青蒿琥酯通过PI3K-Akt通路促进大鼠室管膜下区神经干细胞增殖的体外研究
Artesunate promotes proliferation of rat neural stem cells from subventricular zone via PI3K-Akt pathway in vitro作者机构:第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室重庆400038 南华大学附属第一医院骨科湖南衡阳421000
出 版 物:《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)
年 卷 期:2015年第37卷第8期
页 面:767-771页
核心收录:
学科分类:1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 0710[理学-生物学] 1006[医学-中西医结合] 07[理学] 071006[理学-神经生物学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金(81371340) 国家重点基础研究发展计划(973计划 2014CB541600)~~
主 题:青蒿琥酯 神经干细胞 PI3K-Akt信号通路 室管膜下区
摘 要:目的探讨青蒿琥酯(artesunate,ART)对室管膜下区(subventricular zone,SVZ)神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖的影响。方法不同浓度的ART(400 nmol/L、800 nmol/L、1.6μmol/L、3.2μmol/L)作用于NSCs 24 h后,采用CCK-8法检测其对NSCs增殖的影响。促增殖作用明显的800 nmol/L ART组加入10μmol/L PI3K-Akt通路阻断剂(LY294002),采用CCK-8法检测该通路对NSCs增殖的影响;分别设置空白对照组、LY294002组、800 nmol/L ART组、800 nmol/L ART+LY294002组,待细胞培养24 h时,行Ki-67免疫荧光染色观察ART对NSCs增殖的影响及PI3K-Akt通路在其中的作用,同时采用Western blot检测各组Nestin、Akt及p-Akt蛋白的表达水平。结果 1CCK-8法检测结果显示800 nmol/L ART组在波长450 nm处的光密度值较空白对照组明显升高,在加入LY294002后,其光密度值明显下降(P0.05),与空白对照组水平相当;2Ki-67免疫荧光染色结果提示800 nmol/L ART可促进NSCs增殖,LY294002可抑制这一作用;3Western blot检测结果显示:神经干细胞表面标志蛋白Nestin及p-Akt蛋白表达水平在800 nmol/L ART组明显上调,在加入LY294002后两者表达水平均下调(P0.05)。结论 ART可在体外促进SVZ区NSCs的增殖,其机制与PI3K-Akt信号通路相关。