杏仁核BDNF-AS在大鼠神经病理性痛形成中的作用

作     者：李耿章 符文红 陈可敏 秦洁 王玉霞 胡啸玲 杨冯睿 Li Gengzhang;Fu Wenhong;Chen Kemin;Qin Jie;Wang Yuxia;Hu Xiaoling;Yang Fengrui

作者机构：邵阳学院附属第一医院麻醉科邵阳422001 南华大学附属第一医院麻醉科衡阳421001 

出 版 物：《中华麻醉学杂志》 (Chinese Journal of Anesthesiology)

年 卷 期：2022年第42卷第3期

页      面：328-332页

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 100217[医学-麻醉学] 

基　　金：湖南省教育厅优青(19B477) 湖南省卫健委课题(20200018,20200037) 湖南省自然科学基金(2021JJ70043)。 

主　　题：神经痛 脑源性神经营养因子 RNA,长链非编码 

摘      要：目的评价脑源性神经营养因子反义长链非编码RNA(BDNF-AS)在大鼠神经病理性痛(NP)形成中的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠,2月龄,体重200~260 g,采用左侧L5-6脊神经结扎法制备NP模型。实验Ⅰ取大鼠56只,采用随机数字表法分为3组:假手术组(Sham组,n=8)、NP组(n=24)和BDNF组(n=24)。BDNF组于模型制备后1、3、6、13和20 d时双侧杏仁核注射外源性BDNF,每侧100 pmol。NP组和BDNF组于模型制备后7、14和21 d时随机取8只大鼠、Sham组于假手术模型制备后处死,取脑组织,分离杏仁核,ELISA法检测杏仁核BDNF含量,免疫组化法检测杏仁核BDNF阳性细胞数,实时定量PCR法检测杏仁核BDNF-AS的表达。实验Ⅱ取大鼠32只,采用随机数字表法分为4组(n=8):假手术组(Sham组)、NP组、BDNF组和siRNA组。于模型制备后1、3、6、13和20 d时,BDNF组和siRNA组双侧杏仁核分别注射外源性BDNF每侧100 pmol或siRNA-BDNF-AS 50 nmol。于模型制备前(T_(0))、制备后4 d(T_(1))、7 d(T_(2))、14 d(T_(3))、21 d(T_(4))时测定机械缩足反应阈(MWT)与热缩足潜伏期(TWL)。最后1次行为学测试完成后,处死大鼠,取脊髓组织,ELISA法检测脊髓IL-1β、IL-6和TNF-α含量。结果实验Ⅰ与Sham组比较,NP组模型制备后各时点杏仁核BDNF含量和BDNF阳性细胞数降低,BDNF-AS表达上调(P0.05);与NP组比较,BDNF组模型制备后各时点杏仁核BDNF含量和BDNF阳性细胞数升高,BDNF-AS表达下调(P0.05)。实验Ⅱ与Sham组比较,NP组、BDNF组和siRNA组T_(1~4)时MWT降低,TWL缩短,脊髓IL-1β、IL-6和TNF-α含量升高(P0.05);与NP组比较,BDNF组和siRNA组T_(1~4)时MWT升高,TWL延长,脊髓IL-1β、IL-6和TNF-α含量降低(P0.05)。结论大鼠NP发生机制可能与杏仁核BDNF-AS表达上调,抑制BDNF合成,促进脊髓炎症反应有关。