rpoS对鳗弧菌MHK3株Hcp表达和杀菌能力的影响

作     者：王小鹿 李杰 李贵阳 唐磊 杨慧超 莫照兰 WANG Xiaolu;LI Jie;LI Guiyang;TANG Lei;YANG Huichao;MO Zhaolan

作者机构：中国海洋大学海洋生命学院山东青岛266003 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业农村部海水养殖病害防治重点实验室青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室山东青岛266071 中国海洋大学三亚海洋研究院海南三亚572000 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海201306 

出 版 物：《渔业科学进展》 (Progress in Fishery Sciences)

年 卷 期：2021年第42卷第6期

页      面：125-134页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 07[理学] 071005[理学-微生物学] 10[医学] 

基　　金：国家重点研发计划(2019YFD0900103) 中国水产科学研究院基本科研业务费(2020XT0406) 海南重要水产养殖动物全基因组育种技术研发(SKJC-KJ-2019KY01)共同资助 

主　　题：鳗弧菌 rpoS Hcp T6SS 杀菌 

摘      要：溶血素共调节蛋白(Hcp)的合成和分泌是六型分泌系统(T6SS)行使功能的重要特征。RNA聚合酶的σ亚基RpoS参与调节细菌的生长和应激反应。为了探究RpoS对鳗弧菌(Vibrio anguillarum)T6SS的调控作用,本研究构建了 MHK3ΔrpoS突变株,检测了部分表型特征的变化;利用lacZ半乳糖苷酶报告基因检测了突变株hcpl和hcp2在转录水平的变化;进行Western blot并定量分析突变株Hcp在翻译水平的变化;并通过细菌拮抗实验检测了突变株杀菌能力的变化。结果显示,MHK3ΔrpoS突变株的生长情况、泳动性、明胶酶活性及酪蛋白酶活性与MHK3野生株相比无显著差异(P0.05),而平台早期的菌膜形成能力有显著上升(P0.05);在各生长时期,MHK3ΔrpoS的hcpl和hcp2在转录水平的表达量均较MHK3有显著上升(P0.01),最高时分别为MHK3的1.79倍和1.94倍;在翻译水平上,MHK3ΔrpoS在胞内和胞外Hcp的分泌均有显著升高(P0.05),最高时分别为MHK3的1.59倍和1.31倍;同时,MHK3ΔrpoS对大肠杆菌(Escherichia coli) E5的杀菌能力约为MHK3的1%。研究表明,rpoS对鳗弧菌MHK3株的生长情况、泳动性、明胶酶活性及酪蛋白酶活性均无显著调控作用,但对平台早期的菌膜形成能力具有一定的负调控作用,在转录和翻译水平上也负调控Hcp的表达。而在杀菌能力上,rpoS发挥一定的正调控作用。说明菌株的杀菌能力强弱并非直接与Hcp的表达和分泌量正相关。本研究为进一步阐明T6SS的调控机制及其介导的杀菌作用机制提供了新思路,并丰富了其理论基础。