γ-环糊精葡萄糖基转移酶的酶学性质及其产物特异性

作     者：陶志杰 杨静文 王清晨 吴元元 胡雪芹 张洪斌 TAO Zhijie;YANG Jingwen;WANG Qingchen;WU Yuanyuan;HU Xueqin;ZHANG Hongbin

作者机构：蚌埠学院食品与生物工程学院安徽蚌埠233030 合肥工业大学食品与生物工程学院安徽合肥230009 

出 版 物：《食品与发酵工业》 (Food and Fermentation Industries)

年 卷 期：2022年第48卷第13期

页      面：25-32页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81573399) 安徽省自然科学基金项目(1908085QC130) 2020年高校优秀青年骨干人才国内访问研修项目(gxgnfx2020109) 2021年国家级大学生创新创业训练项目(202111305050) 

主　　题：γ-环糊精葡萄糖基转移酶 γ-环糊精 酶学性质 产物特异性 

摘      要：通过克隆Bacillus clarkii 7364来源编码γ-环糊精葡萄糖基转移酶(γ-cyclodextrins glucanotransferase,γ-CGTase)的基因,构建并表达基因重组菌株*** BL21/pET28a(+)-γ-CGTase,对γ-CGTase酶学性质和产物特异性进行了研究。结果表明,所克隆表达的γ-CGTase分子质量为78 kDa,水解活力与环化活力在最适温度、最适pH、金属离子影响等方面均存在一定差异。以可溶性淀粉为底物,经HPLC测定催化产物中几乎无α-环糊精(α-cyclodextrin,α-CD),γ-CD/β-CD可达7.70,γ-CD转化率为15.83%,添加体积分数为10%的乙醇浓度γ-CD产量可提高89.91%,γ-CD/β-CD提高73.77%,转化率为33.44%。催化豌豆淀粉γ-CD/β-CD达12.92,转化率为19.1%,分别比可溶性淀粉提高了63.13%和22.90%。该研究为进一步提高γ-CGTase酶法制备γ-CD产量和专一性应用提供了重要的理论依据。