亡能力,均P0.001。过表达IRF1可以挽救过表达miRNA-423-5p对H1299细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的作用,均P0.001。Star Base数据库预测显示,miRNA-423-5p与IRF1之间存在结合位点。双荧光素酶实验证明miRNA-423-5p与IRF1可以结合,t=26.470,P0.001。qRT-PCR(t=7.085,P=0.001)和蛋白质印迹法(t=28.660,P0.001)实验表明,miRNA-423-5p可以调节IRF1的表达。裸鼠皮下成瘤实验结果提示,稳定敲降miRNA-423-5p的H1299细胞瘤体体积[(491.40±94.34)mm^(3)vs(382.20±16.04)mm^(3),t=2.825,P=0.037]、瘤组织Ki-67(0.40±0.10 vs 0.24±0.02,t=3.843,P=0.012)和PCNA表达(0.45±0.09 vs 0.25±0.04,t=4.974,P=0.004)均显著降低,稳定过表达IRF1的H1299细胞瘤体体积[(291.50±109.1)mm^(3)vs(125.46±98.52)mm^(3),t=2.766,P=0.040]、瘤组织Ki-67(0.44±0.04 vs 0.25±0.02,t=10.407,P0.001)和PCNA表达(0.39±0.03 vs 0.15±0.02,t=16.305,P0.001)均显著降低。结论miRNA-423-5p可能通过调控IRF1促进肺腺癌的恶性表型。