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阿司匹林通过铁死亡减轻氧糖剥夺复氧的小鼠海马神经元细胞损伤的作用机制

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中华老年心脑血管病杂志 2024年第8期26卷 960-964页

作者：胡玉娇丛珊赵磊董春雪王冬梅王楠楠毛颖齐齐哈尔医学院附属第二医院神经内二科 161006 齐齐哈尔医学院附属第二医院药学部 161006 齐齐哈尔医学院附属第二医院全科医学科 161006 齐齐哈尔医学院附属第二医院康复医学科161006

目的探究阿司匹林通过调节铁死亡对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的小鼠神经元HT22细胞损伤的作用。方法体外培养小鼠海马神经元HT22细胞,选取HT22细胞分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、... 详细信息

目的探究阿司匹林通过调节铁死亡对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的小鼠神经元HT22细胞损伤的作用。方法体外培养小鼠海马神经元HT22细胞,选取HT22细胞分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组(n=3),除对照组外,其余4组建立OGD/R神经元细胞损伤模型,低、中、高剂量组分别给予阿司匹林100、200、400μg/ml处理。检测各组细胞活力及炎性因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)1β、IL-6水平;试剂盒检测超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽、活性氧、乳酸脱氢酶、Fe^(2+)、丙二醛水平;Western blot检测铁死亡相关蛋白溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 members 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)以及酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-coa synthase long chain family member 4,ACSL4)水平。结果模型组细胞活力明显低于对照组,差异有统计学意义(0.49±0.07 vs 1.00±0.12,P二醛、ACSL4蛋白表达明显升高,超氧化物歧化酶、抗氧化酶、谷胱甘肽、SLC7A11、GPX4蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P二醛、ACSL4蛋白表达明显降低,超氧化物歧化酶、抗氧化酶、谷胱甘肽、SLC7A11、GPX4蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论阿司匹林可以通过调节铁死亡,减轻OGD/R诱导的小鼠神经元HT22细胞损伤,且呈剂量依赖性。

关键词：脑缺血再灌注损伤阿司匹林铁死亡海马神经元氧糖剥夺/复糖复氧

IGFBP6在不稳定颈动脉斑块中的作用:生物信息学分析与实验验证

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解放军医学杂志 2024年第6期49卷 701-710页

作者：李玉岩梁莹莹周洁信车飞付金霞齐齐哈尔医学院附属第二医院神经内科黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院附属第二医院心血管内科黑龙江齐齐哈尔161006

目的探讨不稳定颈动脉粥样硬化斑块的差异表达基因(DEGs)及其分子相互作用。方法从基因表达数据库(GEO)和欧洲生物信息学研究所数据库下载颈动脉斑块患者的基因表达数据集GSE41571、GSE118481和E-MTAB-2055。采用基因本体生物学过程(GO-... 详细信息

目的探讨不稳定颈动脉粥样硬化斑块的差异表达基因(DEGs)及其分子相互作用。方法从基因表达数据库(GEO)和欧洲生物信息学研究所数据库下载颈动脉斑块患者的基因表达数据集GSE41571、GSE118481和E-MTAB-2055。采用基因本体生物学过程(GO-BP)富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析、蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络、miRNAs/转录因子与靶基因的相互关系及药物-基因相互作用等方法,分析至少两个数据集中不稳定颈动脉斑块的共调控DEGs。采用定量实时PCR(qRT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测颈动脉粥样硬化斑块患者58例的颈动脉斑块和血浆中部分DEGs的表达水平。结果GO富集分析显示,不稳定颈动脉斑块的DEGs主要富集在与炎症反应相关的基因和细胞外基质结构基因;KEGG富集分析显示,不稳定颈动脉斑块中上调的DEGs富集于细胞外基质受体相互作用、PI3K-Akt、Hippo信号通路及转化生长因子-β(TGF-β)信号通路,下调的DEGs主要富集于溶酶体、吞噬体及趋化因子过程。PPI网络分析结果显示,COL1A2、COL4A2、胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)、COL4A5、C1QA、CXCL10、CXCL2、CXCR4和CSF1R等可能在PPI网络中起重要作用。药物-基因相互作用的预测显示,CSF1R的药物相互作用最多,CXCL2受药物拮抗程度最高,IGFBP6受药物激活程度最高。qRT-PCR检测结果显示,与稳定斑块组比较,不稳定斑块组IGFBP6表达水平明显降低(P<0.001)。ELISA法检测结果显示,不稳定斑块组血浆IGFBP6浓度明显低于稳定斑块组(P<0.0001)。受试者工作特征曲线分析结果显示,采用血浆IGFBP6水平鉴别不稳定斑块的曲线下面积为0.894(95%CI 0.810~0.977),截断值为142.08 ng/ml。结论IGFBP6可能成为预测不稳定颈动脉斑块的重要生物标志物。

关键词：动脉粥样硬化卒中生物信息学胰岛素样生长因子结合蛋白6

基于基因表达综合数据库芯片挖掘结合网络药理学与分子对接探讨芒果苷治疗口腔黏膜下纤维化的机制研究

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华西口腔医学杂志 2024年第4期42卷 444-451页

作者：宋子毅杨超张云龙张柱江任天娇张欣悦李雪齐齐哈尔医学院口腔医学院齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院医学技术学院齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院公共卫生学院齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院基础医学院齐齐哈尔161006

目的基于基因表达综合(GEO)数据库芯片挖掘、网络药理学及分子对接技术探讨芒果苷(MF)治疗口腔黏膜下纤维化(OSF)的核心作用靶标及潜在作用机制。方法基于GEO芯片挖掘OSF的潜在治疗靶点,利用数据库预测MF潜在作用靶标和收集OSF疾病靶标... 详细信息

目的基于基因表达综合(GEO)数据库芯片挖掘、网络药理学及分子对接技术探讨芒果苷(MF)治疗口腔黏膜下纤维化(OSF)的核心作用靶标及潜在作用机制。方法基于GEO芯片挖掘OSF的潜在治疗靶点,利用数据库预测MF潜在作用靶标和收集OSF疾病靶标,使用EVenn平台绘制维恩图,STRING数据库绘制蛋白质互作(PPI)网络,DAVID平台进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,Cytoscape 3.10.1软件绘制药物—靶标—通路—疾病网络图,AutoDocktools 1.5.6软件进行分子对接分析及可视化。结果从多种数据库挖掘得到MF潜在靶标356个,OSF疾病靶标360个,选取PPI网络中排名前15个关键靶蛋白,GO功能及KEGG通路富集分析结果显示,MF治疗OSF主要涉及高级糖基化终末产物-受体(AGE-RAGE)、表皮生长因子受体(EGFR)等信号通路。分子对接显示,MF与丝氨酸蛋白激酶(AKT1)、肿瘤坏死因子(TNF)等核心靶点有较佳结合活性。结论MF可能通过多靶点、多途径的方式对OSF发挥治疗作用。

关键词：口腔黏膜下纤维化芒果苷基因表达综合数据库网络药理学分子对接

天职所在为生而战——记齐齐哈尔医学院附属第二医院重症医学科主任张东海

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奋斗 2020年第6期 59-60页

作者：郝莉洁齐齐哈尔医学院

庚子鼠年春节前夕,一场声势浩大、持续范围广、涉及人数众多的新冠肺炎疫情突然暴发。1月27日,齐齐哈尔医学院附属第二医院党委向全体党员干部发出了支援武汉倡议书,各科室"请战书"纷至沓来……张东海,重症医学科主任,主动请缨支援武汉... 详细信息

庚子鼠年春节前夕,一场声势浩大、持续范围广、涉及人数众多的新冠肺炎疫情突然暴发。1月27日,齐齐哈尔医学院附属第二医院党委向全体党员干部发出了支援武汉倡议书,各科室"请战书"纷至沓来……张东海,重症医学科主任,主动请缨支援武汉。这次医疗任务不同于往常,同志们有些担心这位老主任。"我的专业非常适合对抗疫情,请求前往武汉。"张东海回答得铿锵有力。

关键词：医疗任务齐齐哈尔医学院附属第二医院党员干部东海疫情武汉主任

过氧麦角甾醇通过调控线粒体凋亡途径诱导人肝癌细胞凋亡

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中国中药杂志 2024年第12期49卷 3365-3372页

作者：王璐罗然赵音旭邹宇卜明林宇齐齐哈尔医学院药学院黑龙江齐齐哈尔161006

探讨过氧麦角甾醇(ergosterol peroxide, EP)对人肝癌细胞凋亡的影响及其作用机制。利用cell counting kit-8(CCK-8)法检测0(空白对照)、2.5、5、10、20、40、80μmol·L^(-1)的EP作用于HepG2、SK-Hep-1细胞24、48、72 h后的细胞活力,并计算24、48、72 h的半数抑制浓度(IC_(50))。正式实验以0(空白对照)、10、20、40μmol·L^(-1)的EP与HepG2细胞共培养48 h后,使用活性氧(reactive oxygen species, ROS)荧光探针法检测EP对细胞内ROS的影响,使用线粒体膜电位荧光探针染色检测EP对细胞内线粒体膜电位的影响,使用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡数,使用AO/EB染色法检测不同浓度的EP对细胞凋亡形态的影响。使用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测不同浓度的EP对线粒体凋亡途径相关蛋白B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、细胞色素C(Cyt-C)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(caspase-3)、活化的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)、胱天蛋白酶9(caspase-9)、活化的胱天蛋白酶9(cleaved caspase-9)蛋白表达的影响。结果表明,不同浓度的EP均可抑制肝癌细胞增殖,且呈浓度和时间依赖性。与空白对照组相比,EP药物处理组ROS水平显著升高(P<0.05),线粒体膜电位显著下降(P<0.05),细胞总凋亡率显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达显著下调,Cyt-C、Bax、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3表达均显著上调(P<0.05)。综上所述,EP可能通过调控线粒体介导的凋亡途径抑制肝癌细胞增殖,并诱导其凋亡。

关键词：过氧麦角甾醇肝癌线粒体膜电位线粒体凋亡活性氧

不同灰质结构亚型强迫症患者的动态功能连接异常分析

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中华精神科杂志 2024年第3期57卷 138-146页

作者：丁志鹏尚婷惠子李平李成冲杨旭齐佳乐韩佳奇秦晓青秦玮琪李善聪陈云辉吕丹王娜肖健刘万强齐齐哈尔医学院医学技术学院齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院精神卫生学院临床心理教研室齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院精神卫生学院精神卫生研究所齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院精神卫生学院精神医学教研室齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院附属第四医院精神科齐齐哈尔161006

目的探讨不同灰质结构亚型强迫症患者静息状态下的动态功能连接(dynamic functional connectivity,dFC)模式,并探究不同亚型强迫症患者的异常灰质体积和dFC模式与临床症状的关系。方法前瞻性收集2013年9月至2020年3月就诊于齐齐哈尔医... 详细信息

目的探讨不同灰质结构亚型强迫症患者静息状态下的动态功能连接(dynamic functional connectivity,dFC)模式,并探究不同亚型强迫症患者的异常灰质体积和dFC模式与临床症状的关系。方法前瞻性收集2013年9月至2020年3月就诊于齐齐哈尔医学院附属第四医院(20例)和齐齐哈尔市精神卫生中心住院和门诊(28例)的共48例强迫症患者的临床资料,其中男33例,女15例,年龄18~45(27.1±6.7)岁。同期招募年龄匹配的健康对照者39名,其中男31名,女8名,年龄18~45(28.5±8.6)岁。对符合ICD-10诊断标准的48例强迫症患者(强迫症组)和39名健康对照(对照组)进行磁共振成像扫描。采用基于体素的形态学分析(voxel-based morphometry,VBM),使用半监督机器学习方法,以灰质体积为特征对强迫症组进行亚型分析,选取灰质体积异常的脑区为感兴趣脑区,进行基于全脑体素的dFC分析,探究异常灰质体积和dFC模式与强迫症临床症状之间的相关性。结果基于灰质体积,强迫症可分为2个亚型,其中亚型1为右中央后回灰质体积增加[809个体素;t=4.31;高斯随机场(Gaussian random field,GRF)校正,体素P<0.001,团块水平P<0.05双尾],亚型2为左颞上回灰质体积降低(1118个体素;t=-4.37;GRF校正,体素P<0.001,团块水平P<0.05双尾)。在亚型1中,右侧中央后回与左内侧额上回之间的dFC显著降低(187个体素;t=-4.42;GRF校正,体素P<0.001,团块水平P<0.05双尾);在亚型2中,左侧颞上回与左侧海马、左侧中央旁小叶之间的dFC显著降低(分别为272、99个体素;t=-4.69、-5.01;GRF校正,体素P<0.001,团块水平P<0.05双尾)。亚型1右侧中央后回与左内侧额上回之间的dFC值与病程呈负相关(r=-0.579;P=0.002,未校正);亚型2左侧颞上回与左侧海马之间dFC值与病程呈正相关(r=0.578;P=0.003,未校正)。结论静息状态下,基于灰质体积的不同亚型强迫症患者具有不同的dFC异常模式。

关键词：强迫性障碍亚型动态功能连接灰质体积机器学习异质性

基于网络药理学及体外实验探讨过氧麦角甾醇对乳腺癌MCF-7细胞的作用机制

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中国中药杂志 2024年第13期49卷 3627-3635页

作者：罗然邓思琦赵音旭王璐任文康邹宇林宇卜明齐齐哈尔医学院药学院黑龙江齐齐哈尔161006

基于网络药理学方法探究过氧麦角甾醇(EP)抗乳腺癌的靶点及作用机制,并通过体外实验验证。采用网络药理学对EP作用靶点进行筛选,构建靶点网络及蛋白-蛋白互作(PPI)网络,对EP抗乳腺癌潜在的作用靶点及相关通路进行预测。采用MTT法检测EP... 详细信息

基于网络药理学方法探究过氧麦角甾醇(EP)抗乳腺癌的靶点及作用机制,并通过体外实验验证。采用网络药理学对EP作用靶点进行筛选,构建靶点网络及蛋白-蛋白互作(PPI)网络,对EP抗乳腺癌潜在的作用靶点及相关通路进行预测。采用MTT法检测EP对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制活性,克隆形成实验检测EP对MCF-7细胞增殖影响;采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测细胞的凋亡情况、线粒体膜电位及活性氧水平的变化情况;通过Western blot法检测EP对B细胞淋巴瘤(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyt C)、半胱氨酸蛋白酶蛋白(caspase)-7、活化的caspase-7(cleaved caspase-7)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸-苏氨酸激酶B(AKT)蛋白表达水平的影响情况。结果显示,经网络药理学预测,得出EP与乳腺癌有173个共同靶点;KEGG富集分析结果显示EP治疗乳腺癌结果主要在癌症通路、PI3K-AKT信号通路、细胞衰老信号通路、病毒致癌作用等信号通路;MTT结果显示,与对照组相比,EP组MCF-7细胞的活性明显降低,呈时间-浓度依赖趋势;EP能够抑制乳腺癌细胞MCF-7集落形成;采用10、20、40μmol·L^(-1)的EP作用MCF-7细胞24 h后,MCF-7细胞总凋亡率均显著升高,线粒体膜电位均显著降低,活性氧水平均显著升高;此外,MCF-7细胞经过EP处理后,细胞内Cyt C、Bax、cleaved caspase-7蛋白的表达水平上升,p-PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白的表达水平下降。研究表明,EP可抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖,减少集落形成,其机制可能与PI3K-AKT通路介导线粒体凋亡途径有关。

关键词：过氧麦角甾醇乳腺癌 MCF-7细胞网络药理学细胞凋亡线粒体膜电位活性氧

间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征合并偏头痛患者的临床特征

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中南大学学报(医学版) 2024年

作者：傅增辉金艳林再红李志超刘松涛刘旸于绘丽齐齐哈尔医学院附属第三医院神经内科齐齐哈尔医学院附属第三医院泌尿外科齐齐哈尔医学院附属第二医院泌尿外科

目的：间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征(interstitial cystitis/bladder pain syndrome,IC/BPS)与偏头痛均属于慢性疼痛综合征，二者在病理生理和临床表现上具有相似性，该研究旨在探讨IC/BPS合并偏头痛的临床特征。方法：选择2019年01月至... 详细信息

目的：间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征(interstitial cystitis/bladder pain syndrome,IC/BPS)与偏头痛均属于慢性疼痛综合征，二者在病理生理和临床表现上具有相似性，该研究旨在探讨IC/BPS合并偏头痛的临床特征。方法：选择2019年01月至2023年12月齐齐哈尔医学院附属第二医院、附属第三医院就诊的313例IC/BPS患者并收集临床资料。采用O’Leary Sant间质性膀胱炎症状指标评分(interstitial cystitis patient symptom index scores,ICSI)、疼痛数字评分法(Numeric Rating Scale,NRS)、广泛性焦虑障碍量表-7(Generalized Anxiety Disorde-7,GAD-7)、患者健康问卷-9(9 Patient Health Questionnaire,PHQ-9)、匹茨堡睡眠质量量表(The Pittsburgh Sleep Quality Index, PSQI)、躯体化症状自评量表(Self-Rating Somatic Symptom Scale,SSS)和生活质量影响程度评分表进行评估；酶联免疫法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)和P物质(substance P,SP)水平。结果：与无偏头痛的IC/BPS患者相比，合并偏头痛的IC/BPS患者在IC/BPS病程、ICSI评分、膀胱疼痛评分、焦虑评分、抑郁评分、睡眠评分、躯体化症状评分、生活质量影响程度评分、血清IL-1β、IL-6、PGE2和SP水平均较高，而运动频次偏低(均P<0.05)。与48例合并偏头痛的轻中度IC/BPS患者相比，39例合并偏头痛的重度IC/BPS患者的头痛疼痛评分、头痛发作频率、头痛持续时间、膀胱疼痛评分、焦虑评分、睡眠评分、躯体化症状评分、生活质量影响程度评分、血清IL-1β、IL-6、PGE2和SP水平均较高(均P<0.05)。合并偏头痛的IC/BPS患者ICSI评分与头痛疼痛评分、头痛发作频率、头痛持续时间、膀胱疼痛评分、焦虑评分、躯体化症状评分、生活质量影响程度评分呈正相关(均P<0.05)。结论：IC/BPS合并偏头痛患者的临床症状及精神心理症状较重，其IC/BPS症状严重程度与偏头痛的病情具有相关性。

关键词：间质性膀胱炎膀胱疼痛综合征偏头痛焦虑抑郁

黄连解毒汤调节HIF-1α/VEGF信号通路改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 59-65页

作者：张英华吕翰林周建文樊丽李洋齐齐哈尔医学院精神卫生学院黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院附属第一医院黑龙江齐齐哈尔161041 齐齐哈尔医学院医药科学研究院黑龙江齐齐哈尔161006

目的:基于缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路探讨黄连解毒汤(HLJDT)对淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)双转基因小鼠学习记忆的影响。方法:40只5月龄APP/PS1小鼠,分为模型组、多奈哌齐组(0.001 g·kg^(-1)·d^... 详细信息

目的:基于缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路探讨黄连解毒汤(HLJDT)对淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)双转基因小鼠学习记忆的影响。方法:40只5月龄APP/PS1小鼠,分为模型组、多奈哌齐组(0.001 g·kg^(-1)·d^(-1))、黄连解毒汤低、中、高剂量(1.5、3、6 g·kg^(-1)·d^(-1)),C57BL/6小鼠8只为正常组。连续给药45 d,进行Morris水迷宫实验,测定脏器指数,透射电镜观察小鼠脑血管内皮细胞形态结构,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马区APP、HIF-1α、VEGF、VEGFA及脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测APP、HIF-1α、VEGF mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠潜伏期明显延长(P<0.05),目标平台周围路程及时间明显缩短(P<0.05),脑和脾脏的脏器指数明显降低(P<0.05),血管内皮细胞核固缩,胞质不丰富,海马区APP、HIF-1α、VEGF、VEGFA蛋白表达增加(P<0.05),BDNF蛋白表达降低(P<0.05),APP、HIF-1α、VEGF mRNA表达增加(P<0.05)。与模型组比较,HLJDT高剂量组潜伏期明显缩短(P<0.05),目标平台周围路程及时间延长(P<0.05),脑和脾脏的脏器指数明显升高(P<0.05),血管内皮细胞细胞器结构较清晰,海马区APP、HIF-1α、VEGF、VEGFA蛋白表达降低(P<0.05),BDNF蛋白表达增加(P<0.05),APP、HIF-1α、VEGF mRNA表达降低(P<0.05)。结论:HLJDT可通过降低HIF-1α和VEGF表达来提高小鼠学习记忆能力,从而发挥对神经的保护作用。

关键词：黄连解毒汤淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)双转基因小鼠缺氧诱导因子-1α(HIF-1α) 血管内皮生长因子(VEGF)