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血管内皮细胞来源外泌体miR-214对H_(2)O_(2)诱导血管内皮细胞损伤的影响

Influence of vascular endothelial cell-derived exosomal miR-214 on H_(2)O_(2)-induced vascular endothelial cell injury

作     者:史斌浩 王建飞 汪贵忠 李陈璇 曹洁 高林 欧阳星文 SHI Binhao;WANG Jianfei;WANG Guizhong;LI Chenxuan;CAO Jie;GAO Lin;OUYANG Xingwen

作者机构:安徽省第二人民医院心内科安徽合肥230041 

出 版 物:《西部医学》 (Medical Journal of West China)

年 卷 期:2023年第35卷第3期

页      面:323-330页

学科分类:1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基  金:2021年度安徽省高校自然科学研究一般项目(ZR2021B003)。 

主  题:外泌体 miR-214 过氧化氢 血管内皮细胞损伤 高血压 

摘      要:目的探讨血管内皮细胞来源外泌体miR-214对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的血管内皮细胞损伤的影响。方法体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),并转染miR-214抑制物(in-miR-214)及其阴性对照(in-miR-NC),分离并鉴定外泌体,同时检测miR-214表达。再次培养HUVEC,分为正常对照组(Control组)、氧化损伤组(H_(2)O_(2)组)、空白外泌体+氧化损伤组(exo NC+H_(2)O_(2)组)、in-miR-NC外泌体+氧化损伤组(exo in-miR-NC+H_(2)O_(2)组)和in-miR-214外泌体+氧化损伤组(exo in-miR-214+H_(2)O_(2)组)。qRT-PCR检测细胞中miR-214表达水平;MTT和流式细胞术检测细胞增殖、凋亡;划痕愈合实验检测细胞迁移;Western blot检测细胞增殖、凋亡、迁移相关蛋白水平。结果成功从HUVEC细胞中分离出外泌体,且转染in-miR-214可抑制外泌体中miR-214表达(P0.05)。H_(2)O_(2)诱导后,HUVEC细胞增殖活力和划痕愈合率降低,凋亡率增高;同时,细胞中miR-214表达水平增高,Cyclin D1、PCNA、Bcl2、MMP2和MMP9蛋白水平降低,Bax蛋白水平增高(P0.05)。添加HUVEC外泌体和外泌体来源的in-miR-214可部分削弱H_(2)O_(2)对HUVEC细胞的损伤,且后者的效果要明显优于前者(P0.05)。结论HUVEC来源外泌体通过低表达miR-214保护HUVEC免受H_(2)O_(2)诱导的细胞损伤。

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