豆豉纤溶酶基因的克隆及其在枯草杆菌中的表达

作     者：齐海萍 冮洁 胡文忠 姜爱丽 田密霞 QI Hai-ping;GANG jie;HU Wen-zhong;JIANG Ai-li;TIAN Mi-xia

作者机构：大连民族学院生命科学学院生物技术与资源利用国家民委一教育部重点实验室辽宁大连116600 

出 版 物：《大豆科学》 (Soybean Science)

年 卷 期：2012年第31卷第1期

页      面：159-161页

核心收录：

学科分类：0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 08[工学] 083202[工学-粮食、油脂及植物蛋白工程] 

基　　金：辽宁省教育厅资助项目(2008135) 

主　　题：豆豉纤溶酶 基因克隆 高效表达 枯草芽孢杆菌 

摘      要：以实验室筛选的UD8豆豉芽孢杆菌的总DNA为模板,应用PCR技术根据豆豉纤溶酶基因DNA序列(GeneBank AY720895.2)设计并合成1对引物,扩增出了豆豉纤溶酶基因,将该基因克隆到大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒EC-BS8上,构建成表达质粒EC-BS8,再将其转化到枯草芽孢杆菌Bs6中。筛选表达菌株,实现了豆豉纤溶酶基因在枯草杆菌中高效表达。获得重组菌纤溶酶活力高达9 830 ***-1,是出发菌株活力的2.9倍。经纯化SDS-PAGE鉴定重组豆豉纤溶酶相对分子质量为31.0 kDa。