Asia Ⅰ口蹄疫vp2蛋白单克隆抗体的制备及单抗竞争ELISA方法的建立

作     者：向敏 张克山 卢顺 蔡利军 罗勇 张建民 何华 王勤刚 吴斌 Min Xiang;Keshan Zhang;Shun Lu;Lijun Cai;Yong Luo;Jianmin Zhang;Hua He;Qingang Wang;Bin Wu

作者机构：华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2008年第24卷第9期

页      面：1664-1669页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 090601[农学-基础兽医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家科技支撑计划项目(No.2006BAD06A18)资助~~ 

主　　题：口蹄疫 单抗竞争ELISA 单克隆抗体 vp2蛋白 

摘      要：制备AsiaI口蹄疫病毒vp2单克隆抗体(mAb)并建立了单抗竞争ELISA方法。用纯化的AsiaI型口蹄疫病毒vp2重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合,采用间接ELISA和有限稀释法筛选杂交瘤细胞。分别用ELISA、Western blotting检测mAb腹水的效价及其特异性。筛选到杂交瘤细胞2株,腹水效价均在100×29以上;以纯化后的AsiaI型口蹄疫病毒vp2重组蛋白作为抗原,利用AsiaI型口蹄疫病毒vp2单抗酶标物建立了竞争ELISA方法用来检测AsiaI型口蹄疫抗体。临床应用表明,该方法与UBI公司的口蹄疫全病毒抗体检测试剂盒总符合率达89.0%,和荷兰赛迪公司的口蹄疫病毒LPB-ELISA抗体检测试剂盒总符合率达86.5%。