K亚群禽白血病病毒CRISPR/Cas13a检测方法的建立及初步应用

作     者：徐晴晴 王峰 王文秀 莫玲 沈志强 XU Qingqing;WANG Feng;WANG Wenxiu;MO Ling;SHEN Zhiqiang

作者机构：山东省滨州畜牧兽医研究院博士后科研工作站滨州256600 扬州大学博士后科研流动站扬州225009 太仓广东温氏家禽有限公司太仓215488 山东省院士工作站滨州256600 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2023年第31卷第3期

页      面：113-119页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：山东省自然科学基金(ZR2020KC006) 

主　　题：K亚群禽白血病病毒 RPA crRNA CRISPR/Cas13a 

摘      要：为了快速、准确和简便地检测K亚群禽白血病病毒(ALV-K),本研究参照GenBank中ALV-K的gp85基因设计了特异的RPA引物和用于LwCas13a反应系统的crRNA,通过优化反应条件建立了检测ALV-K的CRISPR/Cas13a方法,并验证了该方法的特异性、敏感性和符合性。结果显示,该法对感染鸡的其他常见病毒的检测均为阴性,特异性良好无交叉反应;灵敏度为50 copies/μL;与PCR的检测结果有很好的符合性。本研究建立的CRISPR/Cas13a检测方法配合试纸条显色在1.5 h左右可对ALV-K进行快速的鉴别诊断,为该病的诊断及防控净化提供了强有力的技术支撑。