盐酸右美托咪定通过抑制细胞焦亡发挥脑缺血再灌注损伤保护作用

作     者：赵海峰 范鸣玥 陈亮 秦泽 李红 杨素勉 ZHAO Haifeng;FAN Mingyue;CHEN Liang;QIN Ze;LI Hong;YANG Sumian

作者机构：石家庄市第四医院麻醉科河北石家庄050000 河北省人民医院神经内科河北石家庄050051 河北省人民医院眼科河北石家庄050051 

出 版 物：《中国药理学与毒理学杂志》 (Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology)

年 卷 期：2023年第37卷第10期

页      面：744-752页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：河北省医学科学研究重点课题计划(20190302) 

主　　题：盐酸右美托咪定 脑缺血 再灌注损伤 细胞焦亡 

摘      要：目的探讨盐酸右美托咪定(DEX)减轻脑缺血再灌注损伤(CIRI)与抑制神经细胞焦亡之间的关系。方法①PC12细胞给予氧糖剥夺再复供(OGD/R)处理模拟脑缺血再灌注神经细胞损伤。设细胞对照组、模型组及模型+DEX 2,5和10μmol·L^(-1)组,给药组PC12细胞于OGD/R处理后给予DEX 48 h,采用CCK-8法检测PC12细胞存活率;乳酸脱氢酶(LDH)活性检测试剂盒测定PC12细胞上清LDH释放率;免疫荧光染色法测GSDMD-N蛋白表达水平。②PC12细胞OGD/R处理,设细胞对照组、模型组、模型+VX-7652μmol·L^(-1)组、模型+VX-7652μmol·L^(-1)+DEX 10μmol·L^(-1)组,给药组PC12细胞于OGD/R处理后给予VX-765或VX-765+DEX作用48 h。③通过大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO/R)法制备大鼠CIRI模型。将大鼠分为假手术组、模型组及模型+DEX 25,50和100μg·kg^(-1)组,给药组大鼠于再灌注40 min后ip给予DEX,2和24 h后对大鼠进行神经功能评分和脑梗死体积检测;比色法检测大脑皮质胱天蛋白酶1活性。Western印迹法检测分组①和分组②PC12细胞及分组③大鼠脑组织中GSDMD-N、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)和胱天蛋白酶1蛋白表达水平;ELISA检测分组①和分组②PC12细胞培养上清液及分组③大鼠脑组织匀浆中白细胞介素18(IL-18)和IL-1β水平。结果①与细胞对照组相比,模型组PC12细胞存活率降低(P0.01),细胞上清液中LDH释放率升高(P0.01),GSDMD-N、NLRP3和胱天蛋白酶1蛋白表达及IL-1β和IL-18炎症因子水平明显升高(P0.01);与模型组相比,模型+DEX 2,5和10μmol·L^(-1)组细胞存活率升高(P0.01),PC12细胞LDH释放率降低(P0.05,P0.01),焦亡相关蛋白GSDMD-N、NLRP3和胱天蛋白酶1蛋白表达及IL-1β和IL-18水平降低(P0.05,P0.01)。②与模型组相比,模型+VX-765组PC12细胞GSDMD-N、NLRP3和胱天蛋白酶1蛋白表达及IL-1β和IL-18水平降低(P0.01),与模型+VX-7652μmol·L^(-1)组相比,模型+VX-7652μmol·L^(-1)+DEX 10μmol·L^(-1)组PC12细胞GSDMD-N、NLRP3和胱天蛋白酶1蛋白表达及IL-1β和IL-18水平无显著变化。③与假手术组相比,模型组大鼠脑组织GSDMD-N、NLRP3和胱天蛋白酶1蛋白表达升高(P0.01),IL-1β和IL-18水平增加(P0.01),神经功能评分和脑梗死体积百分比显著增高(P0.01),大脑皮质胱天蛋白酶1活性显著增高(P0.05);与模型组相比,模型+DEX组大鼠脑组织GSDMD-N、NLRP3和胱天蛋白酶1蛋白表达及IL-1β和IL-18水平均显著降低(P0.05,P0.01),神经功能评分、脑梗死体积百分比和脑皮质胱天蛋白酶1活性显著降低(P0.05,P0.01)。结论DEX在体内能降低MCAO/R模型大鼠脑组织GSDMD-N、NLRP3和胱天蛋白酶1蛋白表达及降低IL-1β和IL-18水平,抑制PC12细胞焦亡,从而发挥减轻CIRI作用。