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Methodologies for preparation of prokaryotic extracts for cell-free expression systems

Synthetic and Systems Biotechnology 2020年第4期5卷 252-267页

作者： Stephanie D.Cole Aleksandr E.Miklos Abel C.Chiao Zachary Z.Sun Matthew W.Lux US Army Combat Capabilities Development Command Chemical Biological Center 8567 Ricketts Point RoadAberdeen Proving GroundMD21010USA Division of Biology and Biological Engineering California Institute of TechnologyPasadenaCAUSA synvitrobio inc. San FranciscoCAUSA 8567 Ricketts Point Road Bldg E3549 Room B140APGMD21010USA

Cell-free systems that mimic essential cell functions,such as gene expression,have dramatically expanded in recent years,both in terms of applications and widespread adoption.Here we provide a review of cell-extract methods,with a specific focus on prokaryotic systems.Firstly,we describe the diversity of Escherichia coli genetic strains available and their corresponding utility.We then trace the history of cell-extract methodology over the past 20 years,showing key improvements that lower the entry level for new researchers.Next,we survey the rise of new prokaryotic cell-free systems,with associated methods,and the opportunities provided.Finally,we use this historical perspective to comment on the role of methodology improvements and highlight where further improvements may be possible.

关键词： Cell-free systems Cell-free expression Cell-free extract Synthetic biology Methods

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