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Infectious Diseases of Poverty 2015年第1期4卷 426-446页

作者： Marie J.Ducrotoy Khaoula Ammary Hicham Ait Lbacha Zaid Zouagui Virginie Mick Laura Prevost Ward Bryssinckx Susan CWelburn Abdelali Benkirane Division of Infection and Pathway Medicine School of Biomedical SciencesCollege of Medicine and Veterinary MedicineThe University of EdinburghChancellor’s Building49 Little France CrescentEdinburgh EH164SBUK Institut Agronomique et Veterinaire Hassan II RabatMorocco eu/oie/fao&national reference laboratory for brucellosis Animal Health LaboratoryParis-EstUniversity/AnsesMaisons-AlfortFrance Avia-GIS Risschotlei 33BE-2980 ZoerselBelgium

brucellosis is one of the most widespread zoonoses in the world caused by several species of the genus *** disease,eradicated in many developed countries,is a re-emerging neglected zoonosis endemic in several zones especially in the Mediterranean region,impacting on human health and livestock production.A One Health approach could address brucellosis control in Morocco but scarcity of reliable epidemiological data,as well as underreporting,hinders the implementation of sustainable control *** and control policies implemented by the Moroccan government in domestic animals(cattle and small ruminants)in the last few decades are assessed for disease *** study considers the origins of animal brucellosis in Morocco and the potential for emergence of brucellosis during a shift from extensive to intensive livestock production.

关键词： brucellosis Morocco Cattle Small ruminant Camel Human Control Epidemiology Surveillance Emergence

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动物布鲁氏菌病实验室检测技术研究进展

中国兽药杂志 2023年第4期57卷 78-87页

作者：李林姣彭小薇刘铭赫张莹辉冯宇徐磊李俊平中国兽医药品监察所国家/oie/fao布鲁氏菌病参考实验室北京102600

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的人畜共患传染病,对我国畜牧业生产和公共卫生安全造成严重的威胁。科学准确诊断是布鲁氏菌病防控的重要技术依据,然而布鲁氏菌病的检测和确诊一直以来都并非易事,常常需要通过多种检测结果的综合分析,因此... 详细信息

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的人畜共患传染病,对我国畜牧业生产和公共卫生安全造成严重的威胁。科学准确诊断是布鲁氏菌病防控的重要技术依据,然而布鲁氏菌病的检测和确诊一直以来都并非易事,常常需要通过多种检测结果的综合分析,因此发展敏感性高、特异性好的布鲁氏菌的检测技术十分重要。总结并分析了近年来布鲁氏菌检测技术基础研究和临床应用研究方面的最新进展,结合国家动物布鲁氏菌病参考实验室工作经验,对各类检测方法的优缺点和适用范围进行了分析,旨在为动物布病诊断技术的选择和推广应用提供理论和实践依据,为动物布鲁氏菌诊断技术的研究提供方向性思考。

关键词：布鲁氏菌病检测技术病原学血清学

布鲁氏菌粗糙型RA343株与光滑型A19株免疫小鼠后特异性T细胞和抗体动态变化分析

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微生物学通报 2022年第7期49卷 2700-2714页

作者：杨晓彤张莹辉李巧玲蒋卉丁家波沈青春范学政秦建华河北农业大学河北保定071000 中国兽医药品监察所国家/oie布鲁氏菌病参考实验室北京100081

【背景】布鲁氏菌病(简称布病)严重威胁着人类健康和畜牧业的发展,使用毒力弱、免疫原性好、不干扰血清学诊断的疫苗是防控布病的有效措施。【目的】比较布鲁氏菌粗糙型RA343株与光滑型A19株免疫小鼠后机体特异性T细胞和抗体的动态变化... 详细信息

【背景】布鲁氏菌病(简称布病)严重威胁着人类健康和畜牧业的发展,使用毒力弱、免疫原性好、不干扰血清学诊断的疫苗是防控布病的有效措施。【目的】比较布鲁氏菌粗糙型RA343株与光滑型A19株免疫小鼠后机体特异性T细胞和抗体的动态变化,评价粗糙型RA343株的免疫效果。【方法】采用6周龄雌性BALB/c小鼠,共分为3组,RA343株免疫组和A19株免疫组各15只小鼠,空白对照组5只小鼠。免疫组的每只小鼠经腹股沟皮下注射0.1 mL(含菌量为1×10^(8) CFU)菌液。免疫后1、2和3周各免疫组及空白对照组分别剖杀5只小鼠,无菌取脾脏,一部分脾脏研磨分离淋巴细胞,用流式细胞术检测小鼠布鲁氏菌特异性CD4^(+)T细胞与CD8^(+)T细胞所占比例的变化趋势;另一部分脾脏称重后分离布鲁氏菌RA343株和A19株,评估RA343株和A19株在小鼠脾脏中的定殖情况。在剖杀小鼠的同时取外周血分离血清,用ELISA方法检测免疫后小鼠血清中IgM和IgG抗体的消长规律。采用GraphPad Prism 8.0软件作图并进行统计学分析。【结果】与A19免疫组相比,免疫后1周,RA343免疫组小鼠脾脏布鲁氏菌特异性CD4^(+)IFN-γ所占比例极显著增加(P<0.01),CD4^(+)IL-2、CD8^(+)IL-2和CD8^(+)TNF-α所占比例显著增加(P<0.05);免疫后2周,RA343免疫组特异性CD4^(+)TNF-α所占比例极显著增加(P<0.01),CD8^(+)TNF-α所占比例显著增加(P<0.05);免疫后3周,CD4^(+)TNF-α所占比例显著增加(P<0.05),CD8^(+)IFN-γ所占比例极显著增加(P<0.01)。免疫后1-3周,RA343免疫组小鼠脾脏含菌量显著低于A19免疫组(P<0.05),而且RA343免疫组脾脏重量低于A19免疫组。光滑型A19株免疫小鼠的IgM和IgG抗体水平在免疫后2周均显著升高;粗糙型RA343株免疫小鼠的IgM和IgG抗体采用光滑型抗原进行ELISA检测结果均为阴性。【结论】与光滑型A19株相比,布鲁氏菌粗糙型RA343株诱导的细胞免疫应答较强,而且RA343组小鼠脾脏含菌量显著低于A19组,产生抗体与光滑型布鲁氏菌抗原无交叉血清学反应,综合表明布鲁氏菌粗糙型RA343株毒力弱,免疫小鼠后可产生良好的细胞免疫反应和体液免疫反应且不干扰血清学诊断,是理想的布鲁氏菌疫苗候选株。

关键词：布鲁氏菌流式细胞术特异性T细胞抗体

噬菌体展示技术及其在单克隆抗体制备中的应用

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中国兽药杂志 2022年第12期56卷 82-89页

作者：刘铭赫李巧玲李林姣程君生李俊平张媛彭小薇王楠中国兽医药品监察所国家/oie布鲁氏菌病参考实验室北京102600

噬菌体展示技术是一种强大的高通量多肽筛选技术,常用于确定靶标蛋白的亲和力与结合位点,并广泛应用于单克隆抗体的制备。下一代测序和微流控技术的出现及发展使噬菌体展示技术成为制备单克隆抗体更为强大和常用的工具。对噬菌体展示技... 详细信息

噬菌体展示技术是一种强大的高通量多肽筛选技术,常用于确定靶标蛋白的亲和力与结合位点,并广泛应用于单克隆抗体的制备。下一代测序和微流控技术的出现及发展使噬菌体展示技术成为制备单克隆抗体更为强大和常用的工具。对噬菌体展示技术的历史发展与分类、噬菌体展示技术制备单克隆抗体的过程及其在制备单克隆抗体上的应用进行了论述,以期为相关研究人员提供参考。

关键词：噬菌体展示抗体库单克隆抗体噬菌体下一代测序

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布鲁氏菌病关节炎的致病机制研究进展

生命科学 2020年第11期32卷 1237-1242页

作者：王鑫丁家波中国兽医药品监察所国家/oie布鲁氏菌病参考实验室北京102600

布鲁氏菌病(布病)是由布鲁氏菌感染引起的一种人畜共患传染病。动物与人感染布鲁氏菌都能表现累及关节相关的症状,即布病关节炎。典型的动物病理模型表明,布鲁氏菌关节炎发病时关节腔周围组织有大量中性粒细胞、单核细胞和破骨细胞的浸... 详细信息

布鲁氏菌病(布病)是由布鲁氏菌感染引起的一种人畜共患传染病。动物与人感染布鲁氏菌都能表现累及关节相关的症状,即布病关节炎。典型的动物病理模型表明,布鲁氏菌关节炎发病时关节腔周围组织有大量中性粒细胞、单核细胞和破骨细胞的浸润并伴有明显的骨破坏。除了布鲁氏菌对骨关节细胞的直接作用外,布鲁氏菌和骨组织细胞、免疫细胞还通过细胞因子产生级联互作效应,吸引中性粒细胞、单核细胞迁移并促进破骨细胞生成,导致骨组织破坏。然而,人与动物布鲁氏菌病关节炎发病机制、感染过程中多细胞间的互作效应等仍不甚清楚,有待探索。

关键词：布鲁氏菌关节炎布鲁氏菌病

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布鲁氏菌4种高通量抗体检测方法的比较研究

畜牧兽医学报 2021年第11期52卷 3208-3214页

作者：蒋卉冯宇李筱英范学政彭小薇丁家波中国兽医药品监察所国家/OIE布鲁氏菌病参考实验室北京100081

旨在科学选择和使用布鲁氏菌抗体检测方法,推动布病诊断试剂标准化。本研究用布病阳性血清标准品测定了国家/oie布鲁氏菌病参考实验室开发的布鲁氏菌荧光偏振(FPA)抗体检测试剂盒、动物布鲁氏菌病竞争ELSIA(cELISA)抗体检测试剂盒、牛... 详细信息

旨在科学选择和使用布鲁氏菌抗体检测方法,推动布病诊断试剂标准化。本研究用布病阳性血清标准品测定了国家/oie布鲁氏菌病参考实验室开发的布鲁氏菌荧光偏振(FPA)抗体检测试剂盒、动物布鲁氏菌病竞争ELSIA(cELISA)抗体检测试剂盒、牛布鲁氏菌病间接ELISA(iELISA)抗体检测试剂盒和改进的微量补体结合试验(mCFT)等4种方法的灵敏度。通过对已知阴、阳性血清样品的检测,比较了各检测方法的敏感性和特异性,并用临床样本进一步比较了各种方法检测结果的吻合性。结果表明,4种方法检测的灵敏度基本一致,当布病阳性血清标准品按1∶20稀释(即50 IU·mL-1)时均检测为阳性,1∶40稀释(即25 IU·mL-1)时均检测为阴性。FPA、cELISA、iELISA和mCFT方法的敏感性分别为97.14%、100.00%、100.00%、98.57%,特异性分别为96.34%、95.12%、97.56%、100.00%。对315份临床样本的检测结果显示,各方法之间的符合率均高于90.00%,其中iELISA、FPA、cELISA与mCFT符合率分别为97.14%、96.83%、92.70%;FPA、cELISA与iELISA符合率分别为95.24%、93.65%;FPA与cELISA符合率为91.43%。iELISA、FPA、mCFT 3种方法之间吻合性最高,cELISA与其他3种方法之间的吻合性略低。

关键词：布鲁氏菌抗体检测方法比较

牛种布鲁氏菌2308不同途径小鼠感染模型的建立与评估

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微生物学通报 2021年第11期48卷 4190-4197页

作者：蒋卉冯宇沈青春彭小薇朱良全丁家波中国兽医药品监察所国家/oie布鲁氏菌病参考实验室北京100081

【背景】布鲁氏菌可经口、皮肤、黏膜和呼吸道感染人和动物。小鼠是布鲁氏菌研究中最常用的模型动物。【目的】建立牛种布鲁氏菌2308不同途径和剂量感染BALB/c小鼠的模型,为布鲁氏菌小鼠感染试验提供参考。【方法】用10^(1)−10^(5) CFU... 详细信息

【背景】布鲁氏菌可经口、皮肤、黏膜和呼吸道感染人和动物。小鼠是布鲁氏菌研究中最常用的模型动物。【目的】建立牛种布鲁氏菌2308不同途径和剂量感染BALB/c小鼠的模型,为布鲁氏菌小鼠感染试验提供参考。【方法】用10^(1)−10^(5) CFU这5个不同感染剂量,分别经注射、口服和点眼方式感染BALB/c小鼠。在感染后不同时间点采集小鼠血清,检测IgG、IgM、IgA抗体含量、脾脏重量及脾脏含菌量,评价布鲁氏菌经不同途径感染BALB/c小鼠的效果。【结果】10 CFU是注射感染BALB/c小鼠的最小感染剂量;10^(5) CFU是口服感染BALB/c小鼠的最小感染剂量。10^(1)−10^(5) CFU这5个不同感染剂量经点眼途径均未能成功感染BALB/c小鼠。在10^(5) CFU感染剂量下,口服与注射感染组小鼠每克脾脏平均含菌量分别为10^(5.673) CFU/g和10^(5.009) CFU/g,无显著差异(P>0.05),但口服感染组小鼠脾脏平均重量为0.310 g,显著高于注射感染组0.165 g(P<0.01)。在试验期内,注射感染组和口服感染组小鼠体内IgG抗体的滴度均随感染时间延长而持续升高;整体上,口服感染组IgG抗体峰值显著高于注射感染组;2组IgM抗体变化趋势一致;口服感染组有2只小鼠在感染28 d后产生IgA抗体,注射感染组均未检测到IgA抗体。【结论】建立了牛种布鲁氏菌2308通过不同途径感染BALB/c小鼠的模型。

关键词：牛种布鲁氏菌小鼠感染模型每克脾脏含菌量

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布鲁氏菌逃避宿主免疫机制的研究进展

生命科学 2019年第9期31卷 871-878页

作者：谢士杰彭小薇冯宇许冠龙丁家波范学政中国兽医药品监察所国家/oie动物布鲁氏菌病参考实验室

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患性传染病,可以对畜牧业生产和人类健康造成严重的危害。布鲁氏菌是兼性胞内寄生菌,在长期与宿主免疫系统的相互作用中,进化出了多种逃避宿主免疫应答的机制。该文主要概述了布鲁氏菌胞内循环... 详细信息

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患性传染病,可以对畜牧业生产和人类健康造成严重的危害。布鲁氏菌是兼性胞内寄生菌,在长期与宿主免疫系统的相互作用中,进化出了多种逃避宿主免疫应答的机制。该文主要概述了布鲁氏菌胞内循环过程和逃避宿主先天性免疫应答和适应性免疫应答的机制,以及通过激活非典型自噬途径、抑制细胞凋亡、调控细胞焦亡等方式建立慢性感染的策略,以期为进一步深入研究布鲁氏菌病以及病原与宿主的相互作用提供参考。

关键词：布鲁氏菌胞内寄生先天性免疫应答获得性免疫应答细胞凋亡细胞焦亡

wbkD基因缺失影响猪种布鲁菌LPS合成能力和毒力

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中国动物传染病学报 2022年第5期30卷 1-7页

作者：王鑫刘郁夫孙佳丽冯宇彭小薇陈瑞爱丁家波中国兽医药品监察所国家/oie布鲁氏菌病参考实验室北京102600 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司肇庆526238 华南农业大学兽医学院广州510642

wbkD基因在布鲁菌中编码一种糖基转移酶,参与合成布鲁菌LPS的O侧链。为探究wbkD基因与布鲁菌LPS合成和毒力之间的关系,本研究利用同源重组技术构建猪种布鲁菌wbkD基因缺失株。通过吖啶黄凝集试验、结晶紫染色、细菌LPS银染分析比较亲本... 详细信息

wbkD基因在布鲁菌中编码一种糖基转移酶,参与合成布鲁菌LPS的O侧链。为探究wbkD基因与布鲁菌LPS合成和毒力之间的关系,本研究利用同源重组技术构建猪种布鲁菌wbkD基因缺失株。通过吖啶黄凝集试验、结晶紫染色、细菌LPS银染分析比较亲本株和缺失株之间LPS合成能力的差异,并利用小鼠巨噬细胞感染试验和小鼠感染模型,分析wbkD基因缺失对细菌毒力的影响。结果显示,wbkD基因缺失导致布鲁菌由光滑表型转变为粗糙表型,感染后48 h和72 h,ΔwbkD的细胞内存活能力显著弱于亲本株(P<0.001),小鼠感染试验进一步证实,在相同的感染剂量下,感染后1周和4周ΔwbkD在小鼠脾脏和肝脏载菌量均显著低于亲本株(P<0.001)。wbkD基因是布鲁菌合成LPS过程中的关键基因,wbkD基因缺失导致布鲁菌毒力致弱,本研究可为进一步筛选布病疫苗分子修饰靶点提供参考。

关键词：布鲁菌 wbkD 基因缺失 LPS 毒力

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鹿布鲁氏菌病诊断与防控研究进展

中国兽药杂志 2021年第9期55卷 65-70页

作者：秦玉明彭小薇冯宇范学政张莹辉丁家波中国兽医药品监察所国家/OIE布鲁氏菌病参考实验室北京102600

布鲁氏菌病(布病)是一种重要的人兽共患传染病,可感染多种动物,其中鹿科动物是重要的宿主之一。随着我国经济动物养殖规模的扩大和发展以及野生鹿群资源保护的需求,鹿布病防控具有重要的公共卫生意义。本文就国内外鹿布病的流行、临床... 详细信息

布鲁氏菌病(布病)是一种重要的人兽共患传染病,可感染多种动物,其中鹿科动物是重要的宿主之一。随着我国经济动物养殖规模的扩大和发展以及野生鹿群资源保护的需求,鹿布病防控具有重要的公共卫生意义。本文就国内外鹿布病的流行、临床症状、诊断及预防等情况进行综述,为我国鹿布病防控提供参考与建议。

关键词：鹿布鲁氏菌病诊断防控