鼻咽癌放射抵抗细胞株的建立与鉴定

作     者：严振宇 曹祥 葛宜枝 宗丹 何侠 Yan Zhenyu;Cao Xiang;Ge Yizhi;Zong Dan;He Xia

作者机构：南京医科大学附属肿瘤医院江苏省肿瘤医院江苏省肿瘤防治研究所南京210009 南京医科大学第四临床医学院南京210000 

出 版 物：《中华放射肿瘤学杂志》 (Chinese Journal of Radiation Oncology)

年 卷 期：2023年第32卷第12期

页      面：1085-1092页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81872192、82172804) 江苏省卫生健康委员会重点项目(K2019028) 

主　　题：鼻咽肿瘤 放射抵抗 辐射抗性 

摘      要：目的体外构建鼻咽癌放射抵抗细胞株, 为进一步研究鼻咽癌放射抵抗的分子机制提供实验基础。方法采用剂量梯度法照射诱导建立放射抵抗细胞模型5-8F-IR。光学显微镜观察细胞形态变化;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;CCK-8实验检测细胞活力;5-溴-2-脱氧尿嘧啶(EdU)实验检测细胞增殖能力;彗星实验及免疫荧光实验检测细胞DNA损伤修复能力;流式细胞术检测细胞凋亡水平及周期分布;蛋白质印迹法检测DNA损伤相关蛋白γH2AX及凋亡相关蛋白胱天蛋白酶3(Caspase-3)的蛋白表达水平。结果剂量梯度照射后5-8F-IR细胞形态较亲本5-8F细胞形态变长, 5-8F-IR细胞的克隆形成能力(P0.01)、细胞活力(P0.001)、细胞增殖能力(P0.05)、DNA损伤修复能力(P0.05)均明显优于亲本细胞5-8F, 照射后5-8F-IR细胞的凋亡率明显低于5-8F细胞(P0.01), 未接受照射时5-8F-IR细胞处于S期的百分比较5-8F细胞升高, 接受照射后5-8F-IR细胞出现明显的G_(2)/M期阻滞(P0.01), 同时照射后5-8F-IR细胞的DNA损伤相关蛋白γH2AX(P0.001)及凋亡相关蛋白Caspase-3(P0.05)蛋白表达水平明显低于5-8F细胞。结论人鼻咽癌细胞株5-8F经剂量梯度法照射诱导建立的5-8F-IR细胞具有放射抗拒性并显示出与亲代5-8F细胞不同的生物学特性, 为探索鼻咽癌放射抵抗机制提供了研究工具。