miR-340-5p及PDCD4在过表达乙肝病毒X蛋白的足细胞中的表达及生物学意义

作     者：丁广智 徐佳 刘畅 吴国志 DING Guangzhi;XU Jia;LIU Chang;WU Guozhi

作者机构：青岛大学附属青岛市海慈医院青岛266033 

出 版 物：《病毒学报》 (Chinese Journal of Virology)

年 卷 期：2023年第39卷第2期

页      面：419-426页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

主　　题：乙型肝炎相关性肾小球肾炎(HBV-GN) 乙肝病毒X蛋白(HBx) 足细胞 miR-340-5p PDCD4 

摘      要：乙肝病毒X蛋白(HBx)引起足细胞损伤与乙型肝炎相关性肾小球肾炎的发病有关,但具体的机制尚不清楚。miR‐340‐5p是受到HBx调控的miR,能够靶向细胞程序性死亡基因4(PDCD4)基因发挥神经元保护作用。本研究观察了过表达HBx的足细胞中miR‐340‐5p及PDCD4表达的变化及生物学意义。培养小鼠足细胞系MPC5后转染HBx质粒、miR‐340‐5p、si‐PDCD4,MTS法检测细胞增殖活力OD490、TUNEL法检测细胞凋亡率、荧光定量PCR检测miR‐340‐5p的表达、Western blot检测PDCD4的表达、双荧光素酶报告基因实验验证miR‐340‐5p靶向PDCD4基因3’UTR。结果显示,与对照组比较,HBx组细胞中miR‐340‐5p的表达、OD490水平降低,PDCD4的表达、凋亡率增加;与HBx组比较,HBx+miR‐340‐5p组细胞中miR‐340‐5p的表达、OD490水平增加,PDCD4的表达、凋亡率降低,HBx+si‐PDCD4组细胞中OD490水平增加,PDCD4的表达、凋亡率降低,miR‐340‐5p的表达无明显改变;PDCD4基因3’UTR中有miR‐340‐5p的结合位点,miR‐340‐5p降低PDCD4基因野生型3’UTR的荧光活力、不影响PDCD4基因突变型3’UTR的荧光活力。以上结果表明,过表达HBx的足细胞中miR‐340‐5p表达减少,进而可能通过增加PDCD4的表达引起足细胞损伤。本研究创新点为探究了HBx引起足细胞损伤的分子机制,国内首次发现miR‐340‐5p靶向PDCD4在HBx引起足细胞损伤中的作用,为今后研究HBV‐GN的发病机制提供了参考。