Rspo1调控斑马鱼胚胎汇聚延伸运动的研究

作     者：张欣 张祺 潘军 周建峰 白艳 荣小至 ZHANG Xin;ZHANG Qi;PAN Jun;ZHOU Jian-Feng;BAI Yan;RONG Xiao-Zhi

作者机构：中国海洋大学医药学院海洋药物教育部重点实验室青岛266003 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室青岛266237 

出 版 物：《水生生物学报》 (Acta Hydrobiologica Sinica)

年 卷 期：2023年第47卷第2期

页      面：298-307页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071008[理学-发育生物学] 

基　　金：国家重点研发计划(2018YFA0801000) 山东省自然科学基金面上项目(ZR2021MC075)资助。 

主　　题：Rspo1 汇聚延伸运动 Wnt/PCP信号通路 斑马鱼 

摘      要：Rspo1 (R-spondin 1)是分泌型Rspos (R-spondins)蛋白家族的成员,在雌性发育、血管生成和癌症等多个方面具有调控作用。为了研究Rspo1在早期胚胎发育中的功能,以斑马鱼(Danio rerio)作为模式生物,利用反转录PCR及原位杂交技术检测rspo1基因的时空表达模式;通过显微注射rspo1 mRNA或rspo1反义寡核苷酸(Morpholino, MO)对rspo1进行过表达或敲降;通过形态观察及原位杂交技术检测胚胎汇聚延伸(Convergence and extension, CE)运动是否正常;利用荧光素酶活性检测实验测定Wnt/PCP信号通路活性水平;通过蛋白印迹法检测表征Wnt/PCP信号通路活性的磷酸化JNK (Jun N-terminal kinase)蛋白的水平。结果显示:rspo1为母源基因,在12hpf前胚胎中呈全身性表达, rspo1的过表达或敲降均影响胚胎的CE运动;过表达rspo1降低Wnt/PCP信号通路报告质粒的活性,而敲降rspo1则增加其活性,与之相一致, rspo1敲降的胚胎中磷酸化JNK的水平显著升高;此外, rspo1 mRNA与dnJNK (Dominant negative JNK) mRNA的共同注射,以及rspo1MOs与wnt11或wnt5b mRNA的共同注射均能协同诱导CE运动缺陷。综上,在斑马鱼胚胎中, Rspo1通过负调控Wnt/PCP信号通路来调控胚胎的汇聚延伸运动。