塞来昔布对离体人膝骨关节炎细胞凋亡及EGFR/MAPK信号通路的影响

作     者：高维松 陈荣 吴国志 王隆辉 吴昌新 Wei-song Gao;Rong Chen;Guo-zhi Wu;Long-hui Wang;Chang-xin Wu

作者机构：海南医学院第二附属医院骨科海南海口570311 

出 版 物：《中国现代医学杂志》 (China Journal of Modern Medicine)

年 卷 期：2022年第32卷第14期

页      面：48-52页

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：海南省自然科学基金(No:819MS126)。 

主　　题：膝骨关节炎 塞来昔布 软骨细胞 增殖 凋亡 表皮生长因子受体/丝裂原激活蛋白激酶通路 

摘      要：目的探究塞来昔布对离体人膝骨关节炎细胞凋亡及表皮生长因子受体/丝裂原激活蛋白激酶(EGFR/MAPK)通路的影响。方法体外分离及培养膝关节软骨细胞,并以甲苯胺蓝染色鉴定软骨细胞。将细胞分为空白对照组(人正常膝骨关节软骨细胞不做特殊处理)、模型组(人膝骨关节炎软骨细胞不做特殊处理)及塞来昔布低、高剂量组(人膝骨关节炎软骨细胞中分别加入含终浓度为50μmol/L和200μmol/L塞来昔布溶液的培养液)。采用CCK-8法、AnnexinV/PITC双染法分别检测各组细胞增殖、凋亡能力,Western blotting检测细胞增殖、凋亡及EGFR/MAPK通路蛋白的表达。结果甲苯胺蓝染色结果显示,人正常膝骨关节软骨细胞、人膝骨关节炎软骨细胞内见蓝紫色异染颗粒,细胞核呈深蓝色,细胞质呈浅蓝色;与人膝骨关节炎软骨细胞形态比较,人正常膝骨关节软骨细胞体积较大,形态较规则,蓝紫色异染颗粒较多。与空白对照组比较,模型组,塞来昔布低、高剂量组细胞存活率降低(P0.05),凋亡率升高(P0.05);与模型组比较,塞来昔布低、高剂量组细胞存活率升高(P0.05),凋亡率降低(P0.05);与塞来昔布低剂量组比较,塞来昔布高剂量组细胞存活率升高(P0.05),凋亡率降低(P0.05)。与空白对照组比较,模型组,塞来昔布低、高剂量组EGFR、MMP-9、Caspase-3蛋白相对表达量升高(P0.05),p-P38 MAPK/P38 MAPK蛋白相对表达量降低(P0.05);与模型组相比,塞来昔布低、高剂量组EGFR、MMP-9、Caspase-3蛋白相对表达量降低(P0.05),p-P38 MAPK/P38 MAPK蛋白相对表达量升高(P0.05);与塞来昔布低剂量组比较,塞来昔布高剂量组EGFR、MMP-9、Caspase-3蛋白相对表达量降低(P0.05),p-P38 MAPK/P38 MAPK蛋白相对表达量升高(P0.05)。结论塞来昔布能促进离体人膝骨关节炎细胞增殖,抑制细胞凋亡。其作用可能是通过抑制EGFR表达,促进P38 MAPK通路活化实现的。