Tie2在口腔鳞状细胞癌中的表达及其对细胞增殖、迁移及上皮-间充质转化过程的影响

作     者：郑珉 黄怡 费伟 沈阳 聂雄 高明玉 ZHENG Min;HUANG Yi;FEI Wei;SHEN Yang;NIE Xiong;GAO Ming-yu

作者机构：温州医科大学附属舟山医院口腔科舟山316004 四川省医学科学院·四川省人民医院口腔科成都610072 成都市第七人民医院口腔科成都610044 川北医学院口腔医学院南充637000 

出 版 物：《四川大学学报（医学版）》 (Journal of Sichuan University(Medical Sciences))

年 卷 期：2023年第54卷第2期

页      面：342-349页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：四川省卫健委项目(No.30305031136)资助。 

主　　题：Tie2 口腔鳞状细胞癌 ERK AKT 增殖 迁移 上皮-间充质转化 

摘      要：目的 研究酪氨酸激酶受体2(tyrosine kinase receptor 2, Tie2)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)中的表达情况及其对细胞增殖、迁移及上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)过程的影响。方法 采用免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)检测Tie2在OSCC组织与正常口腔黏膜组织中的表达。Western blot检测DOK细胞及OSCC细胞株中Tie2的表达,选取Tie2高表达细胞株作为实验株。将沉默Tie2的慢病毒载体成功转染至实验株用于后续实验。CCK-8及克隆形成实验检测细胞增殖、克隆能力;细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移能力;激光共聚焦显微镜检测细胞骨架纤丝状肌动蛋白(F-actin)重塑能力及上皮钙黏素(E-cadherin)、神经钙黏素(Ncadherin)的表达;Western blot检测EMT相关标志性蛋白E-cadherin、N-cadherin、波形蛋白(vimentin)的表达以及蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)、胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)的表达。结果 IHC结果显示:OSCC组Tie2阳性率(74.5%)高于对照组(19.4%)(P0.000 1)。与DOK细胞相比,Tie2在HSC-4及SCC-9细胞株呈现高表达,慢病毒shRNA-162组沉默效果最好,作为实验组并应用于后续实验。与对照组相比,实验组细胞的增殖、克隆及迁移能力明显降低,细胞骨架F-actin绿色荧光强度降低,细胞前缘丝状伪足数量减少、长度变短;E-cadherin的表达明显增加,Ncadherin、vimentin的表达明显降低。p-AKT及p-ERK蛋白表达降低,AKT及ERK蛋白的表达增加。结论 Tie2在大多数OSCC中呈高表达,沉默Tie2能通过调控AKT及ERK信号通路抑制OSCC细胞增殖克隆迁移能力,抑制F-actin重塑,改变其EMT相关标志性蛋白的表达,提示Tie2可能参与了OSCC的生长、转移及EMT过程。