转染hSOD1-G93A对NSC-34细胞内铁代谢相关蛋白表达的影响
Effect of transfection of hSOD1-G93A on expressions of iron-related proteins in NSC-34 cells作者机构:泰山医学院泰安271016 临沂市人民医院中心实验室276003 临沂市人民医院急诊科276003 临沂市人民医院神经内科276003 山东省立医院睡眠医学中心济南250021
出 版 物:《中华神经医学杂志》 (Chinese Journal of Neuromedicine)
年 卷 期:2015年第14卷第9期
页 面:905-909页
学科分类:1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学]
基 金:山东省自然科学基金(ZR2010HM041) 山东省博士后创新项目专项资金(201102004)
主 题:肌萎缩侧索硬化 NSC-34细胞 转铁蛋白受体 二价金属离子转运体1
摘 要:目的探讨转染hSODl.G93A对NSC-34细胞内铁代谢相关蛋白表达的影响。方法常规体外培养未转染、转染pcDNA3.1(-)、hSODl-pcDNA3.1(-)和hSODl-G93A—pcDNA3.1(-)质粒的NSC-34细胞系;分为正常组、空转组、野生组和突变组。利用免疫组化染色法观察各组细胞的形态变化;通过检测丙二醛(MDA)含量观察各组细胞氧化应激水平;用逆转录聚合酶链式反应rRT.PCR)和Westernblotting分别检测各组细胞内铁代谢相关蛋白的基因和蛋白表达水平。结果突变组的细胞胞体变圆,突起减少、变短,细胞内MDA含量明显高于其他3组细胞,差异有统计学意义(P〈0.05);各组细胞内的转铁蛋白受体(TfR)、二价金属离子转运体1(DMTI)、铁蛋白等基因在基因水平上表达差异无统计学意3L(P〈0.05);各组细胞内的TfR、DMTl、铁蛋白等在蛋白水平上表达差异无统计学意义(胗O.05),但是突变组细胞铁蛋白表达较正常组细胞明显升高,差异有统计学意义(P,0.051。结论转染hSOD1-G93A对NSC-34细胞(突变组)内TfR、DMTl表达无明显影响.但可以使细胞内铁蛋白在蛋白表达水平明显升高。