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肺癌细胞膜涂层的DOX和IR820的光热敏感型仿生脂质体用于癌症的化学-光热-光动力治疗

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药学学报 2024年第5期59卷 1430-1440页

作者：李士壮阚玉萍陈铭苏慧阎雪莹黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040 哈尔滨市二四二医院黑龙江哈尔滨150040

本研究构建以多柔比星(doxorubicin,DOX)为模型药物、新吲哚菁绿(IR820)为光敏剂、温度敏感脂质体(temperature sensitive liposomes,TSL)为载体,H460-NCI人大细胞肺癌细胞膜涂层的光热敏感脂质体(DOX-IR820-TSL@CCM),用于化学-光热治疗-光动力治疗的多途径高效肿瘤靶向作用。采用逆向蒸发法制备DOX-IR820-TSL,通过裂解、破碎、离心等方法制备癌细胞膜(cancer cell membrane,CCM),采用纳米膜挤压法制备DOX-IR820-TSL@CCM;并对上述脂质体进行表征。最终确定DOX-IR820-TSL的载药条件如下:有机相与水相比例为4.02,二棕榈酰磷脂酰胆碱(dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine,DPPC)用量为10.04 mg,药脂比为0.12DOX-IR820-TSL显著相变温度(T_(m))为43.05℃,DOX-IR820-TSL@CCM平均粒径为153.4 nm,PDI为0.279,zeta电位为-26.2 mV。透射电子显微镜图像在图中显示出均匀的球形结构和半透明膜层。在近红外光照射下,药物释放率达到了63.98%,具有可调节的光热转化能力和产生活性氧的能力。通过SDS-PAGE电泳、Western blot、细胞毒性实验和细胞摄取实验,证明了细胞膜涂层的设计能够很好地保留CD47、N-cadherin、CD44、CD326等相关功能蛋白使DOX-IR820-TSL@CCM具备良好的免疫逃逸、同源黏附和同源靶向作用。本文制备了具有伪装特性和肿瘤靶向性的DOX-IR820-TSL@CCM,可作为一种协同治疗诊断平台用于未来的肺癌治疗。所有动物研究方案均已通过黑龙江中医药大学动物伦理委员会批准(编号为:2022121011)。

关键词：光热敏感脂质体癌细胞膜仿生新吲哚菁绿化学治疗-光热治疗-光动力治疗

质谱技术分析表征多糖类化合物结构的应用进展

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食品科学 2024年第14期45卷 352-365页

作者：李蓝艳于剑平张子依张欢李超汲晨锋哈尔滨商业大学药物工程技术研究中心黑龙江哈尔滨150076 哈尔滨商业大学抗肿瘤天然药物教育部工程研究中心黑龙江哈尔滨150076 哈尔滨工业大学生命科学与技术学院黑龙江哈尔滨150001

多糖是一类分子结构复杂且庞大的天然大分子聚合物,其结构与生物活性紧密相关,但传统分析方法对多糖精细结构的表征信息有限。质谱技术是一种通过测量离子质荷比确定质量进而推算分子结构的分析方法,作为多糖结构分析的有力工具可以提... 详细信息

多糖是一类分子结构复杂且庞大的天然大分子聚合物,其结构与生物活性紧密相关,但传统分析方法对多糖精细结构的表征信息有限。质谱技术是一种通过测量离子质荷比确定质量进而推算分子结构的分析方法,作为多糖结构分析的有力工具可以提供包括分子质量、聚合度、单糖组成、糖苷键类型、糖基排列顺序、取代基团位点等比较丰富的信息,对多糖结构的表征具有独特优势。本文归纳了多糖的质谱裂解一般性规律,介绍了多种不同类型质谱的检测原理、特点及其联用技术在多糖结构解析中的代表性应用,包括电子轰击源、快原子轰击源、电喷雾电离源、基质辅助激光解吸离子源、实时直接分析源、离子淌度、串联等质谱技术,并进一步对新型质谱技术解析多糖结构的未来应用进行了展望。本文旨在通过总结质谱技术的应用,为多糖类化合物的质量标准、结构表征、药效学、药动学、构效关系等基础性研究工作以及多糖类食品、保健食品、临床药物的开发创制提供科学参考。

关键词：多糖质谱结构解析应用

五味子非药用部位活性成分和药理作用研究进展

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中草药 2024年第9期55卷 3179-3189页

作者：刘继艳王冰李超宇于淼哈尔滨商业大学药物工程技术研究中心黑龙江哈尔滨150076 哈尔滨商业大学食品工程学院黑龙江哈尔滨150076 国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心黑龙江哈尔滨150076 黑龙江省肿瘤预防与抗肿瘤药物研究重点实验室黑龙江哈尔滨150076 哈尔滨商业大学药物研究所博士后科研工作站黑龙江哈尔滨150076

五味子Schisandra chinensis始载于《神农本草经》,具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的功效。在《中国药典》2020年版中规定五味子的药用部位是干燥成熟果实,含有木脂素、多糖、萜类及黄酮等化合物,具有调节中枢神经系统和内分泌系统... 详细信息

五味子Schisandra chinensis始载于《神农本草经》,具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的功效。在《中国药典》2020年版中规定五味子的药用部位是干燥成熟果实,含有木脂素、多糖、萜类及黄酮等化合物,具有调节中枢神经系统和内分泌系统、抗肿瘤、抗氧化、抗炎、抑菌等作用。近年来研究显示五味子藤茎、叶、果梗和根等非药用部位同样含有木脂素、多糖、萜类及黄酮等活性成分,其中一些活性成分含量高于药用部位,但非药用部位常作为杂质被废弃,不仅未得到充分利用还造成资源浪费。基于已公开发表的文献,对五味子非药用部位的活性成分和药理作用进行总结,为深入开发五味子非药用部位提供参考和数据支撑,为五味子非药用部位的综合利用打下基础。

关键词：五味子非药用部位木脂素多糖中枢神经系统抗肿瘤抗氧化

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人布鲁氏菌病致病机制及治疗研究进展

微生物学通报 2024年第8期51卷 2809-2818页

作者：宫伟葛晶雪尹世辉李梦奇周澳邢智锋孙巍黑龙江省疾病预防控制中心黑龙江哈尔滨150030

人布鲁氏菌病(布病)是由兼性细胞内病原体布鲁氏菌(Brucella)引起的一种人畜共患病。人常通过直接接触受感染的动物或食用动物产品而获得感染。布鲁氏菌病因其临床表现不特异,治疗不及时易转为慢性,严重影响患者的生存质量。因此,了解... 详细信息

人布鲁氏菌病(布病)是由兼性细胞内病原体布鲁氏菌(Brucella)引起的一种人畜共患病。人常通过直接接触受感染的动物或食用动物产品而获得感染。布鲁氏菌病因其临床表现不特异,治疗不及时易转为慢性,严重影响患者的生存质量。因此,了解病原体致病特点、与宿主细胞的相互作用机制和治疗现状可为临床诊疗提供新方向。本文阐述了布鲁氏菌感染机制、宿主(人)先天性及适应性反应机制,以及目前布鲁氏菌病临床特点和治疗方略,为人布鲁氏菌防治提供参考。

关键词：布鲁氏菌布鲁氏菌病免疫系统治疗

石蒜碱通过激活STMN1阻滞人乳腺癌MCF-7细胞周期分子机制研究

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中草药 2024年第15期55卷 5125-5134页

作者：冯洁綦峥薛沁冰李超宇赵梓桐王昊刘婷付叶珊王冰于淼哈尔滨商业大学药物工程技术研究中心黑龙江哈尔滨150076 哈尔滨商业大学食品工程学院黑龙江哈尔滨150076 国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心黑龙江哈尔滨150076 黑龙江省肿瘤预防与抗肿瘤药物研究重点实验室黑龙江哈尔滨150076 西交利物浦大学慧湖药学院江苏苏州215123

目的探讨石蒜碱通过激活微管相关基因STMN1阻滞人乳腺癌MCF-7细胞周期相关分子机制。方法MCF-7细胞给予石蒜碱干预后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测G_(2)/M期细胞比例、磷酸化组蛋白H3(phosphorylated histone H3,p-H3... 详细信息

目的探讨石蒜碱通过激活微管相关基因STMN1阻滞人乳腺癌MCF-7细胞周期相关分子机制。方法MCF-7细胞给予石蒜碱干预后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测G_(2)/M期细胞比例、磷酸化组蛋白H3(phosphorylated histone H3,p-H3)表达;荧光显微镜观察石蒜碱对MCF-7细胞微管形态的影响;qRT-PCR检测MCF-7细胞周期、骨架及微管相关基因的表达;Western blotting检测MCF-7细胞内5个周期阻滞相关蛋白的表达。结果石蒜碱对MCF-7细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC_(50))为13.98μmol/L。石蒜碱呈剂量相关性地将MCF-7细胞阻滞于G_(2)/M期(P药物长春新碱。石蒜碱可下调5个信号传导相关基因,上调2个微管相关基因,下调2个M期相关基因,进而下调5个周期阻滞相关蛋白。相关性分析表明石蒜碱通过激活微管相关基因STMN1,导致微管动态平衡被破坏,最终导致M期阻滞。抑制STMN1基因后,石蒜碱无法将MCF-7细胞周期阻滞在M期。结论石蒜碱抑制MCF-7细胞增殖并通过促进微管解聚将其阻滞于M期,且阻滞M期的关键位点是基因STMN1,为未来药物设计和癌症治疗策略的探索提供了有价值的信息。

关键词：石蒜碱 MCF-7细胞乳腺癌 M期阻滞 STMN1 微管蛋白

基于转录组学和网络药理学探究清眩润目饮治疗干眼的作用机制

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国际眼科杂志 2024年第10期24卷 1529-1535页

作者：刘颖赵珊珊黄佳宇姚靖黑龙江中医药大学黑龙江省哈尔滨市150000 中国江苏省张家港市中医医院神经内科 215000 黑龙江中医药大学附属第一医院眼科黑龙江省哈尔滨市150000

目的:基于转录组学和网络药理学探究清眩润目饮(QRY)治疗干眼(DE)的作用机制,并通过干眼动物模型对QRY的药效和关键靶点进行实验验证。方法:运用RNA高通量测序(RNA-seq)技术检测干眼小鼠与正常小鼠的差异表达基因(DEGs),通过数据库筛选... 详细信息

目的:基于转录组学和网络药理学探究清眩润目饮(QRY)治疗干眼(DE)的作用机制,并通过干眼动物模型对QRY的药效和关键靶点进行实验验证。方法:运用RNA高通量测序(RNA-seq)技术检测干眼小鼠与正常小鼠的差异表达基因(DEGs),通过数据库筛选QRY有效成分及作用靶点,将二者重叠获取关键靶点后进行GO和KEGG富集分析,构建“药物-成分-靶点-信号通路”网络并分析蛋白质-蛋白质相互作用(PPI);自动物实验开始每7 d对小鼠行Schirmer I试验(SⅠt)、泪膜破裂时间检测(BUT)、角膜荧光染色试验(FL)检查;HE染色观察小鼠角膜组织病理变化;ELISA、Western blot、qRT-PCR验证小鼠角膜组织中核心靶点的蛋白和mRNA表达水平。结果:获得DEGs共2234个、QRY有效成分233个及相关靶点457个,获得关键靶点64个,GO与KEGG分析结果提示QRY与炎症反应密切相关,通过PPI网络筛选出白介素-6(IL-6)等19个核心靶点;QRY组的SⅠt、BUT、FL结果与模型组相比有差异(均P治疗作用。

关键词：清眩润目饮干眼转录组学网络药理学炎症

益生菌及其代谢产物调控胰高血糖素样肽-1缓解2型糖尿病的研究进展

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食品科学 2024年第12期45卷 292-303页

作者：程之梁张钰龙杨涵哈惠王潆笛陈菲菲刘飞焦月华东北农业大学食品学院乳品科学教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150030 黑龙江中医药大学药物安全性评价中心黑龙江哈尔滨150040

2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)是一种由碳水化合物摄入与代谢不平衡导致的慢性代谢性疾病,是当前全球最难治疗的代谢性疾病之一。患者主要表现出高血糖、胰岛素分泌不足、胰岛素抵抗、多食多饮多尿等症状。T2DM常伴随着很... 详细信息

2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)是一种由碳水化合物摄入与代谢不平衡导致的慢性代谢性疾病,是当前全球最难治疗的代谢性疾病之一。患者主要表现出高血糖、胰岛素分泌不足、胰岛素抵抗、多食多饮多尿等症状。T2DM常伴随着很多并发症如动脉粥样硬化、肾功能损伤、非酒精性脂肪性肝病等。胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)是一种由31个氨基酸组成的多肽,主要用于维持体内葡萄糖稳态和缓解T2DM,但是其半衰期较短,在体内很容易被降解。本文先介绍了益生菌及其对宿主体内GLP-1有调控作用的代谢产物,并介绍了GLP-1对T2DM的缓解作用,包括GLP-1与T2DM的联系、二甲双胍与GLP-1激动剂的临床应用、GLP-1对T2DM缓解作用的不足以及相关益生元对GLP-1含量的调控;最后介绍了益生菌及其代谢产物对GLP-1的调控机制,其中包括短链脂肪酸、胆汁酸、色氨酸及其衍生物和胞外多糖,以期为益生菌及其代谢产物调控宿主GLP-1的产生与释放,并对T2DM的缓解作用方面的研究提供一定的参考。

关键词： 2型糖尿病益生菌胰高血糖素样肽-1 代谢产物

石蒜碱调控线粒体氧化损伤介导人乳腺癌细胞自噬及凋亡作用机制

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中草药 2024年第12期55卷 4056-4064页

作者：辛国松侯妍秀王毛毛于淼季宇彬李文兰李海茹哈尔滨商业大学药物工程技术研究中心黑龙江哈尔滨150076 国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心黑龙江哈尔滨150076 哈尔滨医科大学附属第二医院黑龙江哈尔滨150086

目的研究石蒜碱介导人乳腺癌MDA-MB-231细胞自噬及凋亡的作用机制。方法采用CCK-8法检测石蒜碱对MDA-MB-231细胞增殖的影响;倒置显微镜、荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)观察细胞形态;细胞... 详细信息

目的研究石蒜碱介导人乳腺癌MDA-MB-231细胞自噬及凋亡的作用机制。方法采用CCK-8法检测石蒜碱对MDA-MB-231细胞增殖的影响;倒置显微镜、荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)观察细胞形态;细胞集落实验检测细胞克隆形成能力;划痕实验检测细胞迁移能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、线粒体膜电位;LSCM检测线粒体膜通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)开放情况;Western blotting检测线粒体自噬相关蛋白[线粒体内膜转位酶(translocase of inner membrane,TIM)、线粒体外膜转位酶(translocase of outer membrane,TOM)、E3泛素连接酶(E3 ubiquitin protein ligase,PARKIN)、PTEN诱导的激酶1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)、微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3-B)、p62]和凋亡相关蛋白[半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、细胞色素C(cytochrome-C,Cyt-C)]的表达。结果石蒜碱对MDA-MB-231细胞具有生长抑制作用,其半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值为6.21μmol/L;石蒜碱能够改变细胞形态,部分细胞出现凋亡迹象;石蒜碱能够显著抑制细胞的增殖和迁移能力(P<0.01);与对照组比较,随着石蒜碱给药浓度的增加,细胞凋亡率随之升高(P<0.01),ROS水平升高(P<0.01),线粒体膜电位下降(P<0.01),MPTP开放(P<0.01);石蒜碱给药48 h后,细胞内TIM、TOM、p62和Bcl-2蛋白表达量下调(P<0.01),PARKIN、PINK1、LC3-B、Caspase-3、Bax和Cyt-C蛋白表达量上调(P<0.01),且呈浓度相关性。结论石蒜碱对MDA-MB-231细胞具有生长抑制作用,并可通过调控线粒体氧化损伤介导MDA-MB-231细胞的自噬及凋亡。

关键词：石蒜碱乳腺癌线粒体氧化损伤细胞自噬细胞凋亡

越橘叶黄酮脂质体制备及对HepG2细胞的影响

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精细化工 2024年第9期41卷 1996-2005,2030页

作者：成圆丁淼王思宇樊梓鸾东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江省森林食品资源利用重点实验室黑龙江哈尔滨150040

对红豆越橘叶采用超声辅助提取和AB-8型大孔树脂纯化获得了黄酮含量高的馏分(L6),经HPLC-MS分析越橘叶黄酮为主要成分。以L6为芯材,采用乙醇注入法制备了脂质体L6-Lips,经不同质量分数羧甲基壳聚糖(CMCS)水溶液修饰制备了CMCS-L6-Lips... 详细信息

对红豆越橘叶采用超声辅助提取和AB-8型大孔树脂纯化获得了黄酮含量高的馏分(L6),经HPLC-MS分析越橘叶黄酮为主要成分。以L6为芯材,采用乙醇注入法制备了脂质体L6-Lips,经不同质量分数羧甲基壳聚糖(CMCS)水溶液修饰制备了CMCS-L6-Lips。通过FTIR、粒径分析、Zeta电位和透析法对CMCS-L6-Lips进行了表征,探究其在不同pH下体外释放能力及对HepG2细胞抑制能力。结果表明,L6的黄酮含量可达899.44 mg/g,主要含有芦丁、槲皮素、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷、槲皮素3-O-鼠李糖苷-7-O-葡萄糖苷、圣草酚-7-O-葡萄糖苷、儿茶素和绿原酸7种成分;CMCS溶液质量分数与CMCS-L6-Lips粒径、包封率、Zeta电位具有相关性。添加质量分数为0.4%CMCS水溶液时脂质体表面修饰效果最佳,此时,Zeta电位为–35.65 mV,表明CMCS成功附着在L6-Lips表面,且CMCS-L6-Lips颗粒之间的排斥力明显更强,稳定性更高。CMCS-L6-Lips具有pH敏感性,在pH=4.0时体外释放能力最高,动力学方程符合Weibull模型,为骨架溶蚀释放;CMCS-L6-Lips可有效抑制HepG2细胞增殖,减缓细胞迁移能力并阻滞细胞停留在S期和G2期。脂质体包封有效提高了越橘叶黄酮的溶解性,使细胞对药物摄取的能力提升,而CMCS的修饰增加了脂质体的靶向能力,有利于治疗肿瘤。

关键词：越橘叶黄酮 HPLC-MS 脂质体 pH敏感型 HepG2细胞动力学方程活性跟踪法医药原料

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