长链非编码RNA MRAK088388通过miR-30a/ATG5轴参与儿童过敏性哮喘

作     者：佘巍巍 孙天寿 龙成凤 陈美宇 陈旭 廖覃雪 王明东 曹炜 SHE Weiwei;SUN Tianshou;LONG Chengfeng;CHEN Meiyu;CHEN Xu;LIAO Qinxue;WANG Mingdong;CAO Wei

作者机构：广西壮族自治区第二人民医院(广西壮族自治区南溪山医院)呼吸与危重症医学科广西桂林541002 

出 版 物：《西安交通大学学报（医学版）》 (Journal of Xi’an Jiaotong University（Medical Sciences）)

年 卷 期：2023年第44卷第5期

页      面：764-772页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100202[医学-儿科学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金地区科学基金项目(No.82060009) 广西医疗卫生重点培育学科建设项目 桂林市科学研究与技术开发计划项目(No.2020011206-1)。 

主　　题：儿童 哮喘 长链非编码RNA MRAK088388 上皮间质转化 

摘      要：目的探究长链非编码核糖核酸(long non-coding ribonucleic acids,lncRNA)MRAK088388与儿童过敏性哮喘之间的关系。方法对15名健康儿童和15名哮喘儿童进行了为期2年的疾病进展监测。在疾病慢性期收集患者血液样本,用于lncRNA/mRNA表达微阵列分析。通过生物信息学分析鉴定了竞争性内源性RNA网络(MRAK088388/miR-30a/ATG5)。体外培养支气管上皮(human bronchial epithelial cells,16HBE)细胞,通过实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)和蛋白质印迹分别用于量化基因和相关蛋白质表达水平。细胞计数试剂盒-8和transwell检测用于评估16HBE细胞的增殖和迁移,验证MRAK088388、miR-30a和ATG5对哮喘的影响。结果通过相关分析鉴定出6个lncRNA-miRNA-mRNA。通过qRT-PCR分析,本次研究选择了MRAK088388/miR-30a/ATG5来构建ceRNA网络。MRAK088388和ATG5表达在哮喘患儿外周血中高表达,miR-30a低表达(P0.05)。si-MRAK088388+TGF-β1组后16HBE细胞中E-cadherin的表达水平显著升高(P0.05),而Vimentin和α-SMA的表达水平显著降低(P0.05),表明敲除MRAK088388可抑制16HBE细胞的上皮间质转化;与si-NC+TGF-β1组的形态相比,si-MRAK088388+TGF-β1组的细胞形态与对照组相似,表明MRAK088388敲低减轻了TGF-β1诱导的细胞形态变化;此外,MRAK088388敲低还抑制了TGF-β1诱导的16HBE细胞增殖和迁移。通过qPCR和蛋白质印迹证实了MRAK088388通过靶向miR-30a/ATG5轴促进儿童哮喘的进展。结论儿童哮喘与MRAK088388/miR-30a/ATG5轴相关,MRAK088388通过负调控miR-30a的表达并调控ATG5表达水平升高来影响支气管上皮细胞间质转化、增殖以及迁移,以此来参与儿童过敏性哮喘进程。