羟基积雪草苷对脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞的生物学行为的影响

作     者：李聪聪 

作者单位：吉林大学 

学位级别：硕士

导师姓名：姜秋

授予年度：2024年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：羟基积雪草苷 牙龈成纤维细胞 脂多糖 炎症因子 

摘      要：研究目的: 本研究就羟基积雪草苷(Madecassoside)对人牙龈成纤维细胞(Human gingival fibroblasts,HGFs)的生物活性作用进行讨论,探究其对HGFs的增殖特性,并进一步采用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)建立炎症模型,探究羟基积雪草苷对LPS诱导的HGFs凋亡、迁移及炎症因子的表达的影响,为牙周炎的治疗提供给新的药物选择。 研究方法: 1.收集临床下颌第三磨牙由于阻生需行拔除术与牙龈修整术的健康牙周患者的牙龈组织,通过酶消化组织块法获得原代HGFs,传代至P3-P5用于实验操作,通过镜下形态观察与免疫荧光法进行细胞鉴定。 2.采用CCK-8法检测不同浓度羟基积雪草苷对HGFs细胞活力的影响。 3.利用LPS建立HGFs炎症模型,采用CCK-8法、细胞划痕法及Transwell法检测不同浓度羟基积雪草苷对LPS诱导的HGFs的凋亡、细胞迁移的影响。 4.利用LPS建立HGFs炎症模型,采用酶联免疫吸附试验检测羟基积雪草苷对LPS刺激的HGFs炎症因子的表达。 5.利用SPSS Statistics 23统计分析软件进行数据分析,并通过Graph Pad Prism9.5进行作图。实验数据均为计量资料,结果以均数±标准差(x±s)表示。实验数据通过正态性检验及方差齐性检验后,多组间比较采用单因素方差分析(One-way analysis of variance,ANONA),进一步两两比较采用最小显著差异法(Least significant difference,LSD)法。检验水准α=0.05,以P0.05)。 3.10μg/mL浓度的LPS在24h时对HGFs增殖无明显抑制(P0.05),在48h即出现细胞活力抑制现象(P0.05),150μM与200μM之间无显著性差别(P0.05),而100μM与150μM之间存在统计学意义(P0.05)。 研究结论: 羟基积雪草苷(0-200μM)不影响HGFs的细胞活性并在一定浓度下促进HGFs的增殖。羟基积雪草苷可缓解LPS对HGFs增殖和迁移的抑制作用,同时抑制LPS诱导的HGFs分泌的炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8的释放。