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改进的反向斑点杂交方法

Improved method in reverse dot blot hybridization

作     者:林炳生 张太松 胥顺 董瑞华 陈华云 李明 程钢 LIN Bingsheng;ZHANG Taisong;XU Shun;DONG Ruihua;CHEN Huayun;LI Ming;CHENG Gang

作者机构:中山大学药学院广东广州510006 中山大学达安基因诊断中心广东广州510665 

出 版 物:《分子诊断与治疗杂志》 (Journal of Molecular Diagnostics and Therapy)

年 卷 期:2011年第3卷第1期

页      面:18-21页

学科分类:100208[医学-临床检验诊断学] 1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基  金:国家科技重大专项(2008ZX10001-013) 

主  题:反向斑点杂交 链霉亲和素过氧化物酶 操作简便 

摘      要:目的改进反向斑点杂交的操作方法,探索更为简便快捷的实验流程。方法优化杂交液II的组分,使用HPV基因分型、β-地中海贫血基因突变和HBV基因分型三个试剂盒验证改进的实验方法。结果 HPV基因分型、β-地中海贫血基因突变和HBV基因分型试剂盒的实验结果证实,使用优化后的杂交液II,链霉亲和素过氧化物酶在杂交温度能够有效地与生物素结合,试剂盒的灵敏度不受影响且膜条的背景低。结论改进的反向斑点杂交方法不影响试剂盒的灵敏度,并且操作简便、实验时间短、实验结果背景低。

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