致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86 fedA基因的克隆与原核表达

作     者：宁官保 田文霞 刘国刚 李宏全 马海利 高荣琨 

作者机构：山西农业大学动物科技学院山西太谷030801 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2012年第42卷第4期

页      面：390-393页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：山西省科技攻关项目(2007031059) 

主　　题：水肿病 标准菌株F107/86 fedA 克隆 原核表达 

摘      要：以致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86的基因组DNA为模板,对去掉信号肽的456bp的fe-dA基因进行了PCR扩增,将其克隆到原核表达载体pGEX-6P-1的BamHⅠ与EcoRⅠ位点之间,经酶切鉴定与测序,在大肠杆菌中以IPTG诱导表达,并对表达产物用SDS-PAGE和Western-blot分析进行验证。结果表明,筛选出的阳性质粒pGEX-fedA-2(pfedA)经测序并与GenBank中收录的M61713序列进行比较,证明插入序列及读码框正确;表达产物GST-FedA经SDS-PAGE分析大小约42.4ku,Western-blot分析证实其具有良好的反应原性。所构建的原核表达载体可大量表达抗原蛋白,为进一步研究猪水肿病亚单位疫苗奠定了基础。