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IGFBP6在不稳定颈动脉斑块中的作用:生物信息学分析与实验验证

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解放军医学杂志 2024年第6期49卷 701-710页

作者：李玉岩梁莹莹周洁信车飞付金霞齐齐哈尔医学院附属第二医院神经内科黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院附属第二医院心血管内科黑龙江齐齐哈尔161006

目的探讨不稳定颈动脉粥样硬化斑块的差异表达基因(DEGs)及其分子相互作用。方法从基因表达数据库(GEO)和欧洲生物信息学研究所数据库下载颈动脉斑块患者的基因表达数据集GSE41571、GSE118481和E-MTAB-2055。采用基因本体生物学过程(GO-... 详细信息

目的探讨不稳定颈动脉粥样硬化斑块的差异表达基因(DEGs)及其分子相互作用。方法从基因表达数据库(GEO)和欧洲生物信息学研究所数据库下载颈动脉斑块患者的基因表达数据集GSE41571、GSE118481和E-MTAB-2055。采用基因本体生物学过程(GO-BP)富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析、蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络、miRNAs/转录因子与靶基因的相互关系及药物-基因相互作用等方法,分析至少两个数据集中不稳定颈动脉斑块的共调控DEGs。采用定量实时PCR(qRT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测颈动脉粥样硬化斑块患者58例的颈动脉斑块和血浆中部分DEGs的表达水平。结果GO富集分析显示,不稳定颈动脉斑块的DEGs主要富集在与炎症反应相关的基因和细胞外基质结构基因;KEGG富集分析显示,不稳定颈动脉斑块中上调的DEGs富集于细胞外基质受体相互作用、PI3K-Akt、Hippo信号通路及转化生长因子-β(TGF-β)信号通路,下调的DEGs主要富集于溶酶体、吞噬体及趋化因子过程。PPI网络分析结果显示,COL1A2、COL4A2、胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)、COL4A5、C1QA、CXCL10、CXCL2、CXCR4和CSF1R等可能在PPI网络中起重要作用。药物-基因相互作用的预测显示,CSF1R的药物相互作用最多,CXCL2受药物拮抗程度最高,IGFBP6受药物激活程度最高。qRT-PCR检测结果显示,与稳定斑块组比较,不稳定斑块组IGFBP6表达水平明显降低(P<0.001)。ELISA法检测结果显示,不稳定斑块组血浆IGFBP6浓度明显低于稳定斑块组(P<0.0001)。受试者工作特征曲线分析结果显示,采用血浆IGFBP6水平鉴别不稳定斑块的曲线下面积为0.894(95%CI 0.810~0.977),截断值为142.08 ng/ml。结论IGFBP6可能成为预测不稳定颈动脉斑块的重要生物标志物。

关键词：动脉粥样硬化卒中生物信息学胰岛素样生长因子结合蛋白6

黄连解毒汤调节HIF-1α/VEGF信号通路改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 59-65页

作者：张英华吕翰林周建文樊丽李洋齐齐哈尔医学院精神卫生学院黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院附属第一医院黑龙江齐齐哈尔161041 齐齐哈尔医学院医药科学研究院黑龙江齐齐哈尔161006

目的:基于缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路探讨黄连解毒汤(HLJDT)对淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)双转基因小鼠学习记忆的影响。方法:40只5月龄APP/PS1小鼠,分为模型组、多奈哌齐组(0.001 g·kg^(-1)·d^... 详细信息

目的:基于缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路探讨黄连解毒汤(HLJDT)对淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)双转基因小鼠学习记忆的影响。方法:40只5月龄APP/PS1小鼠,分为模型组、多奈哌齐组(0.001 g·kg^(-1)·d^(-1))、黄连解毒汤低、中、高剂量(1.5、3、6 g·kg^(-1)·d^(-1)),C57BL/6小鼠8只为正常组。连续给药45 d,进行Morris水迷宫实验,测定脏器指数,透射电镜观察小鼠脑血管内皮细胞形态结构,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马区APP、HIF-1α、VEGF、VEGFA及脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测APP、HIF-1α、VEGF mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠潜伏期明显延长(P血管内皮细胞核固缩,胞质不丰富,海马区APP、HIF-1α、VEGF、VEGFA蛋白表达增加(P血管内皮细胞细胞器结构较清晰,海马区APP、HIF-1α、VEGF、VEGFA蛋白表达降低(P<0.05),BDNF蛋白表达增加(P<0.05),APP、HIF-1α、VEGF mRNA表达降低(P<0.05)。结论:HLJDT可通过降低HIF-1α和VEGF表达来提高小鼠学习记忆能力,从而发挥对神经的保护作用。

关键词：黄连解毒汤淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)双转基因小鼠缺氧诱导因子-1α(HIF-1α) 血管内皮生长因子(VEGF)

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基于深度学习的淋巴细胞热图分析及红细胞计数预测老年原发性肝癌患者术后生存期的临床价值

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中国老年学杂志 2024年第8期44卷 1813-1816页

作者：陈大同孙跃梁明辉金成李公启许东滨张立平齐齐哈尔医学院黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院附属第三医院

目的探讨深度学习的淋巴细胞热图分析及红细胞计数预测老年原发性肝癌患者术后生存期的临床价值。方法纳入68例老年原发性肝癌患者(肝癌组),分析其临床病理资料,并纳入同期健康体检的50名健康人员作为对照组,检测两组血清红细胞计数(RBC... 详细信息

目的探讨深度学习的淋巴细胞热图分析及红细胞计数预测老年原发性肝癌患者术后生存期的临床价值。方法纳入68例老年原发性肝癌患者(肝癌组),分析其临床病理资料,并纳入同期健康体检的50名健康人员作为对照组,检测两组血清红细胞计数(RBC)及淋巴细胞热图分布(LymHM)表达,探讨其对肝癌患者术后生存期的预测价值。结果肝癌组RBC数量明显低于对照组,LymHM表达明显高于对照组(P血管侵犯、门静脉癌栓、有复发生存患者RBC数量明显降低,LymHM表达明显升高(P血管侵犯、门静脉癌栓、复发生存与RBC数量呈负相关,与LymHM表达呈正相关(P<0.05)。经绘制受试者工作特征(ROC)曲线,RBC结合血清LymHM表达对预测患者术后复发生存的曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度及约登指数明显高于单一指标(P<0.05)。结论红细胞计数与LymHM表达与老年原发性肝癌患者临床病理特征有较大相关性,采用RBC结合LymHM分布表达可有效预测患者术后无复发生存期,临床价值高。

关键词：深度学习淋巴细胞热图红细胞计数原发性肝癌生存期

乳腺癌核仁磷蛋白乙酰化及其修饰位点突变体的构建和表达

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解剖学报 2024年第2期55卷 196-202页

作者：郝经伟潘婷李月朱文斌段文博刘立琨岳丽玲刘云龙高秀丽齐齐哈尔医学院医学技术学院黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院药学院黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院医药科学研究院肿瘤分子生物学研究室黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院附属第二医院肿瘤外科黑龙江齐齐哈尔161006

目的明确女性乳腺癌中核仁磷蛋白(NPM)乙酰化修饰水平,并通过修饰位点突变体的构建探讨其功能。方法蛋白质修饰组学方法检测对比人乳腺癌组织及癌旁正常组织(各3例)NPM乙酰化水平及乙酰化位点;基因定点突变PCR构建NPM乙酰化突变体,限制... 详细信息

目的明确女性乳腺癌中核仁磷蛋白(NPM)乙酰化修饰水平,并通过修饰位点突变体的构建探讨其功能。方法蛋白质修饰组学方法检测对比人乳腺癌组织及癌旁正常组织(各3例)NPM乙酰化水平及乙酰化位点;基因定点突变PCR构建NPM乙酰化突变体,限制性内切酶(DpnI)消化及大肠埃希菌转化获得特异性突变体重组质粒;双酶切与测序验证各突变体序列准确性;瞬时转染及RT-PCR方法检测各突变体过表达效果。Western blotting验证NPM乙酰化水平,蛋白质定量组学及生物信息学分析NPM乙酰化功能。结果乳腺癌组织样本中NPM第27及第32位赖氨酸乙酰化水平分别为癌旁正常组织的2.76及2.22倍;构建的NPM乙酰化位点突变体与野生型NPM分子量一致且出现预期突变位点;转染NPM各突变体的BT-549细胞相应NPM mRNA表达水平明显升高。随着野生型NPM表达水平增加,蛋白乙酰化水平增加,27位赖氨酸发生负向突变后,修饰水平下降。NPM乙酰化可使BT-549细胞中101种蛋白表达水平发生明显变化,上述蛋白在细胞大分子生物合成,以DNA为模板的转录过程,RNA生物合成以及RNA代谢过程中富集。结论乳腺癌NPM呈高乙酰化水平并可能在细胞大分子生物合成,转录过程,RNA生物合成以及RNA代谢过程中发挥关键功能。

关键词：乳腺癌核仁磷蛋白乙酰化定点突变蛋白质组学人

咖啡因通过FAK/AKT/ROCK通路调控人脑胶质瘤U-373MG细胞的恶性生物学行为

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年第6期31卷 573-578页

作者：徐加志张芸陈大刚高风全任德帅吴卫东杜妍王娜齐齐哈尔医学院附属第三医院神经外科黑龙江齐齐哈尔161000 齐齐哈尔医学院临床心理学教研室黑龙江齐齐哈尔161000

目的:探讨咖啡因通过调节FAK/AKT/ROCK信号通路来影响人脑胶质瘤U-373MG细胞的增殖、迁移和侵袭能力。方法:常规培养U-373MG细胞,将其分为对照组、咖啡因低剂量(1 mmol/L)组、咖啡因高剂量(2 mmol/L)组、PF573228组(FAK抑制剂,1μmol/L... 详细信息

目的:探讨咖啡因通过调节FAK/AKT/ROCK信号通路来影响人脑胶质瘤U-373MG细胞的增殖、迁移和侵袭能力。方法:常规培养U-373MG细胞,将其分为对照组、咖啡因低剂量(1 mmol/L)组、咖啡因高剂量(2 mmol/L)组、PF573228组(FAK抑制剂,1μmol/L)、咖啡因高剂量+SC79组(AKT激活剂,8mg/L)。用CCK-8法、Transwell小室实验、流式细胞术和WB法分别检测各组U-373MG细胞的增殖、迁移、侵袭及凋亡,以及U-373MG细胞中p-FAK、p-AKT、p-ROCK、Ki67、MMP-9蛋白表达水平。建立U-373MG细胞裸鼠移植瘤模型,观察咖啡因对移植瘤生长的影响,WB法检测移植瘤组织中相关蛋白的表达。结果:咖啡因、PF573228可显著抑制U-373MG细胞的增殖、迁移、侵袭能力,促进U-373MG细胞凋亡,抑制p-FAK、p-AKT、p-ROCK、Ki67、MMP-9蛋白的表达(均P<0.05),SC79则可部分逆转咖啡因对U-373MG细胞的作用(均P<0.05)。咖啡因可显著抑制移植瘤的生长及移植瘤组织中上述相关蛋白的表达(均P<0.05)。结论:咖啡因可通过抑制FAK/AKT/ROCK信号通路抑制U-373MG细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进其凋亡。

关键词：咖啡因人脑胶质瘤 U-373MG细胞增殖迁移侵袭凋亡 FAK/AKT/ROCK通路

阿司匹林通过铁死亡减轻氧糖剥夺复氧的小鼠海马神经元细胞损伤的作用机制

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中华老年心脑血管病杂志 2024年第8期26卷 960-964页

作者：胡玉娇丛珊赵磊董春雪王冬梅王楠楠毛颖齐齐哈尔医学院附属第二医院神经内二科 161006 齐齐哈尔医学院附属第二医院药学部 161006 齐齐哈尔医学院附属第二医院全科医学科 161006 齐齐哈尔医学院附属第二医院康复医学科161006

目的探究阿司匹林通过调节铁死亡对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的小鼠神经元HT22细胞损伤的作用。方法体外培养小鼠海马神经元HT22细胞,选取HT22细胞分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、... 详细信息

目的探究阿司匹林通过调节铁死亡对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的小鼠神经元HT22细胞损伤的作用。方法体外培养小鼠海马神经元HT22细胞,选取HT22细胞分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组(n=3),除对照组外,其余4组建立OGD/R神经元细胞损伤模型,低、中、高剂量组分别给予阿司匹林100、200、400μg/ml处理。检测各组细胞活力及炎性因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)1β、IL-6水平;试剂盒检测超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽、活性氧、乳酸脱氢酶、Fe^(2+)、丙二醛水平;Western blot检测铁死亡相关蛋白溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 members 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)以及酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-coa synthase long chain family member 4,ACSL4)水平。结果模型组细胞活力明显低于对照组,差异有统计学意义(0.49±0.07 vs 1.00±0.12,P<0.01),低、中、高剂量组细胞活力明显高于模型组,差异有统计学意义(0.72±0.10 vs 0.49±0.07,P<0.05;0.87±0.10 vs 0.49±0.07,P<0.01;0.93±0.07 vs 0.49±0.07,P<0.01)。与对照组比较,模型组TNF-α、IL-1β、IL-6、活性氧、乳酸脱氢酶、Fe^(2+)、丙二醛、ACSL4蛋白表达明显升高,超氧化物歧化酶、抗氧化酶、谷胱甘肽、SLC7A11、GPX4蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,低、中、高剂量组TNF-α、IL-1β、IL-6、活性氧、乳酸脱氢酶Fe^(2+)、丙二醛、ACSL4蛋白表达明显降低,超氧化物歧化酶、抗氧化酶、谷胱甘肽、SLC7A11、GPX4蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论阿司匹林可以通过调节铁死亡,减轻OGD/R诱导的小鼠神经元HT22细胞损伤,且呈剂量依赖性。

关键词：脑缺血再灌注损伤阿司匹林铁死亡海马神经元氧糖剥夺/复糖复氧

血清Hcy及颈动脉斑块易损性评分与老年脑小血管病患者脑白质病变和认知功能障碍的关系

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中国老年学杂志 2024年第13期44卷 3154-3158页

作者：张羽镝张成十王晓宇刘佳俊齐齐哈尔医学院附属第一医院急诊科黑龙江齐齐哈尔161041 齐齐哈尔医学院附属第一医院神经内科黑龙江齐齐哈尔161041

目的探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)及颈动脉斑块易损性评分与老年脑小血管病患者脑白质病变和认知功能障碍的关系。方法选取老年脑小血管病患者105例,根据脑白质病变情况分为脑白质病变组(Fazekas分级1~3级)50例,非脑白质病变组(Fazekas分... 详细信息

目的探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)及颈动脉斑块易损性评分与老年脑小血管病患者脑白质病变和认知功能障碍的关系。方法选取老年脑小血管病患者105例,根据脑白质病变情况分为脑白质病变组(Fazekas分级1~3级)50例,非脑白质病变组(Fazekas分级0级)55例。根据认知功能障碍发生情况分为认知功能障碍组[简易智力状态评估(MMSE)量表得分0~26分]38例,无认知功能障碍组(MMSE得分27~30分)67例。采集患者入院后24 h内的空腹肘静脉血,检测Hcy、肌酐、血脂指标、空腹血糖水平。根据颈动脉超声检查结果进行颈动脉斑块易损性评分。结果脑白质病变组男性比例、年龄明显高于非脑白质病变组(P血管病患者脑白质病变的独立影响因素。认知功能障碍组年龄明显高于无认知功能障碍组(P血管病患者认知功能障碍发生的独立影响因素。老年脑小血管病患者血清Hcy与颈动脉斑块易损性评分呈正相关(r=0.817,P=0.004)。血清Hcy及颈动脉斑块易损性评分对老年脑小血管病患者脑白质病变、认知功能障碍具有较高的预测价值,联用的预测价值最高。结论血清Hcy及颈动脉斑块易损性评分与老年脑小血管病患者脑白质病变和认知功能障碍密切相关,且联用具有较高的预测价值。

关键词：脑小血管病同型半胱氨酸颈动脉斑块易损性评分脑白质病变认知功能障碍

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非动脉粥样硬化性周围动脉疾病

中华心血管病杂志 2024年第8期52卷 960-965页

作者：胡兰婷陈锦仪吕东堯刘震杰浙江大学医学院附属第二医院血管外科杭州310009

非动脉粥样硬化性周围动脉疾病是一类表现为下肢间歇性跛行的少见病, 容易漏诊误诊, 需要与下肢动脉硬化闭塞症进行鉴别。不同类型的非动脉粥样硬化性周围动脉疾病的发病机制、临床表现及诊治方式不同。该文介绍了非动脉粥样硬化性周围... 详细信息

非动脉粥样硬化性周围动脉疾病是一类表现为下肢间歇性跛行的少见病, 容易漏诊误诊, 需要与下肢动脉硬化闭塞症进行鉴别。不同类型的非动脉粥样硬化性周围动脉疾病的发病机制、临床表现及诊治方式不同。该文介绍了非动脉粥样硬化性周围动脉疾病的发病机制和诊治进展。

关键词：下肢周围动脉疾病动脉粥样硬化间歇性跛行动脉闭塞性疾病

腹主动脉钙化-8评分系统对药物涂层球囊扩张成形术后下肢动脉再狭窄或闭塞的预测作用

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中华医学杂志 2024年第5期104卷 332-336页

作者：蔡晶张振希乔彤李晓强王炜南京大学医学院附属鼓楼医院血管外科南京210008

目的探讨腹主动脉钙化-8(AAC-8)评分系统对药物涂层球囊(DCB)扩张成形术后下肢动脉再狭窄或闭塞的预测作用。方法回顾性收集2018年9月至2022年6月南京大学医学院附属鼓楼医院因下肢动脉硬化闭塞症行DCB扩张成形术的62例患者的临床资料,... 详细信息

目的探讨腹主动脉钙化-8(AAC-8)评分系统对药物涂层球囊(DCB)扩张成形术后下肢动脉再狭窄或闭塞的预测作用。方法回顾性收集2018年9月至2022年6月南京大学医学院附属鼓楼医院因下肢动脉硬化闭塞症行DCB扩张成形术的62例患者的临床资料,其中男37例,女25例,年龄(73.9±11.3)岁。根据DCB扩张成形术后下肢动脉情况将患者分为两组:复发组(n=26)和通畅组(n=36)。采用logistic回归分析DCB扩张成形术后下肢动脉再狭窄或闭塞的相关因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析AAC-8评分对DCB扩张成形术后下肢动脉再狭窄或闭塞的预测价值。结果通畅组术后随访时间[M(Q_(1),Q_(3))]为16.30(10.97,24.10)个月,复发组术后随访时间为9.03(6.98,15.31)个月。多因素logistic回归分析结果显示,AAC-8评分升高(OR=1.388,95%CI:1.067~1.806,P=0.015)是DCB扩张成形术后下肢动脉再狭窄或闭塞的相关因素。ROC曲线分析结果显示,AAC-8评分预测DCB扩张成形术后下肢动脉再狭窄或闭塞的曲线下面积(AUC)为0.687(95%CI:0.550~0.824,P=0.013),cut-off值为5.5分,灵敏度为65.4%,特异度为69.5%。结论AAC-8评分升高是DCB扩张成形术后下肢动脉再狭窄或闭塞的相关因素。cut-off值为5.5分时,其预测DCB扩张成形术后下肢动脉再狭窄或闭塞的灵敏度为65.4%,特异度为69.5%。

关键词：动脉硬化,闭塞性腹主动脉钙化积分药物涂层球囊预测