RNA干扰CXCR7基因对人肝癌MHCC97H细胞生物学特性的影响

作     者：林灵 韩梅梅 王芳 申华莉 余红秀 杨芃原 

作者机构：生物医学研究院复旦大学上海医学院上海200032 复旦大学化学系上海200433 复旦大学生命科学研究院上海200433 

出 版 物：《化学世界》 (Chemical World)

年 卷 期：2013年第54卷第10期

页      面：597-600,633页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：上海市卫生局基金资助(2009002) 

主　　题：肝细胞肝癌 CXCR7 增殖能力 细胞凋亡 细胞迁移 

摘      要：通过构建针对CXCR7的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰表达质粒,转染人肝癌细胞系MHCC97H,嘌呤霉素筛选建立低表达CXCR7基因的稳转株,分别采用qRT-PCR和Western Blot检测shRNA靶向沉默效果。通过CCK-8增殖实验与流式细胞术研究CXCR7抑制对细胞增殖及凋亡的影响;通过划痕愈合实验研究CXCR7抑制对MHCC97H细胞迁移能力的影响。结果表明:成功构建了慢病毒表达载体pLKO.1-CXCR7shRNA,显著下调MHCC97H细胞中CXCR7mRNA及蛋白的表达。增殖实验显示,与阴性对照组相比,干扰表达组细胞生长速度受到明显抑制(p0.001);干扰CXCR7表达可诱导细胞凋亡,尤以早期凋亡率上调为著;划痕实验显示抑制CXCR7表达延长细胞的伤痕愈合时间。