CircZNF652/ miR-145-5p/ PDCD4分子轴在LPS诱导H9C2心肌细胞纤维化的机制研究

作     者：刘爱军 徐书灿 李礼 朱建华 张永林 

作者机构：滨海县人民医院心内科 

出 版 物：《云南民族大学学报(自然科学版)》 (Journal of Yunnan Minzu University(Natural Sciences Edition))

年 卷 期：2023年

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室开放课题（202104） 

主　　题：环状RNA锌指蛋白652 微小RNA-145-5p 程序性细胞死亡因子4 心肌细胞 纤维化 

摘      要：探究环状RNA锌指蛋白652（CircZNF652）/微小RNA-145-5p（miR-145-5p）/程序性细胞死亡因子4（PDCD4）分子轴对脂多糖（LPS）诱导H9C2心肌细胞纤维化（MF）的影响。双荧光素酶报告基因验证miR-145-5p与PDCD4、miR-145-5p与CircZNF652的靶向关系。敲减CircZNF652、miR-145-5p和PDCD4的mRNA水平后，或者上调CircZNF652、miR-145-5p表达后，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测CircZNF652、miR-145-5p和PDCD4的表达情况。采用CCK-8法检测H9C2细胞增殖活力。流式细胞术检测细胞凋亡。Western Blot法检测细胞中PDCD4、Caspase-3、Caspase-9、MMP2、TIMP2、α-SMA的表达水平。荧光素酶报告基因实验结果显示，CircZNF652是miR-145-5p的一个靶点，PDCD4是miR-145-5p的一个靶点。在LPS诱导的H9C2细胞中，与正常细胞相比CircZNF652、PDCD4表达上调，miR-145-5p表达下调。下调CircZNF652、PDCD4或过表达miR-145-5p可以显著抑制H9C2细胞增殖、促进细胞凋亡和纤维化相关因子TIMP2蛋白表达，减少纤维化相关因子MMP2、α-SMA蛋白的表达（P0.05）。过表达CircZNF652通过调控miR-145-5p促进H9C2细胞增殖和纤维化。miR-145-5p介导的CircZNF652通过调节PDCD4减轻LPS诱导的H9C2细胞MF。