蒿属外来药用资源中亚苦蒿的特异性PCR鉴别

作     者：刘志浩 陈梓媛 李晓琳 蒋超 金艳 赵玉洋 袁媛 LIU Zhihao;CHEN Ziyuan;LI Xiaolin;JIANG Chao;JIN Yan;ZHAO Yuyang;YUAN Yuan

作者机构：安徽中医药大学药学院合肥230012 中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地北京100700 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2022年第28卷第17期

页      面：127-132页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 100504[医学-方剂学] 1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100501[医学-中医基础理论] 100601[医学-中西医结合基础] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：中国中医科学院科技创新工程重大攻关项目(C12021A041) 国家科技部科技基础资源调查专项(2018FY100800) 国家重点研发计划项目(2020YFE0205100) 中央本级重大增减支项目(2060302) 青年岐黄学者支持项目 

主　　题：蒿属 中亚苦蒿 聚合酶链式反应 外来药用资源 

摘      要：目的:基于特异性聚合酶链式反应(PCR)建立了一种中亚苦蒿药材的鉴别方法,可以准确、便捷地鉴别中亚苦蒿及其近缘种。方法:利用Chloroplast Genome Information Resource(CGIR)数据库查找中亚苦蒿及其近源种叶绿体基因组序列,并筛选获得中亚苦蒿特异性单核苷酸多态性(SNP)位点,根据SNP位点设计一对中亚苦蒿特异性鉴别引物zykh1-F和zykh1-R。采集中亚苦蒿及其常见近缘种的原植物样本,建立中亚苦蒿特异性PCR鉴别方法并优化反应体系,对该方法进行耐受性和适用性考察。利用该方法对从新疆药材市场购买中亚苦蒿药材样本进行鉴别。结果:中亚苦蒿特异性PCR鉴别方法采用鉴别引物zykh1-F和zykh1-R,退火温度为54℃、循环次数为33次。经PCR扩增和凝胶电泳后中亚苦蒿在210 bp处可观察到单一明亮条带,其余近缘种如艾、黄花蒿、白叶蒿、野艾蒿均无条带。结论:该研究所建立的中亚苦蒿特异性PCR鉴别方法可准确鉴别中亚苦蒿及其常见近缘种,具有高度特异性,且该方法节约时间和成本,为中亚苦蒿资源引种和利用提供一种方便快捷的物种鉴别方法。