HES1通过铁死亡调控胃癌细胞对赫赛汀耐药的机制研究

作     者：张金花 常晋霞 汤建才 刘文虎 ZHANG Jin-hua;CHANG Jin-xia;TANG Jian-cai;LIU Wen-hu

作者机构：川北医学院药学院四川南充637100 川北医学院科技创新中心四川南充637100 川北医学院基础医学与法医学院四川南充637100 

出 版 物：《药学学报》 (Acta Pharmaceutica Sinica)

年 卷 期：2023年第58卷第11期

页      面：3354-3365页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：四川省应用基础科研项目(2019YJ0378) 川北医学院重点发展项目(CBY22-ZDA01) 南充市市校合作项目(19SXHZ0298) 

主　　题：SPLIT多毛增强子1 赫赛汀 抗药性 蛋白质组学 铁死亡 TP53/SLC7A11/GPX4 

摘      要：肿瘤耐药是导致化疗失败的主要原因,而基因突变或功能缺失是引起耐药的关键因素。前期研究显示,SPLIT多毛增强子1(hairy and enhancer of SPLIT1,HES1)在赫赛汀耐药胃癌细胞中表达上调,抑制其活性可逆转其耐药,其机制尚未明确。本研究以赫赛汀耐药胃癌细胞NCI N87R为对象,基于CRISPR/Cas9构建HES1敲除细胞(△HES1/NCI N87R),探究HES1在胃癌赫赛汀耐药中的潜在作用。采用定量蛋白质组学分析△HES1/NCI N87R细胞蛋白质表达谱;基于基因集富集分析(GeneSet Enrichment Analysis,GSEA)和Metascape数据库进行基因本体分析;利用GeneAnalytics进行通路富集分析,并通过免疫印迹和抑制剂对筛选分子及通路研究。结果显示,相比NCI N87R细胞,△HES1/NCI N87R对赫赛汀的抗药性降低;敲除HES1使NCI N87R细胞1263种基因表达改变,其中上调761种,下调502种,且铁死亡、脂肪酸β-氧化、自噬、谷胱甘肽代谢等多条通路显著变化。功能研究显示,△HES1/NCI N87R细胞铁离子和丙二醛浓度增加,而谷胱甘肽降低,进一步发现,铁死亡抑制剂Fer-1能够逆转△HES1/NCI N87R中pTP53、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)的表达,且降低对赫赛汀的敏感性,提示HES1通过TP53/SLC7A11/GPX4通路参与调控NCI N87R细胞对赫赛汀耐药,靶向HES1介导的TP53/SLC7A11/GPX4信号轴可能是逆转胃癌赫赛汀耐药的潜在策略。