检索结果-南通市图书馆

作者：李聪聪吉林大学

学位级别：硕士

研究目的:本研究就羟基积雪草苷(Madecassoside)对人牙龈成纤维细胞(Human gingival fibroblasts,HGFs)的生物活性作用进行讨论,探究其对HGFs的增殖特性,并进一步采用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)建立炎症模型,探究羟基积雪草苷对LP... 详细信息

研究目的:本研究就羟基积雪草苷(Madecassoside)对人牙龈成纤维细胞(Human gingival fibroblasts,HGFs)的生物活性作用进行讨论,探究其对HGFs的增殖特性,并进一步采用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)建立炎症模型,探究羟基积雪草苷对LPS诱导的HGFs凋亡、迁移及炎症因子的表达的影响,为牙周炎的治疗提供给新的药物选择。研究方法:1.收集临床下颌第三磨牙由于阻生需行拔除术与牙龈修整术的健康牙周患者的牙龈组织,通过酶消化组织块法获得原代HGFs,传代至P3-P5用于实验操作,通过镜下形态观察与免疫荧光法进行细胞鉴定。2.采用CCK-8法检测不同浓度羟基积雪草苷对HGFs细胞活力的影响。3.利用LPS建立HGFs炎症模型,采用CCK-8法、细胞划痕法及Transwell法检测不同浓度羟基积雪草苷对LPS诱导的HGFs的凋亡、细胞迁移的影响。4.利用LPS建立HGFs炎症模型,采用酶联免疫吸附试验检测羟基积雪草苷对LPS刺激的HGFs炎症因子的表达。5.利用SPSS Statistics 23统计分析软件进行数据分析,并通过Graph Pad Prism9.5进行作图。实验数据均为计量资料,结果以均数±标准差(x±s)表示。实验数据通过正态性检验及方差齐性检验后,多组间比较采用单因素方差分析(One-way analysis of variance,ANONA),进一步两两比较采用最小显著差异法(Least significant difference,LSD)法。检验水准α=0.05,以P0.05)。3.10μg/mL浓度的LPS在24h时对HGFs增殖无明显抑制(P>0.05),在48h即出现细胞活力抑制现象(P0.05),150μM与200μM之间无显著性差别(P>0.05),而100μM与150μM之间存在统计学意义(P0.05)。研究结论:羟基积雪草苷(0-200μM)不影响HGFs的细胞活性并在一定浓度下促进HGFs的增殖。羟基积雪草苷可缓解LPS对HGFs增殖和迁移的抑制作用,同时抑制LPS诱导的HGFs分泌的炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8的释放。

来源：

同方学位论文库评论

芦丁对牙龈成纤维细胞增殖、迁移及炎症因子表达的影响

引用

作者：刘秋萍吉林大学

学位级别：硕士

牙周炎是由菌斑生物膜引起的感染性牙周疾病。我国牙周炎的发病率高达70%-90%。牙周致病菌之一牙龈卟啉单胞菌(***)细胞壁脂多糖(LPS)直接与人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)相互作用,诱导HGFs中多种炎症相关因子的表... 详细信息

牙周炎是由菌斑生物膜引起的感染性牙周疾病。我国牙周炎的发病率高达70%-90%。牙周致病菌之一牙龈卟啉单胞菌(***)细胞壁脂多糖(LPS)直接与人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)相互作用,诱导HGFs中多种炎症相关因子的表达,促使牙周炎的发生和发展。牙周炎目前常用的治疗方法包括牙周机械治疗结合局部抗菌消炎药物和牙周手术。药物治疗可以更好的控制病原微生物感染,减缓牙周炎的进展。近年来我国中医疗法在治疗牙周炎方面的研究越来越多,因为中药成分具有成本低、易获取、毒副作用小和可长期服用等优势而广泛用于牙周炎的治疗研究。类黄酮作为膳食中最丰富的多酚类物质,已被证明可对不同炎症性疾病产生影响。芦丁(Rutin)属于生物类黄酮中的黄酮醇类,临床上主要应用于脆性增加的毛细血管出血症,也作为辅助药物治疗高血压和脑出血等。除此之外,它还具有许多生物活性,包括抗炎、抗氧化、器官保护和改善慢性炎症等。但芦丁是否影响牙周组织细胞的生物活性以及抗炎作用,目前相关研究尚少。所以在本实验中,我们设计不同浓度(0.1、1、10、100μmol/L)的芦丁溶液与HGFs共培养,检测芦丁对牙龈成纤维细胞的增殖能力和迁移能力的改变,以及在体外建立的炎症模型中,观测芦丁是否具有抗炎作用。CCK-8结果显示高浓度(100μmol/L)的芦丁在培养细胞7天后开始降低HGFs的细胞活力,说明高浓度的芦丁对HGFs有毒性作用。划痕实验和Transwell实验表明0.1μmol/L、1μmol/L和10μmol/L芦丁能够促进HGFs的迁移。在Transwell实验中细胞迁移数量随着芦丁溶液浓度的升高而增多;划痕实验中随着时间的推移,10μmol/L芦丁处理组划痕愈合率显著高于空白对照组(p<0.05),最终选择10μmol/L的药物浓度用于后续实验。为了模拟牙周炎的炎症环境,本实验采用10μg/ml的LPS建立体外炎症模型。在LPS诱导的炎症模型中,RT-q PCR和ELISA结果显示LPS刺激组中各炎症因子的表达明显增多(p<0.05),而10μmol/L芦丁预处理组能明显降低LPS诱导产生的炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α在基因和蛋白层面的表达,结果具有统计学差异(p<0.05),有效发挥抗炎作用。本实验的结果表明,0.1μmol/L、1μmol/L和10μmol/L芦丁能够促进HGFs的增殖和迁移能力,并且10μmol/L芦丁可通过降低LPS诱导的牙龈成纤维细胞中炎症因子IL-6、TNF-α、IL-8和IL-1β的表达发挥抗炎作用,推测芦丁有可能在牙周炎的进展中发挥抑制作用。

来源：

同方学位论文库评论

局部应用15-epi-LXA4在大鼠根尖周炎NF-k Bp65信号通路中的作用研究

局部应用15-epi-LXA4在大鼠根尖周炎NF-k Bp65信号通路中的作用研...

引用

作者：高华丽吉林大学

学位级别：硕士

研究目的:利用开髓、髓腔暴露的的方法,建立大鼠牙髓在暴露状态下形成的下颌第一磨牙牙髓-根尖周炎症模型,对比分别应用PBS及15-epi-LXA4暂封窝洞后牙髓及根尖周组织的炎症进展情况,分析局部应用15-epi-LXA4对大鼠下颌第一磨牙牙髓及根... 详细信息

研究目的:利用开髓、髓腔暴露的的方法,建立大鼠牙髓在暴露状态下形成的下颌第一磨牙牙髓-根尖周炎症模型,对比分别应用PBS及15-epi-LXA4暂封窝洞后牙髓及根尖周组织的炎症进展情况,分析局部应用15-epi-LXA4对大鼠下颌第一磨牙牙髓及根尖周组织开髓暴露后的炎症进展的影响,从而推论15-epi-LXA4应用于牙髓-根尖周病变的可能性,为口腔临床医生牙髓-根尖周病治疗中的药物选择提供新的思路。研究方法:1.采用小号球钻分别于20只雄性Wistar大鼠的左、右侧下颌第1磨牙牙合面近中窝处行开髓术,开髓髓腔暴露7d后,随机分为A、B、C、D四组,心内灌流固定处死A组大鼠,确定建立了大鼠牙髓-根尖周病模型。2.于建模手术后7d、根尖炎开始形成时,B、C、D三组大鼠分别于右侧实验组封入浓度为l00ng/ml的15-epi-LXA4富饱和棉球并1周换药1次,设为实验组;左侧对照组封入PBS棉球设为对照组。于术后14d、21d、28d依次心内灌流固定处死B、C、D三组大鼠,分别分离左、右侧下颌骨,取牙-颌骨联合标本,置于4%的甲醛溶液中固定48h。标本组织经EDTA室温脱钙后,常规脱水-浸蜡-包埋后制取连续石蜡切片,经苏木精-伊红染色、免疫组化染色染色后,观察和分析大鼠对照组与实验组的根尖周组织的病理学表现以及NF-κBp65蛋白的阳性表达变化情况。研究结果:1、成功构建炎症反应明显的下颌第一磨牙牙髓炎、根尖周炎模型,并且在此基础上成功发展出了下颌第一磨牙牙髓-根尖周炎症局部用药后的不同时期的炎症反应阶段,符合临床实际。2、建模术后7天,HE染色可见冠髓及根管口部分根髓坏死,可见炎细胞聚集于坏死区下方与存活根髓的交界处,且有大量坏死裂解的细胞与之共存,根髓可见轻度炎症反应,血管扩张,根尖区少数炎细胞散在浸润;14天时,实验组炎症反应严重较对照组轻:对照组可见坏死区达根尖孔附近,大量炎性细胞浸润,伴有根尖周牙槽骨的吸收,实验组可见根髓坏死达根尖孔附近,炎性细胞浸润集中于根管口周围,炎症浸润范围明显小于对照组;21天时,对照组可见根尖区炎症加重,出现坏死灶,牙槽骨吸收明显,实验组可见炎症局限于根管口附近,较对照组炎症反应程度轻,组织破坏少,但较实验组14天时仍有加重;28天时,炎症程度不再加重,根尖周组织的破坏没有继续加重,但实验组程度较对照组炎症程度轻。免疫组织化学染色可见,7天时有少量NF-κBp65阳性染色细胞,14天时,表达增加,NF-κBp65阳性细胞数量达最高,21天时稍有下降,28天表达量达最低,实验组在各时间点的表达量均低于对照组。在15-epi-LXA4的局部应用下,实验组牙髓及根尖周组织炎症进展、炎症细胞浸润程度低于对照组;NF-κBp65阳性表达低于同期对照组。研究结论:1.开髓后暴露于口腔环境建立的大鼠根尖周炎模型能够很好地反应出从牙髓炎到根尖周炎的发生、发展的过程,是一种能够很好模拟临床常见致病途径所致根尖周炎的建模方法。2.根尖周炎过程中15-epi-LXA4的局部应用与牙髓及根尖周组织炎症进展、炎症细胞浸润程度及NF-κBp65的表达情况呈负相关,提示15-epi-LXA4的局部应用可能对根尖周区域炎症反应有抑制作用。

来源：

同方学位论文库评论

多肽改性的邻苯二酚壳聚糖制备及生物学性能研究

引用

作者：张鲁鲁吉林大学

学位级别：硕士

由感染、外伤等引起的牙髓病、根尖周病是口腔科比较常见的疾病,对于牙髓病或根尖周病最常规的治疗方法就是根管治疗。虽然根管治疗可以保留患病的牙齿,延长其保留时间,但经根管治疗后的牙齿变得很脆,较正常牙齿更容易折断或劈裂,甚至... 详细信息

由感染、外伤等引起的牙髓病、根尖周病是口腔科比较常见的疾病,对于牙髓病或根尖周病最常规的治疗方法就是根管治疗。虽然根管治疗可以保留患病的牙齿,延长其保留时间,但经根管治疗后的牙齿变得很脆,较正常牙齿更容易折断或劈裂,甚至过早缺失。近些年来,随着细胞生物学、分子生物学的发展,牙髓病、根尖周病的治疗慢慢地向生物学治疗方向发展。因此我们设想是否可以制备一种材料,作为牙髓干细胞的载体,促进牙髓组织的再生,重建牙髓系统,使牙髓病、根尖周病的治疗真正转变为生物学治疗,为牙髓组织的修复提供新的治疗途径。本实验中,课题组将具有较强组织粘附性能以及生物相容性的邻苯二酚基团通过化学方法接枝到壳聚糖分子中,并在其中复合能够促进细胞之间增殖、粘附的多肽(RADA16-RGD),利用天然交联剂京尼平进行交联,制备出多肽改性的邻苯二酚壳聚糖,促进牙髓干细胞在其表面粘附、增殖,为牙髓再生提供一种新的支架材料。我们通过红外光谱对水凝胶的合成过程进行跟踪,应用扫描电镜图像对材料的结构进行分析,应用机械强度、流变、含水率等数据对材料的理化性能进行评价.结果:我们发现邻苯二酚基团成功接枝到了壳聚糖分子中,其电镜下表现出均匀的疏松多孔结构,并且在其他理化性质方面均优于壳聚糖;加入多肽后形成的多肽改性的邻苯二酚壳聚糖其官能团结构以及理化性质与邻苯二酚壳聚糖相似,不会因多肽的加入发生明显理化性质改变。检测多肽改性的邻苯二酚壳聚糖的生物学性能,我们进行了分子生物学研究。首先通过酶联免疫消化法提取了牙髓细胞,并对其进行了成骨和成脂鉴定;MTT法检测材料的细胞毒性;将细胞与支架材料共培养,通过扫描电镜和HE染色观察细胞在材料表面的生长、粘附情况,并对材料表面的细胞进行计数,评价多肽改性的邻苯二酚壳聚糖是否能够促进细胞在其表面增殖。实验中,我们成功提取了牙髓细胞,并通过成脂成骨诱导证明所提取的牙髓细胞有多向分化能力;通过MTT实验证明材料无细胞毒性;通过扫描电镜和HE染色结果证明多肽改性的邻苯二酚壳聚糖在细胞粘附、增殖方面都优于壳聚糖和邻苯二酚壳聚糖。综上所述,实验制备的多肽改性的邻苯二酚壳聚糖是一种具有良好应用前景的支架材料。

来源：

同方学位论文库评论

不同比例PLLA/PDLLA/5%HA复合物预成乳牙根管桩体外降解性能的研究

引用

作者：徐高祥吉林大学

学位级别：硕士

实验一不同比例PLLA/PDLLA/5%HA复合物体外降解性能的研究目的:评估不同比例左旋聚乳酸(Poly L Lactic Acid,PLLA)/外消旋聚乳酸(Poly Dl Lactic Acid,PDLLA)/5%羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HA)复合物的体外降解性能,寻找与乳牙根生理性... 详细信息

实验一不同比例PLLA/PDLLA/5%HA复合物体外降解性能的研究目的:评估不同比例左旋聚乳酸(Poly L Lactic Acid,PLLA)/外消旋聚乳酸(Poly Dl Lactic Acid,PDLLA)/5%羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HA)复合物的体外降解性能,寻找与乳牙根生理性吸收同步的理想根管桩材料。方法:参照我国医疗器械生物学评价标准,将PLLA/PDLLA/HA按质量分数比分为80/15/5,75/20/5,70/25/5三组,和单纯PLLA(对照组)浸泡到蒸馏水和磷酸盐缓冲液(PBS液)中,在2、4、6、8、10个月对试件进行体外实验,评价四组材料的体外降解性能。结果:大体观察:各组复合材料在10个月的时间均完全变白,并出现少量微裂纹和剥脱现象;扫描电子显微镜(SEM)结果显示:随着降解时间的延长,四组材料基质均出现孔隙并逐渐变大,三组PLLA/PDLLA/5%HA中HA颗粒逐渐变小,从基质表面脱落。第10个月时,75%PLLA/20%PDLLA/5%HA和70%PLLA/25%PDLLA/5%HA基本观察不到成型的PLA结构,呈现无序状的絮状物;重均分子量及生物降解率:初始状态下,各组材料重均分子量差别不大,10个月时单纯PLLA降解率达到了70.5%,80%PLLA/15%PDLLA/5%HA为79.6%,75%PLLA/20%PDLLA/5%HA和70%PLLA/25%PDLLA/5%HA达到了90%左右;力学性能:随着降解时间的延长,各组PLLA/PDLLA/5%HA与单纯PLLA的弯曲强度和弹性模量均有所衰减,且复合物的衰减速度大于单纯PLLA。第10个月时,70%PLLA/25%PDLLA/5%HA已经失去强度;PH值:降解过程中,单纯PLLA的pH值始终低于PLLA/PDLLA/5%HA复合物。结论:含有5%HA的复合材料初期降解速度较纯PLLA更慢,有利于维持材料初期性能;80%PLLA/15%PDLLA/5%HA复合材料在观察的10个月时间内,其降解速度适中,弯曲强度和弹性模量也能满足乳牙咬合力的要求。实验二不同比例PLLA/PDLLA/5%HA复合物浸提液对破骨细胞生物学效应的研究目的:观察不同比例PLLA/PDLLA/5%HA复合物浸提液对破骨细胞生物学性能的影响。方法:本实验通过RANKL诱导RAW264.7细胞分化为破骨细胞,TRAP染色鉴定成熟破骨细胞;MTT法观察不同比例PLLA/PDLLA/5%HA复合物浸提液在1、3、5天时对破骨细胞增殖的抑制作用;扫描电镜观察PLLA/PDLLA/5%HA薄膜上骨吸收陷窝的形成情况。结果:RANKL诱导细胞5天后做TRAP染色,出现含有3个以上染成蓝色细胞核且具有融合状,呈玫瑰红色/红酒样的破骨细胞。各组聚乳酸根管桩浸提液细胞毒性等级均为0级。SEM:破骨细胞在PLA/HA薄膜上未形成吸收陷窝,未改变薄膜的表面形态。结论:聚乳酸羟基磷灰石复合物具有良好的生物安全性,且聚乳酸复合物的降解不受破骨细胞的影响。

来源：

同方学位论文库评论

RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖作为牙周GTR膜的生物学性能研究

引用

作者：杨婕吉林大学

学位级别：硕士

研究背景:牙周炎是局部刺激因素和细菌病原体沉积在牙周组织而引发的局部免疫炎症反应,导致牙槽骨不可逆性丧失,从而使牙齿逐渐松动、脱落。目前的基础治疗、药物治疗等方法仅能控制炎症,而无法将炎性吸收的牙槽骨恢复到原有的高度,手... 详细信息

研究背景:牙周炎是局部刺激因素和细菌病原体沉积在牙周组织而引发的局部免疫炎症反应,导致牙槽骨不可逆性丧失,从而使牙齿逐渐松动、脱落。目前的基础治疗、药物治疗等方法仅能控制炎症,而无法将炎性吸收的牙槽骨恢复到原有的高度,手术方法可以部分恢复牙周附着,但是效果并不理想。引导组织再生术(guided tissue regeneration,GTR)利用生物膜将上皮细胞与骨组织隔开,引导成骨细胞在独立的空间内增殖分化。现有的成品可降解生物膜存在力学性能、降解性能不稳定的缺点,学者们为寻求一种性能理想的生物膜材料作了许多努力,目前尚无一种材料兼具良好的生物相容性、抑菌性能和理化性能。本课题组合成了一种RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖,利用京尼平交联成水凝胶,作为牙周GTR膜,探讨其临床应用价值。研究目的:本课题组前期已成功制备出RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖,其力学性能及黏附性能已得到验证。本研究旨在检测其作为牙周GTR生物膜的生物相容性、降解性能及抑制牙周致病菌的能力,为临床应用提供理论依据。研究方法:1、酰胺法制备邻苯二酚壳聚糖,配备0.5%、1%(m/v)壳聚糖、邻苯二酚水溶液,高温灭菌后,超净台内制备RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖,利用京尼平交联成胶,获得无菌的0.5%、1%浓度壳聚糖、邻苯二酚壳聚糖和RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖水凝胶。2、检测0.5%、1%浓度壳聚糖、邻苯二酚壳聚糖和RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖水凝胶20天内的降解率。3、制备0.5%、1.0%浓度壳聚糖、邻苯二酚壳聚糖和RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖水凝胶浸提液,培养L929细胞,在第24、72、120 h进行CCK-8检测。4、制备0.5%、1.0%浓度壳聚糖、邻苯二酚壳聚糖和RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖水凝胶,进行具核梭杆菌的MTT、抑菌环实验。研究结果:1、经红外光谱分析,成功合成邻苯二酚壳聚糖和RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖,利用京尼平交联,获得壳聚糖、邻苯二酚壳聚糖及RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖水凝胶。2、电镜下可见改性后的水凝胶孔隙大小更加均匀,邻苯二酚壳聚糖和RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖水凝胶的降解率均优于壳聚糖水凝胶。3、CCK-8结果分析显示,与空白对照组相比,在0.5%、1%的壳聚糖、邻苯二酚壳聚糖和RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖水凝胶浸提液中,24、72、120 h L929细胞生存率均表现出显著的优越性。1%邻苯二酚壳聚糖水凝胶组在24、72、120 h细胞生存率均高于1%壳聚糖水凝胶组,1%浓度的RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖水凝胶组在第5天的细胞生存率比1%邻苯二酚壳聚糖水凝胶明显增加。4、利用0.5%、1.0%浓度壳聚糖、邻苯二酚壳聚糖和RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖水凝胶和具核梭杆菌培养生物膜,在72 h后进行MTT检测,RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖水凝胶和邻苯二酚壳聚糖水凝胶中的活菌数表现出明显的减少趋势,1%浓度比0.5%浓度的壳聚糖、邻苯二酚壳聚糖和RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖水凝胶组比中的活菌数减少更明显。抑菌环实验中,改性的水凝胶周围形成了更明显、范围更广的抑菌环,1%浓度比0.5%壳聚糖、邻苯二酚壳聚糖和RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖水凝胶形成的抑菌环直径更大。研究结论:本研究证实了RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖水凝胶相比壳聚糖、邻苯二酚壳聚糖具有更优越的理化性能、生物相容性及对牙周致病菌抑制作用,因此RADA16-RGD改性的邻苯二酚壳聚糖可以作为牙周引导再生的GTR膜,进行下一步应用研究。

来源：

同方学位论文库评论

新型抗菌肽C16-IG-13-1对变异链球菌抑制作用的研究

引用

作者：袁文锦吉林大学

学位级别：硕士

目的:龋病作为口腔中最常见的慢性感染性疾病,具有发病率高、分布广泛的特点。变异链球菌(Streptococcus mutans,***)作为最主要的龋病致病菌,其致病性不仅包括产酸性和耐酸性,更为重要的是变异链球菌能够通过合成胞外多糖(Extracellula... 详细信息

目的:龋病作为口腔中最常见的慢性感染性疾病,具有发病率高、分布广泛的特点。变异链球菌(Streptococcus mutans,***)作为最主要的龋病致病菌,其致病性不仅包括产酸性和耐酸性,更为重要的是变异链球菌能够通过合成胞外多糖(Extracellular polysaccharide,EPS)促进菌斑生物膜的形成。菌斑生物膜作为龋病的始动因子能够促进微生物相互作用、维持微环境的酸性理化特征。因此,使用抗生素抑制变异链球菌的活性并减少菌斑生物膜的形成是龋病防治的主要策略之一,但过度使用抗生素会导致细菌耐药性增强进而导致这一防治手段在长期治疗中效果不理想。抗菌肽(Antibacterial peptides,AMPs)作为天然抗菌剂主要通过破坏细胞膜发挥抗菌作用,这种特殊的抗菌机制使细菌不易产生耐药性。由于在耐药性方面弥补了抗生素的短板,并且具备良好的抑菌效果,使用AMPs进行龋病防治为临床治疗提供了新思路。特异性靶向抗菌肽(Specifically targeted antimicrobial peptides,STAMPs)不仅不易导致细菌产生耐药性,而且具有良好的靶向性,能够在不影响口腔正常菌群的情况发挥对致病菌的抑制作用。本文旨在设计并合成一种新型的针对变异链球菌的特异性靶向抗菌肽,为临床龋病的防治提供新方案。方法:1.通过查阅文献进行特异性靶向抗菌肽的设计,以CSPC16作为靶向定位区域,以抗菌肽IG-13-1作为抗菌区域,设计出新型特异性靶向抗菌肽C16-IG-13-1,利用PSIPRED蛋白质结构预测服务器对C16-IG-13-1的二级结构进行预测,并使用标准固相合成技术(Fmoc保护法)合成C16-IG-13-1。2.以C16-IG-13-1作为实验组,IG-13-1作为阳性对照组,CSPC16作为阴性对照组,采用微量肉汤稀释法检测上述三组多肽对***、血链球菌(Streptococcus sanguinis,***)以及黏性放线菌(Actinomyces viscosus,***)的最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(Minimum bactericidal concentration,MBC)。3.通过平板菌落计数法计算C16-IG-13-1在1 min时对***、***以及***的抗菌率。4.分别在加入C16-IG-13-1后的1 min、5 min、10 min、20 min、30 min、60min通过平板菌落计数法记录***、***以及***的菌落数,并绘制时间-杀菌曲线。5.通过扫描电子显微镜(Scanning electron microscope,SEM)观察空白对照组以及实验组(C16-IG-13-1组)中***的细胞形态变化。6.通过结晶紫染色法测定C16-IG-13-1对***生物膜形成的抑制作用,并通过MTT染色法观察在成熟***生物膜中C16-IG-13-1对***的抑制作用。结果:1.经PSIPRED蛋白质结构预测服务器预测C16-IG-13-1的二级结构主要为α-螺旋结构,并通过标准固相合成技术(Fmoc保护法)成功合成了C16-IG-13-1、IG-13-1及CSPC16。2.成功测定出C16-IG-13-1、IG-13-1和CSPC16对***,***和***的MIC和MBC。其中C16-IG-13-1对***,***和***的MIC分别为5μM、10μM和20μM,MBC分别为10μM、20μM和40μM。3.在1 min时,C16-IG-13-1对***的抗菌率为98.28%,对***的抗菌率为38.16%,对***的抗菌率为8.62%,差异具有统计学意义(P<0.001)。4.通过时间-杀菌曲线可观察到浓度为10μM的C16-IG-13-1作用10 min时***全部死亡,***和***在60 min时仍有大量细菌存活。***能够观察到空白对照组中***细胞完整,表面光滑,未见到细胞碎片或细胞裂解,而C16-IG-13-1组可观察到***细胞表面粗糙,细胞膜破裂,可见大量的细胞碎片。6.结晶紫染色结果显示C16-IG-13-1可明显减少***生物膜的形成,同时MTT实验结果证明C16-IG-13-1对成熟***生物膜有破坏作用。结论

来源：

同方学位论文库评论

载rhVEGF165邻苯二酚壳聚糖促乳牙牙髓干细胞血管形成的研究

引用

作者：杨雪吉林大学

学位级别：硕士

由感染、外伤等引起的年轻恒牙的牙髓病、根尖周病是口腔内科常见的疾病之一,对于年轻恒牙的牙髓病或根尖周病传统的治疗方法是根尖诱导成形术。虽然根尖诱导成形术可以促使牙根继续发育,但是丧失血运循环后的牙齿会变得很脆,较正常牙... 详细信息

由感染、外伤等引起的年轻恒牙的牙髓病、根尖周病是口腔内科常见的疾病之一,对于年轻恒牙的牙髓病或根尖周病传统的治疗方法是根尖诱导成形术。虽然根尖诱导成形术可以促使牙根继续发育,但是丧失血运循环后的牙齿会变得很脆,较正常牙齿更容易折断或劈裂,甚至过早缺失。近些年来,随着细胞及分子生物学的发展,牙髓组织再生成为一种不仅能使受损的牙髓组织再生而且有望恢复其生理功能的生物学治疗方法。然而牙髓组织再生成功的关键是快速有效诱导血管的形成,为组织再生提供营养基础。支架材料作为组织工程的关要因素之一,是近几年研究的热点,壳聚糖在生物医学领域应用较为广泛,虽然具有良好的生物学性能,但是结构的不稳定使其在生物医学领域的应用受到一定的限制,邻苯二酚类化合物具有良好的粘附性能。因此我们设想是否可以将壳聚糖与邻苯二酚类化合物结合制备一种新的支架材料,搭载能促进血管形成的血管内皮生长因子,作为牙髓干细胞的载体,促进血管的再生,提高牙髓再生的成功率,为牙髓组织的修复提供新的治疗途径。本课题组已成功将邻苯二酚基团通过化学方法接枝到壳聚糖分子中,利用天然交联剂京尼平进行交联,制备出生物学性能良好并具有三维网状结构的邻苯二酚壳聚糖支架材料,本实验欲将邻苯二酚壳聚糖作为乳牙牙髓干细胞的载体,观察其促进乳牙牙髓干细胞在表面粘附、增殖情况,将rhVEGF165与邻苯二酚壳聚糖复合后观察其促进乳牙牙髓干细胞向血管内皮细胞方向分化的能力,为年轻恒牙牙髓再生提供一种新的支架材料。本实验通过酶联合消化法及倒置贴壁法提取乳牙牙髓干细胞,并通过细胞形态、碱性磷酸酶和茜素红染色对其进行鉴定;扫描电镜观察冻干后的壳聚糖及邻苯二酚壳聚糖的孔径结构,消毒后并用含10%FBS及1%双抗的高糖培养液预处理材料,监测培养液的pH;通过MTT法检测壳聚糖及邻苯二酚壳聚糖的生物相容性;分别将乳牙牙髓干细胞与壳聚糖及邻苯二酚壳聚糖共培养,通过扫描电镜和HE染色观察细胞在材料表面的增殖以及粘附情况,各组随机选取10个400倍视野,计算平均细胞密度,评价邻苯二酚壳聚糖是否更有利于细胞在其表面增殖及在孔径内的延伸;通过ReaL-Time PCR检测血管内皮细胞表面标记物CD31、VEGFR2、VE-cadherin的表达来检测载rhVEGF165的邻苯二酚壳聚糖支架材料对乳牙牙髓干细胞血管形成能力的影响。实验结果表明:我们成功提取了乳牙牙髓干细胞,所提取的干细胞具有典型的成纤维细胞样形态,通过碱性磷酸酶及茜素红染色证明所提取的干细胞具有较好的成骨分化能力;通过扫描电镜观察壳聚糖及邻苯二酚壳聚糖均为三维多孔状结构,但邻苯二酚壳聚糖孔径之间连接更加紧密,孔径大小更加均匀。经过材料的预处理发现处理邻苯二酚壳聚糖的培养液更快的接近中性,说明其生物相容性有所改善;MTT实验结果表明相较于壳聚糖,邻苯二酚壳聚糖具有良好的生物相容性;扫描电镜和HE染色结果发现邻苯二酚壳聚糖更有利于干细胞在其表面的粘附以及在孔径内的延伸;ReaL-Time PCR的结果显示邻苯二酚壳聚糖与rhVEGF165复合后更有利于乳牙牙髓干细胞向血管内皮细胞方向分化。综上所述,实验制备的邻苯二酚壳聚糖具有良好的生物相容性,与rhVEGF165复合后可以作为牙髓再生良好的支架材料。

来源：

同方学位论文库评论

聚乳酸复合物预成乳牙根管桩的生物相容性研究

引用

作者：盖立婷吉林大学

学位级别：硕士

目前,对于乳牙龋坏及外伤所致的残根残冠的治疗,通常采用常规的根管治疗。然而,对于这些仅剩余的少量牙体组织,没有足够的抗力形和固位形,难以恢复其外形。鉴于恒牙残冠残根采用根管桩恢复牙冠形态,试想是否存在一种乳牙的根管内固定装... 详细信息

目前,对于乳牙龋坏及外伤所致的残根残冠的治疗,通常采用常规的根管治疗。然而,对于这些仅剩余的少量牙体组织,没有足够的抗力形和固位形,难以恢复其外形。鉴于恒牙残冠残根采用根管桩恢复牙冠形态,试想是否存在一种乳牙的根管内固定装置,既能修复牙冠的正常形态,又不影响乳恒牙的正常替换,同时还具有一定的生物力学性能及良好的生物相容性。因此,本课题组将可降解生物材料聚乳酸与不同质量分数的羟基磷灰石复合,采用溶液共混法和热压成型法制备出聚乳酸/羟基磷灰石复合材料,并通过力学性能测试,筛选出HA质量分数为5%的聚乳酸/羟基磷灰石复合物具有最优的力学性能,有望成为理想的乳牙根管桩材料。本研究参照《中华人民共和国医疗器械生物学评价标准》,通过细胞黏附实验、溶血实验、全身急性毒性实验、热源实验及肌肉内植入实验等体内外实验,对已制备的聚乳酸/羟基磷灰石(PLLA/HA)复合物进行生物相容性研究,旨在进一步探讨该材料作为乳牙根管桩的可行性,为临床应用提供理论依据。倒置荧光显微镜观察发现:小鼠成纤维细胞L929在复合材料薄膜表面紧密黏附,细胞呈梭形且生长良好;复合材料浸提液对实验兔不引起溶血反应(溶血率为1.19%)且无致热源性;浸提液注入小鼠腹腔后,小鼠在72h内均无死亡,活动、进食正常,未见不良反应,说明该材料属于无毒材料;纯PLLA和PLLA/HA材料植入实验兔肌肉内后,早期组织周围有轻度的炎症反应,可见少量炎性细胞,并形成较厚的纤维膜,但随植入时间的延长,炎症反应明显减轻,纤维包膜也基本消失;扫描电子显微镜结果显示:初始的PLLA材料结构较为致密,PLLA/HA复合材料中的HA颗粒分布均匀,大小均一,随降解时间的延长,材料表面出现大小不等的孔隙和裂纹。由此可得出:PLLA/HA复合材料具有良好的生物相容性,符合生物安全性的要求。

来源：

同方学位论文库评论

CK及FGFR1在犬乳恒牙替换过程中的表达

引用

作者：杨秀玲吉林大学

学位级别：硕士

乳牙根是人体中唯一能够进行生理性吸收的硬组织，其正常吸收是恒牙萌出的关键。破骨细胞（OC）和破牙细胞（OD）在此过程中发挥了重要的调控作用，现已明确有多种调控因子参与了破骨细胞和破牙细胞的增殖、分化、激活等骨吸收过程。 C... 详细信息

乳牙根是人体中唯一能够进行生理性吸收的硬组织，其正常吸收是恒牙萌出的关键。破骨细胞（OC）和破牙细胞（OD）在此过程中发挥了重要的调控作用，现已明确有多种调控因子参与了破骨细胞和破牙细胞的增殖、分化、激活等骨吸收过程。 CK为番木瓜家族中的半胱氨酸蛋白酶成员，具有蛋白水解酶的特性，能够水解Ⅰ型胶原等骨基质蛋白，对破骨细胞、破牙细胞的形成和骨吸收有重要作用。FGFR1为成纤维细胞因子受体，能够与相应配体结合，调控成骨细胞及破骨细胞的增殖分化及骨形成。本研究利用HE染色观察犬乳恒牙替换过程中组织形态的变化，TRAP染色观察破骨细胞、破牙细胞及其前体细胞的分布及数量变化，免疫组化方法检测犬乳恒牙替换过程中CK及FGFR1的表达。结果表明：乳牙根吸收呈间断性，分静止期和活跃期，乳牙根吸收起始阶段组织形态稳定，晚期牙根及牙槽骨吸收活跃，同时骨改建明显。吸收活跃期破骨/破牙细胞及其前体细胞分布广泛，数量明显多于乳牙根稳定组、吸收早期组及恒牙列初期。吸收活跃期破骨/破牙细胞内ＣＫ免疫组化强阳性，染色强度明显高于乳牙根稳定组、吸收早期组及恒牙列初期。恒牙胚发育过程中成釉细胞、成牙本质细胞及周围牙囊组织ＣＫ免疫组化染色阳性。表明ＣＫ作用于破骨细胞、破牙细胞、成釉细胞、成牙本质细胞及周围牙囊组织参与乳牙根的生理性吸收、恒牙萌出。吸收活跃期破骨/破牙细胞、成骨细胞内FGFR1免疫组化强阳性，染色强度明显高于乳牙根稳定组、吸收早期组及恒牙列初期。恒牙胚发育过程中成釉细胞、成牙本质细胞及周围牙囊组织FGFR1免疫组化染色阳性。提示FGFR1作用破骨细胞、破牙细胞、成骨细胞、成釉细胞、成牙本质细胞及周围牙囊组织参与乳牙根的生理性吸收及恒牙的萌出。FGFR1一方面直接对破骨细胞及破牙细胞产生调控作用，另一方面通过成骨细胞间接对破骨细胞及破牙细胞产生调控作用。

来源：

同方学位论文库评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：