紫铆因抑制内质网应激恢复内皮细胞线粒体稳态的机制研究

作     者：范崇熙 金振晓 宁守斌 翟蒙恩 李白容 徐梦楠 陈虹羽 张静 郭锐 杨全龙 石学汇 付之光 FAN Chongxi;JIN Zhenxiao;NING Shoubin;ZHAI Meng en;LI Bairong;XU Mengnan;CHEN Hongyu;ZHANG Jing;GUO Rui;YANG Quanlong;SHI Xuehui;FU Zhiguang

作者机构：空军特色医学中心消化内科北京100142 空军军医大学西京医院心血管外科陕西西安710032 空军特色医学中心放射治疗科北京100142 

出 版 物：《空军军医大学学报》 (Journal of Air Force Medical University)

年 卷 期：2023年第44卷第8期

页      面：692-699页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金青年科学基金(81702731) 北京市海淀区卫生健康发展科研培育计划项目(HP2021-19-80801,HP2021-03-80803) 空军军医大学临床研究项目(2021LC2201) 空军特色医学中心博士助推项目(21ZT16) 

主　　题：紫铆因 内质网应激 线粒体稳态 氧化应激 人脐静脉内皮细胞 凋亡 

摘      要：目的探讨紫铆因(BUT)抑制内质网应激信号通路发挥保护血管内皮细胞抗氧化应激诱导凋亡的作用。方法构建低氧诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化应激损伤模型,应用不同浓度BUT(2、4、8μmol/L)处理细胞48 h后,CCK-8法测定细胞活性;TUNEL染色法标记凋亡细胞情况;分别应用DCFH-DA和JC-1染色检测细胞内活性氧(ROS)及线粒体膜电位(MMP)水平;Western blotting法检测内质网应激和凋亡通路主要蛋白变化。此外,联合应用内质网应激特异性激动剂毒胡萝卜素(Tg)后,重复上述检测。结果相对于对照组,低氧损伤降低细胞活力并促进细胞凋亡。同时,低氧损伤诱导MMP发生去极化反应,进而导致细胞内ROS堆积。分子水平研究显示,低氧损伤激活内质网应激信号通路并上调凋亡蛋白的表达。不同浓度的BUT呈“剂量依赖性地抑制内皮细胞凋亡、稳定MMP水平、清除细胞内ROS堆积、恢复内质网功能,最终逆转细胞死亡(P0.05)。应用Tg联合处理后进一步证实,BUT对内皮细胞的抗低氧作用明显减弱(P0.05)。结论BUT通过抑制内质网应激信号通路,稳定线粒体功能,进而清除细胞内ROS蓄积并阻断凋亡过程,介导HUVECs抗低氧损伤的作用。