异补骨脂素对体外培养骨髓间充质干细胞增殖与成骨性分化的研究

作     者：明磊国 葛宝丰 陈克明 马慧萍 翟远坤 MING Leiguo;GE Baofeng;CHEN Keming;MA Huiping;ZHAI Yuankun

作者机构：兰州军区兰州总医院骨研所甘肃兰州730050 兰州军区兰州总医院药材科甘肃兰州730050 

出 版 物：《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2011年第36卷第15期

页      面：2124-2128页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：甘肃省科技重大专项计划项目(092nkDA025) 

主　　题：骨髓基质干细胞 分化 增殖 异补骨脂素 bFGF IGF-1 Osterix Runx-2 

摘      要：目的:研究异补骨脂素对体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs)增殖与成骨性分化的影响。方法:取大鼠股骨及胫骨全骨髓,利用全骨髓贴壁培养法培养单核层细胞,培养于含10%FBS的DMEM-F12培养液中,3 d后首次换液,9 d后成骨性诱导培养并用药物干预。异补骨脂素在培养基中终浓度分别为1×10-4,1×10-5,1×10-6,1×10-7 mol.L-1。增殖分析采用MTT法,于成骨性诱导培养第4,8,12,16天测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、钙盐沉积量、骨钙素分泌量,第15天进行ALP和钙化结节组织化学染色及计数。成骨性诱导后不同时间点提取总RNA,Real-time RT-PCR法检测bFGF,IGF-1,Osterix与Runx-2等成骨性相关的基因表达情况。结果:异补骨脂素剂量依赖性抑制BMSCs增殖,但能促进其成骨性分化,表现为提高BMSCs的ALP活性、促进骨钙素分泌、钙盐沉积量、增加钙化结节数量、提高bFGF,IGF-1,Osterix,Runx-2 mRNA表达水平。结论:终浓度为1×10-5 mol.L-1异补骨脂素能显著促进BMSCs的成骨性分化,证明异补骨脂素是中药补骨脂中抗骨质疏松的有效成分。