肺炎支原体P1蛋白羧基端基因片段的克隆及原核表达

作     者：王云龙 刘小聪 李玉林 王国强 孙新城 董彩文 程蕾 王继创 邓黎黎 李恒思 WANG Yun-long;LIU Xiao-cong;LI Yu-lin;WANG Guo-qiang;SUN Xin-cheng;DONG Cai-wen;CHENG Lei;WANG Ji-chuang;DENG Li-li;LI Heng-si

作者机构：新乡医学院河南新乡450003 郑州职业技术学院河南郑州450121 河南省生物工程技术研究中心河南郑州450001 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2012年第33卷第6期

页      面：45-48页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主　　题：肺炎支原体 P1蛋白 套式PCR 原核表达 

摘      要：根据GenBank公布的肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)P1蛋白羧基端序列(AF290001.1),设计合成2对特异性引物,采取套式PCR方法,以肺炎支原体培养物中提取的DNA为模板,扩增肺炎支原体P1蛋白羧基端基因序列,将其克隆至pET32a表达载体,构建重组质粒pET32a/P1(3 802～4 695),转化大肠埃希菌BL21-gold,测序验证后IPTG诱导表达,经SDS-PAGE表明重组蛋白表观分子质量与预期一致,可溶性表达产物经Western blot证实重组蛋白具有免疫反应性。