微小RNA-486靶向TRIM10抑制帕金森病细胞模型损伤

作     者：廖建云 江新柳 谢为法 LIAO Jian-yun;JIANG Xin-liu;XIE Wei-fa

作者机构：景德镇市第二人民医院神经内科江西景德镇333000 

出 版 物：《解剖学报》 (Acta Anatomica Sinica)

年 卷 期：2022年第53卷第4期

页      面：424-431页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071006[理学-神经生物学] 

基　　金：江西省卫生计生委科研课题项目(20187185) 

主　　题：微小RNA-486 TRIM10 帕金森病 免疫印迹法 PC12细胞 

摘      要：目的探讨微小RNA(miR)-486对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP^(+))诱导的体外帕金森病(PD)PC12细胞模型凋亡的影响和机制。方法实验分成对照(control)组、PD组(MPP^(+)诱导PC12细胞)、miR-NC组[MPP^(+)诱导PC12细胞转染模拟(mimics)对照(mimics control)]、miR-486组(MPP^(+)诱导PC12细胞转染miR-486 mimics)、miR-486+载体(vector)组(共转染miR-486 mimics和pcDNA3.1)、miR-486+TRIM10组(共转染miR-486 mimics和pcDNA3.1-TRIM10),每组n=9。CCK-8法分析细胞增殖变化,流式细胞术分析细胞凋亡水平变化,Western blotting分析Bax和Bcl-2蛋白表达变化,硫代巴比妥酸法检测细胞中丙二醛(MDA)含量,荧光探针法检测细胞中活性氧簇(ROS)水平,二硝基苯肼分析培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)水平。用生物信息学软件预测miR-486的靶基因,双荧光素酶报告基因实验检测miR-486、TRIM10靶向关系。结果与control组比较,PD组细胞存活率、Bcl-2蛋白表达降低,细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA、ROS和LDH水平升高。与miR-NC组比,miR-486组细胞存活率、Bcl-2蛋白表达升高,细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA、ROS和LDH水平降低。MiR-486靶向下调TRIM10表达。与miR-486+vector组比较,miR-486+TRIM10组细胞存活率、Bcl-2蛋白水平降低,细胞凋亡率、Bax蛋白水平、MDA、ROS和LDH水平升高。结论上调miR-486可通过靶向抑制TRIM10减少MPP^(+)诱导的体外帕金森病PC12细胞模型的凋亡。