燕窝唾液酸糖蛋白间接竞争酶联免疫检测方法的建立

作     者：何金麟 王仍瑞 张世伟 冯荣虎 范群艳 柳训才 徐敦明 HE Jin-Lin;WANG Reng-Rui;ZHANG Shi-Wei;FENG Rong-Hu;FAN Qun-Yan;LIU Xun-Cai;XU Dun-Ming

作者机构：厦门海关技术中心厦门361026 深圳市计量质量检测研究院深圳518102 厦门市燕之屋丝浓食品有限公司厦门361100 

出 版 物：《食品安全质量检测学报》 (Journal of Food Safety and Quality)

年 卷 期：2022年第13卷第23期

页      面：7630-7636页

学科分类：0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 08[工学] 083202[工学-粮食、油脂及植物蛋白工程] 

基　　金：海关总署科研项目(2021HK198) 

主　　题：燕窝 唾液酸糖蛋白 间接竞争酶联免疫分析法 

摘      要：目的建立间接竞争酶联免疫(indirect competitive enzyme linked immunesorbent assay,IC-ELISA)检测燕窝中唾液酸糖蛋白的分析方法。方法以唾液酸糖蛋白为抗原,制备单克隆抗体,对IC-ELISA步骤中相关参数进行优化,确定最佳反应条件。结果最佳包被抗原为1:2000,抗体稀释倍数为1:5000;封闭液浓度为1%牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA),封闭时间为150 min;竞争时间30 min;酶标二抗浓度稀释倍数为1:1000,孵育时间30 min;显色时间为10 min。建立的IC-ELISA检测方法半抑制浓度(50%inhibition concentration,IC_(50))为8.61μg/mL,线性范围为2.23~33.25μg/mL,回收率为82.7%~92.0%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSDs)为1.7%~8.9%。结论该方法灵敏度较高、特异性强,可以有效地鉴别假冒伪劣燕窝产品,具有较好的实际应用价值。