HNE诱导下PKCδ/θ-Duox1-ROS对气道黏液高分泌影响的体外实验研究

作     者：何明欣 杨雅楼 徐立 杨雨菡 张紫薇 李琪 周向东 

作者机构：海南医学院 海南医学院第一附属医院呼吸内科 国家卫生健康委热带病防治重点实验室 海南省呼吸疾病中心 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2023年

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：海南省重点研发项目(ZDYF2020223) 海南省重大科技专项(ZDKJ2021036) 海南省创新团队项目(820CXTD448) 海南省重点研发计划国际科技合作项目(GHYF2022011) 国家自然科学基金(82160012 82260001) 国家卫生健康委员会热带病防治重点实验室开放课题(2021NHCTDCKFKT21008) 海南省临床医学中心建设项目资助 

主　　题：蛋白激酶Cδ/θ 双重功能氧化酶1 活性氧 黏蛋白5AC 

摘      要：目的 探讨蛋白激酶C (PKC) δ/θ-双重功能氧化酶1 (Duox1) -活性氧 (ROS) 信号通路对人气道黏液 (MUC) 5AC的调控机制及作用，以期为气道黏液高分泌的治疗手段提供新的靶点。方法 分别给予PKC及其亚基PKCδ/θ抑制剂、Duox1抑制剂或自由基清除剂DMTU对人气道上皮细胞 (16HBE) 进行预处理，再给予人中性粒细胞弹性蛋白酶 (HNE) 刺激建立体外气道炎症细胞模型。采用试剂盒测定各组细胞中ROS的生成水平，实时荧光定量PCR检测Duox1和MUC5AC的mRNA水平，Western blotting测定各组细胞干扰因素对Duox1蛋白水平的影响，ELISA和免疫荧光检测MUC5AC在各组细胞中的蛋白表达情况。结果 与对照组相较，HNE组的ROS生成明显增多，Duox1及MUC5AC mRNA和蛋白表达也增加 (P0.05)。结论 在体外细胞模型实验中，HNE可通过PKCδ/θ-Duox1-ROS介导MUC5AC高表达，在气道黏液高分泌的发展过程中起到重要作用。