DegraPol支架上培养人气管软骨细胞体外合成组织工程软骨

作     者：杨林 纪玲 王正 Walter Weder YANG Lin;JI Ling;WANG Zheng;Walter Weder

作者机构：暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院胸外科518020 暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院检验医学部518020 Division of Thoracic SurgeryLaboratory of Tissue EngineeringUniversity Hospital of ZurichSwitzerland 

出 版 物：《中国医药生物技术》 (Chinese Medicinal Biotechnology)

年 卷 期：2007年第2卷第1期

页      面：18-22页

学科分类：08[工学] 080502[工学-材料学] 0805[工学-材料科学与工程（可授工学、理学学位）] 

基　　金：国家自然科学基金(30500499) 

主　　题：组织工程 器官培养技术 软骨细胞 气管 

摘      要：目的探讨以人气管软骨细胞(HTC)为种子细胞在新型生物材料DegraPol泡沫支架上体外合成组织工程气管软骨的可行性。方法从肺移植供体(9例)取人气管软骨片段,胶原酶消化,将所获软骨细胞传代培养,将传代至6～8代的HTC种植到DegraPol支架上体外静态培养。种植前行II型胶原免疫组织化学染色。于体外静态培养第2小时末和第3、7、21、42天取HTC-DegraPol复合物用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖活性;培养3周后取HTC-DegraPol复合物制备组织学检测标本行阿辛蓝染色观察硫酸软骨素分泌情况,并制备扫描电镜标本观察HTC在DegraPol支架中培养后的超微结构。结果HTC在传代培养中显示稳定的增殖活性并分泌II型胶原。种植到DegraPol支架中后培养2h和3、7、21、42d时MTT法测定的A值分别为0.112±0.004、0.151±0.021、0.170±0.035、0.176±0.023和0.213±0.023(每个时点n=4)。培养21、42d与培养2h比较,活性HTC数量差异均有统计学意义(P0.05)。阿辛蓝染色显示HTC-DegraPol复合物的基质分泌硫酸软骨素,证实HTC-DegraPol复合物具有软骨样结构。扫描电镜观察显示新生软骨在DegraPol材料表面和中央均有形成,但以表面为主。结论HTC可以在体外良好扩增并以多孔生物材料DegraPol为支架体外合成组织工程气管软骨,但培养条件应进一步优化。