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作者：韩飘安徽农业大学

学位级别：硕士

我国年产梨果约占世界总产量的70%,是世界上梨最大的生产国,栽培历史悠久。近年来,伴随着梨产业的发展,一些传统的优势栽培区梨园植株或品种陷入了老化。由于气候条件和耕地面积的限制,很多老梨园需要进行换茬更新,由此引发的连作障碍,... 详细信息

我国年产梨果约占世界总产量的70%,是世界上梨最大的生产国,栽培历史悠久。近年来,伴随着梨产业的发展,一些传统的优势栽培区梨园植株或品种陷入了老化。由于气候条件和耕地面积的限制,很多老梨园需要进行换茬更新,由此引发的连作障碍,成为梨树再植更新的重要限制因素。为了揭示梨树重茬生理失调现象的机理,减轻梨树的连作障碍,实现梨产业的可持续发展,本文以安徽省砀山县园艺场‘砀山酥梨’重茬植株和土壤改造植株根际土壤为试材,采用重茬土壤提取物浇灌盆栽梨苗,研究根际土壤的化感作用对梨苗生长的影响;通过土壤酶活性对比,分析根际土壤微环境变化;利用GC-MS分析土壤中的化感物质组成,以杜梨组培苗添加主要外源化学物质进行化感影响验证;采用宏基因组测序技术,分析根际土壤中微生物组成与多样性。试验主要研究结果如下:(1)梨树重茬植株根际土壤提取物,对‘杜梨’幼苗的生长存在显著的抑制作用,随提取物浓度的增加,植株地上部分、地下部分生长受到的抑制作用加强。表明重茬梨树根际土壤中存在特定的化感物质,抑制了梨幼苗的生长,为研究梨化感效应提供了依据。(2)梨树重茬植株根际土壤的脲酶、酸性磷酸酶和蔗糖酶的活性显著高于土壤改造植株;重茬植株和改造植株根际土壤脲酶活性均显著高于其它三种酶的活性。相对于改造后的土壤,虽然重茬植株根际土壤保肥、保水性和供肥能力较强,但由于化感物质的存在,抑制了植株对养分的吸收利用。(3)GC-MS分析结果,重茬植株根际土壤中主要化感成分为烷烃、酯类及酚类等物质,这些物质与梨树连作障碍紧密相关。在相同条件下,将重茬植株根际土壤特有化学物质加入培养基进行杜梨组培苗生物测试,发现外源化学物质十三烷对梨组培苗具有显著的化感抑制作用,并且随着浓度增加抑制作用加强。(4)宏基因测序分析发现,梨树重茬造成根际土壤中微生物的群落结构发生显著改变,土壤细菌种类占比减小,真菌种类占比增加。重茬植株根际土壤中,假单胞菌属Pseudomonas taeanensis含量显著增加。综上所述,重茬植株根际土壤确实具有化感物质存在,其主要化感成分为烷烃类、酯类及酚类等物质;外源化学物质十三烷对梨组培苗生长具有显著抑制作用;重茬植株根际土壤中微生物群落结构发生改变。

关键词：梨连作障碍根际土壤化感物质 GC-MS分析宏基因组测序

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砀山酥梨花粉直感现象研究

砀山酥梨花粉直感现象研究

作者：李兵伟安徽农业大学

学位级别：硕士

绝大多数梨品种都是白花不结实或结实率极低。为此,生产实际中梨授粉品种的配置显得尤为重要。梨是花粉直感现象较为明显的果树,以不同品种的授粉,不仅影响其坐果率,还影响果实的外观和内在品质。目前的研究报道大都以坐果率作为选择授... 详细信息

绝大多数梨品种都是白花不结实或结实率极低。为此,生产实际中梨授粉品种的配置显得尤为重要。梨是花粉直感现象较为明显的果树,以不同品种的授粉,不仅影响其坐果率,还影响果实的外观和内在品质。目前的研究报道大都以坐果率作为选择授粉品种的唯一标准,直观地解决梨自交不亲和的问题。从经济效益来看,坐果率只是重要指标之一,而不是唯一的标准,还应考虑到果形、单果重、果实内在品质等因素。因此,花粉直感现象的研究对提高梨生产经济效益就更为重要。本文以不同品种为砀山酥梨授粉,探讨了授粉品种对砀山酥梨坐果率、外观品质、内在品质等的影响,为栽培砀山酥梨合理配置授粉树提供参考依据,为进一步进行梨花粉直感现象试验研究奠定基础。试验研究主要结果如下:1、授粉后砀山酥梨第3序位的花坐果率最高,达86.18%,与第2、4序位花坐果率差异不显著,与第1、5序位花差异显著,第5序位坐果率最低,为42.83%。以红酥脆、爱甘水、圆黄、幸水、黄冠等品种授粉,砀山酥梨果实坐果率较高,而以紫酥、七月酥授粉,砀山酥梨果实坐果率相对较低。以新世纪品种授粉的砀山酥梨果实脱萼率最高,达28.26%;茌梨授粉砀山酥梨果实脱萼率最低,仅为3.76%,两者表现出明显的萼片发育花粉直感现象。2、不同品种授粉后砀山酥梨果形无明显变化;以茌梨、新世纪和黄冠等授粉,砀山酥梨果实上的果点较少,而以鸭梨、爱甘水和七月酥等授粉,砀山酥梨果实上的果点明显。用鸭梨授粉后砀山酥梨果柄长度较大,茌梨和爱甘水授粉后砀山酥梨果形指数较大,但差异均未达到显著水平,说明果柄长度、果形指数不存在花粉直感现象。以不同品种为砀山酥梨授粉,单果重虽然有显著差异,与授粉品种本身单果重也存在显著相关性,但回归关系未达显著水平。3、不同品种对砀山酥梨授粉,果肉硬度、可溶性固形物含量存在显著差异。以黄冠、爱甘水授粉果肉硬度较大,鸭梨、新世纪授粉的砀山酥梨果肉硬度相对较小;爱甘水和七月酥授粉,砀山酥梨果实可溶性固形物含量较高,茌梨授粉的较低。不同品种对砀山酥梨授粉,果实可溶性糖、有机酸、Vc含量差异均未达到显著水平。不同品种对砀山酥梨授粉,果实石细胞含量存在显著差异。以满天红和红酥脆授粉,砀山酥梨果实石细胞含量较少,爱甘水、茌梨、新世纪、黄冠等授粉后砀山酥梨果实石细胞含量较多。4、爱甘水授粉的砀山酥梨果实种子数最多,平均为9.1粒。

关键词：砀山酥梨授粉品种花粉直感坐果率果实品质

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梨茎尖和叶片高效离体繁殖再生体系建立

梨茎尖和叶片高效离体繁殖再生体系建立

作者：宗娟安徽农业大学

学位级别：硕士

建立稳定、高效的叶片不定梢再生体系是梨转基因成功的关键环节。为此本试验以梨离体芽苞作外植体,在初代培养诱导试管苗成功的基础上,分别以MS、AS和1/2 MS培养基为基本培养基,附加不同的激素组合,根据培养基配方及培养条件,通过正交... 详细信息

建立稳定、高效的叶片不定梢再生体系是梨转基因成功的关键环节。为此本试验以梨离体芽苞作外植体,在初代培养诱导试管苗成功的基础上,分别以MS、AS和1/2 MS培养基为基本培养基,附加不同的激素组合,根据培养基配方及培养条件,通过正交试验设计并结合方差分析和多重比较,研究不同培养基对梨试管苗芽增殖影响;叶片愈伤组织的诱导及愈伤组织的分化和试管苗生根的影响。试验研究获得的主要结果如下:1、外植体消毒及初代培养将外植体用75%酒精处理10 s后再用0.1% HgCl消毒4 min时,取得最佳消毒效果。外植体芽诱导的适宜培养基为1/2 MS + 6-BA 0.5 mg/L + NAA 0.2 mg/L。2、增殖培养鸭梨茎段增殖的适宜培养培养条件是以1/2 MS为基本培养基,附加0.8 mg/L的6-BA;0.3 mg/L的IBA及0.5 mg/L的GA3,增殖倍数为3.83;黄冠梨茎段增殖的适宜培养条件是以AS为基本培养基,附加0.8 mg/L的6-BA;0.1 mg/L的IBA及0.5 mg/L的GA3,增殖倍数为3.56;基本培养基对梨茎段增殖和生长无显著影响;不同浓度的6-BA处理,差异达到了显著水平。3、愈伤组织的诱导与再生试验从两个梨品种叶片上再生出不定芽,建立起黄冠和鸭梨叶片再生不定芽体系。叶片离体培养以1/2 MS培养基为基本培养基,附加不同浓度TDZ和IBA,结果以1/2 MS附加2.5 mg/L的TDZ及0.5 mg/L的IBA适宜鸭梨叶片诱导愈伤及分化的培养基组合;以1/2 MS附加0.5 mg/L的TDZ及0.5 mg/L的IBA为适宜黄冠叶片诱导愈伤组织及分化的培养基组合;在适宜条件下,鸭梨和黄冠叶片再生频率达到65.28%和66.67%,平均再生芽数为4.78和3.17。4、梨苗生根以1/2 MS + 1.0 mg/L IBA的培养基诱导鸭梨和黄冠的生根效果稍好,生根数、根长,统计均显著高于其他处理。

关键词：梨茎尖初代培养增殖培养叶片再生生根培养

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猕猴桃NPR1基因的克隆及功能分析

猕猴桃NPR1基因的克隆及功能分析

作者：李士谣安徽农业大学

学位级别：硕士

猕猴桃是原产自中国,是20世纪驯化最为成功的园艺作物,营养丰富,特别是富含维生素C和膳食纤维。猕猴桃溃疡病是由丁香假单胞猕猴桃致病变种引起的猕猴桃第一大病害,主要危害中华和美味猕猴桃,危害叶片、枝干和主蔓等,造成树体大量死亡... 详细信息

猕猴桃是原产自中国,是20世纪驯化最为成功的园艺作物,营养丰富,特别是富含维生素C和膳食纤维。猕猴桃溃疡病是由丁香假单胞猕猴桃致病变种引起的猕猴桃第一大病害,主要危害中华和美味猕猴桃,危害叶片、枝干和主蔓等,造成树体大量死亡。前期研究发现,SA信号途径中关键基因NPR1基因与猕猴桃品种资源的抗病性表现出协同相关,猕猴桃基因组分析后发现猕猴桃基因组携带有五个Ad NPR1相关的基因信息。进一步以抗病品种‘金魁’和感病品种‘红阳’为材料荧光定量分析后发现,Ad NPR1在‘金魁’中被溃疡病病菌特异性诱导后上调表达,随后我们扩增获得了‘金魁’品种中的Ad NPR1基因序列全长,通过构建该基因的表达载体,利用农杆菌侵染法获得了转Ad NPR1基因的拟南芥转基因株系,并利用病菌接种验证了该基因的抗病性表型,明确Ad NPR1基因在猕猴桃抗溃疡病的作用。本试验所得主要结果如下:(1)对水杨酸合成途径的NPR1相关基因的差异性表达分析结果显示,Achn060941在‘金魁’品种中的表达量高于‘红阳’。(2)过表达AdNPR1基因的拟南芥株系叶片接种Pst DC3000病菌后,NPR1、PR1和WRKY70基因的表达量均高于野生型,且在接种12h时,转基因拟南芥NPR1和WRKY70基因的表达水平最高,PR1基因在为接种时的基因水平表达最高。(3)转AdNPR1基因拟南芥植株在接种丁香假单胞番茄致病变种Pst DC3000时,较野生型抗性强。

关键词：猕猴桃基因功能验证 AdNPR1 抗性

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梨根腐病病原菌鉴定及有效防控药剂筛选

梨根腐病病原菌鉴定及有效防控药剂筛选

作者：林天元安徽农业大学

学位级别：硕士

近年来,在我国黄河故道地区梨树上发生了一种严重的病害,具体表现在叶片黄化、叶缘焦枯、整株落叶、植株枯死等现象,最初被当作缺素症矫治未见效果,致使有的梨园发病植株死亡率高达20%以上,给当地梨产业造成了严重的经济损失。为了明确... 详细信息

近年来,在我国黄河故道地区梨树上发生了一种严重的病害,具体表现在叶片黄化、叶缘焦枯、整株落叶、植株枯死等现象,最初被当作缺素症矫治未见效果,致使有的梨园发病植株死亡率高达20%以上,给当地梨产业造成了严重的经济损失。为了明确黄河故道地区造成梨树根腐病的病原菌种类,研究18种常用化学药剂对该病原菌的抑制效果。通过对梨树的根腐病发病根系样品病原菌的分离以及单孢纯化,根据代表性菌株形态学观察、致病性测定,rDNA-ITS序列分析和致病性试验,进行病原菌的种类鉴定,对菌丝生长和孢子萌发有效抑制的化学药剂进行筛选,并对部分药剂进行田间防效试验。测得不同药剂的抑制效果。试验的主要研究结果:1、田间调查发现,发病初期植株成熟叶片叶缘枯焦,进而叶片枯死脱落,又发出新叶,严重发病植株则出现整株死亡,而未发病植株叶色正常。2、从发病根系样品中分离纯化得到4个菌株,经形态学和rDNA-ITS序列分析,鉴定为同一致病菌,且与已报道的腐皮镰刀菌(Nectria haematococca,无性态Fusarium solani)形态特征相似;rDNA-ITS序列测序、BLASTn比对分析的结果表明,分离得到的4株菌株为同一致病菌,且该致病菌与北京紫花苜蓿根腐病菌株YQCC5(KF939490.1)、美国加利福尼亚葡萄根腐病菌株AM(KR909201)等腐烂病菌株的rDNA-ITS序列的一致性达到100%。3、抑菌试验结果显示,72%霜脲·锰锌、1.8%辛菌胺醋酸盐和80%代森锰锌对腐皮镰刀菌的菌丝生长及孢子萌发均有良好的抑制作用;虽然80%碱式硫酸铜、3%噻霉酮、75%百菌清抑制腐皮镰刀菌菌丝生长效果较差,但对其孢子萌发则具有很强的抑制作用。4、毒力测定与田间试验结果显示,腐皮镰刀菌对4种药剂的敏感性存在差异,95%吡唑醚菌酯和80%代森锰锌对菌丝生长的毒力最强,72%霜脲·锰锌的毒力居中,1.8%辛菌胺醋酸盐的毒力最差;72%霜脲·锰锌、1.8%辛菌胺醋酸盐和80%代森锰锌田间实际防效比95%吡唑醚菌酯好。试验结果表明黄河故道地区梨树根腐病病原菌为腐皮镰刀菌(Nectria haematococca,无性态Fusarium solani)。18种不同的化学药剂对梨根腐病病菌的菌丝生长及分生孢子的萌发抑制效果的差异显著,且不同药剂的室内测定和田间试验也有所差异。

关键词：梨根腐病病原鉴定药剂筛选

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安徽池州市贵池区十里花卉苗木基地建设研究

安徽池州市贵池区十里花卉苗木基地建设研究

作者：罗志刚安徽农业大学

学位级别：硕士

随着我国城市建设和社会经济的不断发展,花卉苗木已成为一项迅速崛起的产业。花卉苗木产业是集经济效益、社会效益、生态效益“三效合一”,劳动密集、资金密集、技术密集“三密合一”的绿色朝阳产业,它在调整农业结构、增加农民收入、... 详细信息

随着我国城市建设和社会经济的不断发展,花卉苗木已成为一项迅速崛起的产业。花卉苗木产业是集经济效益、社会效益、生态效益“三效合一”,劳动密集、资金密集、技术密集“三密合一”的绿色朝阳产业,它在调整农业结构、增加农民收入、改善生态环境,促进物质文明和精神文明建设,以及增加就业并且带动相关产业发展方面具有重要作用。池州市是中国优秀旅游城市、国家园林城市、中国第一个国家级生态经济示范区和省级历史文化名城,也是安徽省“两山一湖”(黄山、九华山、太平湖)旅游区的重要组成部分,全市生态环境良好,旅游资源非常丰富。“十一五”以来,池州市以“加快追赶、奋力崛起、实现跨越”为主题,大力弘扬“艰苦创业、负重拼搏、开明开放、务实创新”的池州精神,全面实施“生态立市、工业强市、旅游兴市、商贸活市”战略,胜利完成了“十一五”规划确定的主要目标和任务,城市建设不断发展、人们生活水平不断提高,经济社会发展取得辉煌成就。池州“十二五”林业发展规划提出要大力发展现代林业,坚持林业基地建设和龙头企业培育两手抓,加速林业产业化进程,实施五大工程,建设六大基地,培育包括花卉苗木在内的六大产业。池州市花卉苗木基地项目建设正是为了改善城市生态环境、提升城市品位,加快建设“名山秀水、名城宜居、民富市强、民和政通”的新池州,促进池州旅游业及城市的可持续发展的需要。本项目根据池州市花卉苗木业发展现状,对“十里花卉苗木基地建设规划”的设计原则、产品设计和市场分析、建设方案和技术评价、投资估算及效益评价等进行研究,为池州市花卉苗木产业发展提供依据。

关键词：花卉苗木基地生态建设池州市

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万山村观光果园规划设计

万山村观光果园规划设计

作者：吴惠青安徽农业大学

学位级别：硕士

观光果园作为我国新兴的一种朝阳产业,它将农业和旅游业有机结合,已取得了较好的经济效益、生态效益和社会效益。观光果园在调整农业结构、增加农民收入、改善生态环境,促进物质文明和精神文明建设,以及增加就业并且带动相关产业发展方... 详细信息

观光果园作为我国新兴的一种朝阳产业,它将农业和旅游业有机结合,已取得了较好的经济效益、生态效益和社会效益。观光果园在调整农业结构、增加农民收入、改善生态环境,促进物质文明和精神文明建设,以及增加就业并且带动相关产业发展方面中具有重要作用。当前在建设美丽中国的进程中,如何发挥观光果园的优势,将其科学合理的应用到美好乡村建设中,将对我国的新农村建设具有重要的意义。本论文在对国内外观光果园相关资料进行研究的基础上,对安徽省马鞍山市当涂县万山村的基础条件和各种资源进行了实地调查及分析,以便在规划设计中更好地综合利用这些要素。在确立了观光果园的总体建设目标之后,围绕目标设计了万山村观光果园建设的具体方案,包括万山村观光果园功能区的划分、平面布局设计、效果图的绘制、旅游产品设计、生态环境保护规划、园区景观系统规划等。此外,对观光果园树种与品种的合理安排、园区景点设置、园林绿化规划等进了详实的设计。另外,课题分析了万山村观光果园的客源市场,策划了万山村观光果园的旅游形象,并就万山村观光果园的项目组织与管理、投资估算及效益评价等进行研究分析,为马鞍山市当涂县及其周边地区果树产业发展和农业观光园建设提供借鉴和依据。

关键词：观光果园规划设计新农村建设当涂县万山村

梨主栽品种果实品质分析与矿质营养平衡施肥研究

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梨主栽品种果实品质分析与矿质营养平衡施肥研究

作者：汤婷婷安徽农业大学

学位级别：硕士

为研究我国梨主栽品种果实品质、矿质元素含量，给梨园平衡施肥方案制定提供依据，试验以取自国家梨产业技术体系19个试验站40个品种的119个梨果实样品、16个试验站34个品种的112个枝条样品、14个试验站78个灌溉水样品，5个主栽品种叶... 详细信息

为研究我国梨主栽品种果实品质、矿质元素含量，给梨园平衡施肥方案制定提供依据，试验以取自国家梨产业技术体系19个试验站40个品种的119个梨果实样品、16个试验站34个品种的112个枝条样品、14个试验站78个灌溉水样品，5个主栽品种叶片、根系、枝干及其所在试验站的土壤为试材，测定了果实中单果重、固形物、可溶性糖、维生素C、石细胞和可滴定酸的含量;分析了梨果、枝条、灌溉水、土壤、叶片、根系、枝干的N、P、K等11种矿质元素的含量;调查部分梨品种树体各部位的生长量和梨树枝条生长量，对梨果实经济性状进行了模糊综合评判与主成分分析，分析了梨果、枝条、灌溉水的矿质元素的分布规律及其相关性，初步提出了5个主栽品种的平衡施肥方案。主要研究结果如下： 1、梨果实品质按照模糊综合评判值的大小划分为八类，第一类评判值大于0.60有12个果实样品，第二类评判值在0.55.60之间有14个样品，第三类评判值在0.50.55之间，有23个样品，第四类评判值在0.45.50之间，有23个样品，第五类评判值在0.40.45之间有18个样品，第六类评判值在0.35.40之间有13个样品，第七类评判值在0.30.35之间有9个样品，第八类评判值小于0.30有7个样品。 2、供试梨果实样品平均单果重为242.17g，固形物含量为12.30%，可溶性糖含量为8.84%，维生素C含量为10.80mg·kg，石细胞含量为0.52%，可滴定酸含量为0.26%。梨果实单果重与固形物、可溶性糖、可滴定酸呈极显著负相关;固形物与可溶性糖、石细胞呈极显著正相关;可溶性糖和可滴定酸呈极显著正相关。梨果经济性状主成分分析结果表明，在反映果实品质的6个性状中，可溶性糖、固形物、可滴定酸为首要性状。 3、梨鲜果中N、P、K、Ca、Mg、S的平均含量分别为902.71mg·kg、135.64mg·kg、1465.50mg·kg、68.58mg·kg、100.75mg·kg和56.91mg·kg。Fe、Mn、Cu、Zn和B的平均含量为9.98mg·kg、1.09mg·kg、1.34mg·kg、0.89mg·kg和3.01mg·kg。单果重与果实中N、Ca、Mg、Mn的含量呈极显著负相关;固形物含量与N、K的含量呈极显著正相关，与Cu的含量呈极显著负相关;梨果中可溶性糖含量与Cu的含量呈极显著负相关;维生素C含量与Zn的含量呈极显著正相关;可滴定酸含量与N、K、Ca、Mn的含量呈极显著正相关。 4、供试枝条样品中N、P、K、Ca、Mg、S的平均含量分别为4223.82mg·kg、687.80mg·kg、3221.12mg·kg、4061.31mg·kg、762.86mg·kg、300.72mg·kg。Fe、Mn、Cu、Zn和B的平均含量为42.47mg·kg、12.71mg·kg、4.2mg·kg、11.97mg·kg和7.69mg·kg。 5、供试78份灌溉水水样平均pH值为7.74，其中，pH值小于6.0的酸性灌溉水占供试样品的1.28%，pH值在6.0.5之间的弱酸性灌溉水占供试样品的1.28%，pH值在6.5.5之间的中性灌溉水占供试样品的21.79%，pH值在7.5.0之间的弱碱性灌溉水占供试样品的38.46%，pH值大于8.0以上的碱性灌溉水占供试样品的37.18%;灌溉水中pH值与Cu呈极显著负相关，NO与Ca;K+与Ca、Mg、SO;Ca与Mg、SO;Mg与SO都呈极显著正相关。 6、根据本试验建立的“高产优质”平衡施肥方案，国家梨产业技术体系昌黎试验站黄冠梨园N、Mn、Cu、B元素每667m应分别补充12.56kg、2.34kg、5.46kg、0.05kg;河北昌黎试验站鸭梨梨园N、Fe、Mn、B元素每667m应分别补充7.25kg、1.16kg、2.57kg、0.04kg;徐州试验站丰水梨园Mn、Cu元素每667m应分别补充0.79kg、5.81kg;泰安试验站砀山酥梨梨园Mg、Fe、Mn、Cu、Zn、B元素每667m应分别补充57.87kg、2.27kg、2.35kg、3.91kg、0.65kg、0.14kg;烟台试验站巴梨梨园每667m应分别补充K、Ca、Mg、B元素7.61kg、370.84kg、28.22kg、0.15kg。

关键词：梨主栽品种高产优质矿质元素平衡施肥

塑料大棚栽培对砀山酥梨植株生长及果实发育的影响

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塑料大棚栽培对砀山酥梨植株生长及果实发育的影响

作者：高正辉安徽农业大学

学位级别：硕士

砀山酥梨原产安徽砀山,栽培历史悠久,是目前我国梨的重要晚熟主栽品种,约占中国梨栽培总面积的1/4。近年来,由于管理粗放、生产投入减少、气候变化等原因,导致砀山酥梨的品质有所下降,为此,已有很多关于砀山酥梨土肥水、树体改造、果园... 详细信息

砀山酥梨原产安徽砀山,栽培历史悠久,是目前我国梨的重要晚熟主栽品种,约占中国梨栽培总面积的1/4。近年来,由于管理粗放、生产投入减少、气候变化等原因,导致砀山酥梨的品质有所下降,为此,已有很多关于砀山酥梨土肥水、树体改造、果园覆盖、生草等方面优质丰产栽培技术的研究,但鲜有关于砀山酥梨大棚栽培方面的研究,在生产中能得到成熟应用的技术更少。本研究以砀山酥梨为试材,采用大棚覆盖措施与综合栽培管理技术结合的方法,研究了砀山酥梨大棚栽培环境下温湿度、光照强度、物候期、生长特性及其对果实品质的影响,为砀山酥梨栽培新模式提供理论和实践依据。获得了如下主要结论：1、在大棚栽培环境下的砀山酥梨,生长期内日平均气温比露地要高0.56-C,2月底至3月底,棚内外气温差值相对较大;棚内的平均湿度的变化保持相对稳定,大多时间维持在59%-69%之间,比棚外平均湿度降低3.08%。2、大棚内外树体受光照强度与日照光强由弱—强—弱的变化一致,但棚内的光照强度明显低于棚外的,主要是自9：00时之后,随着太阳光照增强,棚内光照强度折损率变大,棚内光照强度折光损失率总体在35%～45%之间。3、大棚栽培比棚外提早了物候期,大棚内的芽萌动期、初花期、盛花期、落花期分别比棚外的提早了5d、3d、4d、4 d;果实成熟期提前2 d。4、大棚栽培条件下的砀山酥梨,叶片中叶绿素含量在各个生育期均降低,棚外栽培含量高于棚内;新梢生长量棚外比棚内明显增长;单叶厚度、比叶重棚内栽培明显降低。5、大棚栽培的砀山酥梨果实生长发育经历呈现由慢—快—慢的生长过程。幼果期的果实纵、横径、重量缓慢上升与棚外生长动态基本无差异;果实进入膨大期,果实纵横径、重量增长速率明显加快,果实纵径的增长速率高于横径;进入成熟期,果实横、纵径增长速率减缓;至采收时,棚内外果型基本相似,平均单果重相当,果实的横径略大于纵径。6、成熟期果实,棚内栽培的砀山酥梨果面黄绿亮,果点变小且密度变稀,比棚外栽培减少2.4个/cm2;平均单果重和产量分别都达到300 g和2500 kg/667m2以上,都能满足优质果生产和市场需要。通过大棚栽培试验,棚内与棚外果肉石细胞相比较,果肉石细胞大小为0.25-0.50 mm的含量,增加0.053g/100 g;果肉石细胞0.5～0.75 mm的含量,降低0.002g/100 g;果肉中大于0.75mm石细胞,增多0.012g/100 g;果肉石细胞总干重差异不显著。

关键词：砀山酥梨塑料大棚栽培营养生长果实品质

‘砀山酥梨’及其褐皮芽变果皮结构观察和差异表达基因分析

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‘砀山酥梨’及其褐皮芽变果皮结构观察和差异表达基因分析

作者：李雪安徽农业大学

学位级别：硕士

‘砀山酥梨’(Pyrus bretschneideri cv. Dangshansuli)原产于黄河故道地区安徽砀山县，栽培历史超过250年。2005年，发现‘砀山酥梨’营养系变异‘锈酥’，全果着褐色，风味独特，是优良、稳定的变异品系。然而在梨果皮色泽研究中，对... 详细信息

‘砀山酥梨’(Pyrus bretschneideri cv. Dangshansuli)原产于黄河故道地区安徽砀山县，栽培历史超过250年。2005年，发现‘砀山酥梨’营养系变异‘锈酥’，全果着褐色，风味独特，是优良、稳定的变异品系。然而在梨果皮色泽研究中，对于绿皮梨和红皮梨的研究较多，对褐色果皮的成因研究较少。本试验通过果皮结构观察，研究了‘锈酥’果皮切片与表皮扫描结构特征;以不同时期的果皮为材料，采用差异显示反转录聚合酶链式反应(mRNA Differential Display PCR，DDRT-PCR)技术，研究‘砀山酥梨’及其褐皮芽变品系‘锈酥’果皮中基因的差异表达。旨在探讨梨果实褐皮形成机理，为梨果皮颜色的进一步改良奠定基础。本试验获得主要结果如下： 1.‘砀山酥梨’果实表面呈黄绿色，果皮稍光滑;‘锈酥’果实表面呈褐色，表皮较粗糙。扫描电镜下，‘砀山酥梨’果实表皮细胞排列较疏松，表面角质层出现大量裂纹，宽度10000μm;‘锈酥’果皮细胞排列紧密，表面裂纹较小，宽度1000μm。透射电镜下，‘砀山酥梨’果实表皮细胞细胞间隙大，细胞次生壁较薄，细胞内容物没有明显降解;‘锈梨’的果皮细胞排列致密，细胞间隙小，细胞次生壁厚，有些细胞内容物完全消失。 2.通过正交设计优化的梨果皮RNA差别显示DDRT-PCR体系为：94℃预变性2min，94℃变性30s，40℃退火2min，72℃延伸40s，35个循环，72℃延伸7min，4℃保存。PCR反应体积为25ul，其中dNTP浓度0.1mmol L，锚定引物和随机引物浓度0.5μmol L， Mg浓度3mmol L， Taq酶用量0.5U。 3.利用优化的DDRT-PCR技术，在‘砀山酥梨’与‘锈梨’果皮中筛选出了63条差异条带，其中60条质量较高，其余3条质量较低。根据基因功能差异表达(Gene Ontology, GO)，运用Blast软件比对60个EST序列进行组装、拼接、分析，得到11个Contigs(ESTs numbers≥2)序列，22个Singlets(ESTs numbers=1)，新颖性为55%。 4.以花后75d、100d、125d、150d和175d果皮中的RNA反转录成的cDNA为模板，用荧光定量PCR技术研究α-微管蛋白基因与钙调素基因。从果实幼果期至成熟期，α-微管蛋白基因与钙调素基因在‘锈酥’果皮中的表达量，显著高于‘砀山酥梨’果皮中的表达量。

关键词：砀山酥梨锈酥果皮结构 DDRT-PCR 差异基因荧光定量PCR